2×CTAB提取缓冲液使用说明
介绍:CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl) CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物而不沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。2×CTAB提取缓冲液成分:2%(w/v)CTAB,100mM Tris (pH 8.0),20mM EDTA,1.4 MNaCl,,0.2%(v/v) 还原剂(随用随加) 。储存条件:室温贮存一年。加入还原剂后4℃贮存。实验操作步骤:1. 2×即用型CTAB提取液配制:按照终浓度0.2% (v/v)加入还原剂,如100ml 2×CTAB提取缓冲液中加入0.2 ml 还原剂。加入还原剂后的2×即用型C......阅读全文
植物DNA的提取与定量分析实验
实验方法原理幼嫩组织的细胞处于旺盛的分裂阶段,细胞核较大而细胞质较少,核酸浓度高,且内含物少,次生代谢产物少,蛋白质及多糖类物质相对较少,在SDS或CTAB物质存在时,经机械研磨,使细胞破裂释放出内含物,提取的DNA、RNA的产量高,纯度好。提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活D
植物DNA的提取与定量分析实验
实验方法原理幼嫩组织的细胞处于旺盛的分裂阶段,细胞核较大而细胞质较少,核酸浓度高,且内含物少,次生代谢产物少,蛋白质及多糖类物质相对较少,在SDS或CTAB物质存在时,经机械研磨,使细胞破裂释放出内含物,提取的DNA、RNA的产量高,纯度好。提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活D
植物DNA的提取与定量分析实验
实验方法原理 幼嫩组织的细胞处于旺盛的分裂阶段,细胞核较大而细胞质较少,核酸浓度高,且内含物少,次生代谢产物少,蛋白质及多糖类物质相对较少,在SDS或CTAB物质存在时,经机械研磨,使细胞破裂释放出内含物,提取的DNA、RNA的产量高,纯度好。提取DNA所用的提取液、吸头、离心管等需要高压灭菌以灭活
土壤微生物总DNA提取及纯化
实验概要从土壤微生物中提取总DNA并纯化,高质量的DNA可用于后续文库构建。主要试剂TENP缓冲液(50 mmol/L Tris, 20 mmol/L EDTA, 100 mmol/L NaCl, 1% PVP, pH 10.0)PBS缓冲液(137 mmol/L NaCl, 2.7 mmol/L
Tris硼酸电泳缓冲液(5′TBE)使用说明
产品简介: Tris-硼酸电泳缓冲液简称 TBE。0.5´TBE 工作液中含有 45mM Tris-硼酸、1mM EDTA(pH8.0)。TBE 是常用的 DNA 电泳缓冲液。一般情况下,DNA 电泳常使用 0.5´TBE工作液,Tris-乙酸电泳缓冲液的优点:缓冲能力弱,适宜分离相对较小(小于 2
植物DNA提取实验
机械法 实验方法原理 这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破
RNAplant植物RNA提取试剂使用说明
简介:RNAplant试剂可从植物组织,特别是富含多酚或淀粉的植物组织中(如马铃薯块茎,白松松针或嫩苗,和西红柿叶等)提取高纯度的总RNA。每100 ml可处理100 mg组织200次。保存条件:室温运输,4℃保存,可保存6-12个月。 准备试剂:液氮,研钵,无RNase离心管,5 M NaCl(无
植物组织制备基因组DNA实验——CTAB法
实验方法原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。实验材料植物组织试剂、试剂盒CTAB液2-疏基乙醇TE高盐TE氯仿异戊醇仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1. 在所需量
植物DNA提取实验
实验方法原理 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化出DNA。实验材料 幼嫩的植物材料试剂、试剂盒 液氮CTAB抽提缓冲液NaACTris-HCl EDTA氯仿异戊醇TE buffer仪器、耗材 瓷研钵离心管离心机实验步骤 一
索氏提取器-2位
产品说明:BSXT-02型索氏提取器主要由加热抽提,溶剂回收和冷却三大部分组成。操作时可以根据试剂沸点和环境温度不同而调节加热温度,试样在抽提过程反复浸泡及抽提,从而达到快速提取目的。技术参数:1、应用范围:可用于提取粮食、饲料、油料、土壤等各种样品;2、每批提取样品数:2个;3、提取瓶容积:500
TRIZOL提取注意事项2
实验所需但试剂未提供的物品:* 氯仿 *异丙醇* 75%乙醇(用DEPC处理过的水配制)*无RNA酶的水或0.5% SDS溶液[配无RNA酶的水,将水加入无RNA酶的玻璃瓶中,加入DEPC至0.01% (v/v)。放置过夜并高压灭菌。SDS溶液必须用DEPC处理过并经高压灭菌的水配制。]1.匀浆化作
预处理法提取土壤DNA
预处理法提取土壤DNA实验试剂1. TENP缓冲液:50 mM Tris,20 mM EDTA,100mM NaCl,1% PVPP,pH102. PBS缓冲液:137 mM NaCl,2.7 mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4,pH7.43.
预处理法提取土壤DNA
实验概要 从土壤中提取DNA。主要试剂1. TENP缓冲液:50 mM Tris,20 mM EDTA,100mM NaCl,1% PVPP,pH102. PBS缓冲液:137 mM NaCl,2.7 mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4,pH7
漩涡振荡器在土壤微生物中提取总DNA并纯化应用
实验概要从土壤微生物中提取总DNA并纯化,高质量的DNA可用于后续文库构建。主要试剂TENP缓冲液(50 mmol/L Tris, 20 mmol/L EDTA, 100 mmol/L NaCl, 1% PVP, pH 10.0)PBS缓冲液(137 mmol/L NaCl, 2.7 mmol/L
植物组织提取高质量的DNA五大方法详解(一)
蛋白质纯化是旨在从细胞,组织或整个生物体中分离出一种或几种蛋白质。蛋白质纯化对于表征目的蛋白质的功能,结构和相互作用至关重要。蛋白质分离与提取是生命科学研究基础中的基础。植物细胞由于存在细胞壁的结构,因此比动物细胞蛋白的提取相对复杂。 提取植物中的DNA对植物基因工程,植
植物基因组DNA及总RNA提取技术2
(二)植物总RNA提取 (1)65°C水浴中预热15 mL CTAB提取液。 (2)液氮中研磨2~3 g新鲜或-70°C冷冻的材料。 (3)转移样品至有CTAB提取液的离心管中,立即激烈涡旋30s,短时放回 65°C水浴中(4~5 min)。 (4)加入等体积的氯仿/异戊醇并涡旋混合,10000 r
总RNA提取试剂(Trizol法)使用说明
『用途与特点』1. 本试剂盒可用于几乎所有新鲜或液氮保存的动物和植物组织、昆虫和细胞RNA的快速提取,通用性好。2. 无须DNA酶、RNA酶抑制剂等。3. 所需样品量少,并且可根据起始材料的多少自行调整。4. 操作简便,整个过程
植物基因组提取(CATB法)
一、实验目的 掌握植物总DNA的抽提方法和基本原理。学习根据不同的植物和实验要求设计和改良植物总DNA抽提方法。 二、实验原理 通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)
土壤总DNA的几种提取方法
SDS 高盐法(方案1) 具体步骤: 称取1 g 土壤,放入研钵中,倒入适量的液氮,立即研磨;再倒入适量的液氮,研磨,重复3 次,使土壤颗粒研成粉末; 将13.5 ml 提取缓冲液(0.1 mol/L磷酸盐[pH = 8.0 ] ,0.1 mol/L EDTA [pH 8.0 ] ,0.1 mo
真菌菌丝的总RNA的提取方法
1.实验试剂 (1)RNA提取缓冲液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置),25mM EDTA,0.5g/L 亚精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入
真菌菌丝的总RNA的提取的操作方法
试剂:RNA提取缓冲液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置),25mM EDTA, 0.5g/L 亚精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入)。由于
真菌菌丝的总RNA的提取
试剂:RNA提取缓冲液(CTAB):2% CTAB(W/V),2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V),100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置),25mM EDTA, 0.5g/L 亚精胺Spermidine,2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入)。由于在高温灭
真菌DNA和RNA提取方法
真菌DNA和RNA提取方法一、真菌DNA的提取(方法一)实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(p
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:异戊
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:异戊
细菌中制备基因组DNA实验
小量制备 氯化铯法 实验方法原理 提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿
细菌基因组DNA提取方法综述
细菌基因组DNA的提取方法综述,提供了5种方法。 1 快速微量提取法A.取1.5ml菌体培养物于一灭菌Ep管中,12000rpm离心1min, 丢去上清夜,收集菌体。B.加入400ul裂解液(40mMTris-醋酸,20mM醋酸钠,1mMEDTA,1%SDS,pH7.8)混匀,置于37oC水浴1hr
RNA提取与RTPCR(2)
融解RNA一般使用TE。 保存RNA应该尽量低温。为了防止痕量RNase的污染,从富含RNase的样品(如胰脏、肝脏)中分离到的 RNA需要贮存在甲醛中以保存高质量的RNA,对于长期贮存更是如此。从大鼠肝脏中提取的RNA,在水中贮存一个星期就基本降解了,而从大鼠脾脏中提取的 RNA,在水
总RNA提取与Northern杂交(2)
4、Loading buffer(10ul每个样) 总体积 100ul 200 ul 500ul 10×MOPS
方法三:酵母菌基因组DNA的提取
方法三:酵母菌基因组DNA的提取一:仪器:同方法一二:试剂:SE缓冲液(1M山梨醇,0.1MEDTA pH7.5);溶菌酶(50mg/ml);20%PVP;蛋白酶K缓冲液(10mM Tris pH7.6 0.5% SDS 1mM EDTA);其余同前三:操作 1.5ml 对数生长期细菌细胞