XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法
一、简介X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色，因此常用于转基因筛选试验中，如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。分子 式为C14H15BrClNO6，分子量为408.63，CAS Number 7240-90-6。X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物，水解后呈蓝色。基于这个特点，pUC系列载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组 体。二、使用方法 ：首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存)，然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200 μl的上述溶液、100......阅读全文
Screening－Bacterial－Colonies－Using－Xgal－and－IPTG:－αComplementation
实验概要 α-complementation occurs when two inactive fragments of E. coli β-galactosidase associate to form a functional enzyme. Many plasmid
用Xgal和IPTG筛选细菌菌落（α互补）
实验方法原理 显色底物 X-gal 可与细菌培养物混合，与溶化的顶层琼脂混合后铺于选择性培养板。实验材料 重组质粒转化的 E.coli试剂、试剂盒 IPTG 溶液X-gal 溶液仪器、耗材 LB 或 YT 琼脂板LB 或 YT 顶层琼脂恒温块木制牙签或接种环实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶剂IPT
用Xgal和IPTG筛选细菌菌落（α互补）
实验方法原理 显色底物 X-gal 可与细菌培养物混合，与溶化的顶层琼脂混合后铺于选择性培养板。 实验材料 重组质粒转化的 E.coli
用Xgal和IPTG筛选细菌菌落（α互补）
显色底物 X-gal 可与细菌培养物混合，与溶化的顶层琼脂混合后铺于选择性培养板。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理显色底物 X-gal 可与细菌培养物混合，与溶化的顶层琼脂混合后铺于选择性培养板。实验材料重组质粒转化的 E.coli试剂、试剂盒IPTG 溶液X-gal 溶
XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法
一、简介 X-Gal在&beta；-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色，因此常用于转基因筛选试验中，如蓝白斑筛选或&beta；-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。 分子 式为C14H15BrClNO6，分子量为408.63，
XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法
一、简介 X-Gal在&beta；-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色，因此常用于转基因筛选试验中，如蓝白斑筛选或&beta；-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。 分子 式为C14H15BrClNO6，分子量为408.63，
XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法
一、简介X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色，因此常用于转基因筛选试验中，如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。 分子 式为C14H15BrClNO6，分子量为408.63，CAS Number 7240-90-6。
XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法
一、简介X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色，因此常用于转基因筛选试验中，如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。分子 式为C14H15BrClNO6，分子量为408.63，CAS Number 7240-90-6。X
2.5％－X－gal（5溴4氯3吲哚－β半乳糖苷）配制方法
溶解25mg的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20℃。
如何精确控制反应釜的温度
一、简介 X-Gal在&beta；-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色，因此常用于转基因筛选试验中，如蓝白斑筛选或&beta；-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。 分子 式为C14H15BrClNO6，分子量为408.63，
蓝白斑筛选
实验中，通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素，这样，一次筛选可以判断出：未转化的菌不具有抗性，不生长；转化了空载体，即未重组质粒的菌，长成蓝色菌落；转化了重组质粒的菌，即目的重组菌，长成白色菌落。目前很多实验室省去蓝白斑筛选的步
表达β半乳糖苷酶噬菌体的噬菌斑分析
材料：LB或NZCYM顶层琼脂或琼脂糖，含有X-gal对于3ml顶层琼脂，加40ul 2%X-gal。X-gal要在临用前才加入已冷却的顶层琼脂（47℃）中。大肠杆菌铺平板细菌只有不是β-半乳糖苷酶的过量表达株，可采用任何支持特异性λ噬菌体裂解生长的大肠杆菌。细菌染色体上单拷贝lacZ基因的存在不影
骨组织βgal免疫染色实验技术方法
ß-gal Staining:Reagents:0.1M Phosphate Buffer (pH 7.3):0.1M Sodium Phosphate monobasic115ml0.1M sodium phosphate dibasic385mlTotal Volume500 mlFix sol
Transformation－of－Electrocompetent－E.－coli－with－Blue/White－selection
Desalt DNA template by EtOH precipitation in NaOAc followed by at least 2x washes with 70% EtOH. Resuspend in 5 - 15 µL of sterile H2O.Rinse cuvettes
Cell－Staining－for－SenescenceAssociated－betaGalactosidase－－Activity
DescriptionCell Staining for Senescence-Associated â-Galactosidase (SA-â-Gal) Activity Procedure1. Carefully remove the growth media from the cell cul
双杂交和其他双成分系统实验（四）
21. 测定转录活化。这个实验可以利用牙签重新划线培养或利用多支管/蛙形器来进行，在分析大量阳性克隆时，多支管/蛙形器是非常有用的（有关蛙形器的详细情况请参见图 18-10)。1) 通过直接划线培养测定a. 使用一个平头牙签分别在下面的 4 个平板上复制和主板上相同的栅格。使用相同的牙签在四个平板上
通过相互作用交配确定识别特异性实验
实验方法原理 实验材料 质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒 10 cm 完全极限（CM） 缺失成分培养基平板YPD 平板 X-gal 平板仪器、耗材 30℃ 培养箱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 用乙酸锂转化法将单个肽适配体捕获质粒与对照质粒（pJG4-5）转化人 EG
通过相互作用交配确定识别特异性实验
实验材料质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒10 cm 完全极限（CM） 缺失成分培养基平板YPD 平板 X-gal 平板仪器、耗材30℃ 培养箱实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 用乙酸锂转化法将单个肽适配体捕获质粒与对照质粒（pJG4-5）转化人 EGY48 （Mata）。
34招教你学会实验室常用贮存液的配制技巧（三）
27 5mol/L NaCl溶液 『配制方法』 在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L，分装后高压灭菌. 28 10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液 『配制方法』 在900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓
Betagal－staining－of－eukaryotic－cells－in－vitro
(Modification of methods of Dr. Seong-Seng Tan and Promega's "Protocols and Applications Guide")Cells previously transfected with a lac Z construc
重组质粒（dna－recombinant－plasmid）的连接、转化及筛选2
第二节 材料、设备及试剂一、 材料外源DNA 片段: 自行制备的带限制性末端的DNA 溶液,浓度已知; 载体DNA : pBS质粒(Ampr ,lacZ),自行提取纯化,浓度已知; 宿主菌: E. coli DH5α,或JM系列等具有α-互补能力的菌株。二、 设备恒温摇床，台式高速离心机，恒温水浴锅
Agar－Plates－for－Selection－of－Clones－in－Bacteria
Cloning of PCR productsStocks:LB Agar: Luria Broth after Lennox:per LiterTryptone10 gYeast Extract5 gSodium Chloride5 gBact. Agar15 g pH 7.0Autoclave
肽适配体的亲和力成熟实验
实验材料质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒Taq 聚合酶10×缓冲液引物dATPdGTPdCTPdTTPMgCl2MnCl2完全极限（CM） 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器30℃ 培养箱实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 制备
肽适配体的亲和力成熟实验
实验方法原理 实验材料 质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒 Taq 聚合酶10×缓冲液引物 dATPdGTP dCTPdTTPMgCl2 MnCl2完全极限（CM） 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材 PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器 30℃ 培养箱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「
相互作用蛋白鉴定实验——鉴定诱饵蛋白（LacZ的活性分析）
实验方法原理捕捉相互作用蛋白的第一步是构建能够表达 LexA 与目的蛋白的融合体的质粒。这种质粒转化到包含 LEU2 和lacZ 报道基因的报道酵母株中，并要行一系列的对照实验来鉴定所构建的诱饵蛋白是否适用，是否需要修饰，或是否应改变酵母菌报道条件。这些对照实验实现了诱饵蛋白在酵母菌中作为一种稳定蛋
蓝白斑筛选及其原理
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法： 是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使
分子克隆蛋白表达实验指南（十六）
Amp(50mg/ml) 溶解1g Amp于足量的水中，最后定容至20ml。分装成小份于-20℃贮存。常以20～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基，1:1000比例稀释 Kan(50mg/ml) 溶解1g Kan于足量的水中，最后定容至20ml
大肠杆菌转化实验所需材料和操作步骤
实验材料准备1. 器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5 ml 微量离心管，双面微量离心管架，干式恒温气浴（或恒温水浴锅），制冰机，恒温摇床，培养皿（已铺好固体LB-Amp），超净工作台，酒精灯，玻璃涂棒，恒温培养箱。2. 试剂培养基（不加抗菌素），LB培养基（加抗菌素），无菌ddH2O
大肠杆菌转化实验
实验方法原理 质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面，经过42摄氏度短时间的热击处理，促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代，待质粒上所带的抗菌素基因表达，就可以在含抗菌素的培养基中生长。
大肠杆菌转化实验
热击法CaCl2转化法一步法高效率电转化法实验方法原理质粒DNA或重组DNA粘附在细菌细胞表面，经过42摄氏度短时间的热击处理，促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代，待质粒上所带的抗菌素基因表达，就可以在含抗菌素的培养基中生长。实验材料质粒DNA