扩增曲线定义是什么？
扩增曲线（扩增曲线）：在实时荧光定量PCR反应中，引入了一种荧光化学物质，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增大。......阅读全文
定量PCR的扩增曲线的平台期为什么是锯齿状
1、反应体系随着PCR的进行，造成阻碍物增多，到平台期时达到最高水平，影响机器的正常检出；需要优化反应体系各个离子的含量2、机器本身不稳定造成的影响，不过这种情况很少发生
定量PCR的扩增曲线的平台期为什么是锯齿状
锯齿状无非是下面几个原因1、荧光值不高，比如没有起峰时纵坐标间距较小，一点点的波动就能反应出来，当起峰后，纵坐标比例显示的范围变大，所以会将本地压平。如果你荧光值不高时会出现锯齿状2、pcr仪器温度不稳定，或者没有稳压电源3、pcr反应管没有盖紧，反应液泄露4、pcr反应液有挂壁
荧光定量pcr标准曲线中的扩增效率太高怎么办
1、调整下体系，不要自己配置反应液，最好用商品的MIX，这样各个组分都是最佳的配比。2、三步法改为两步法，退火延伸设置为一步，大部分的温度为60度，这个只是建议，具体看你买的试剂的说明书，会有具体的说明。3、很有可能有非特异性扩增，自己排查下反应体系，根据溶解曲线是否单峰，扩增曲线CT值综合分析。
什么是荧光扩增曲线，一般来说可以分成几个阶段
一般在荧光定量PCR中会用到扩增曲线。描述PCR动态进程的曲线即为扩增曲线，在进行PCR反应过程中，通过检测系统对PCR管内的样品进行实时检测，最后将荧光信号值通过成像技术显现在电脑上。正常的扩增曲线包括四个阶段：基线期，指数增长期，线性增长期，平台期。
荧光PCR反应中,低浓度的扩增曲线会歪是什么原因
你说的标准品的浓度是和你的标本比较那个更低呢？如果标准品和标本在大概相同的CT值时只是标本曲线往下爬的话，我猜测是你的标本模板不干净，有抑制物进去了，因为曲线往下趴明显就是扩增效率的问题，扩增效率不高，有引物设计问题也有酶反应问题，既然你说标准品不会，那就说明引物设计没问题。
荧光PCR反应中,低浓度的扩增曲线会歪是什么原因
你说的标准品的浓度是和你的标本比较那个更低呢？如果标准品和标本在大概相同的CT值时只是标本曲线往下爬的话，我猜测是你的标本模板不干净，有抑制物进去了，因为曲线往下趴明显就是扩增效率的问题，扩增效率不高，有引物设计问题也有酶反应问题，既然你说标准品不会，那就说明引物设计没问题。如果标准品的CT要比标本
实验室冷冻干燥机的冻干曲线定义
冻干机的冻干曲线是冻干箱板层温度与时间之间的曲线关系，一般以温度为纵坐标，时间为横坐标，它反映了在冻干过程中，不同时间板层温度的变化情况。 冻干曲线以板层温度为依据，因为产品受板层温度支配的控制，板层温度也就控制了产品温度，设定冻干曲线需要考虑以下因素： 产品的品种，产品不同则共熔点不同，共
核酸扩增—链置换扩增技术(SDA)
SDA是一种基于酶促反应的DNA体外等温扩增技术，采用标记的两种不同荧光基团的探针。在SDA过程中，该探针被掺入到双链扩增产物中，由限制内切酶的酶切使淬灭基团与荧光基团分开，从而释放荧光，用荧光偏振检测法定量检测。SDA较之PCR有更高的扩增效率，耗时仅30min。其基本系统包括一种限制性核酸内
核酸扩增—环介导的等温扩增法
2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）杂志上公开了一种新的适用于基因诊断的恒温核酸扩增技术，即环介导等温扩增技术，英文名称为“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世卫组织、各国学者和相关政府部门的
恒温核酸扩增技术的扩增速度
由于恒温核酸扩增只需要在一个温度下进行，相比较于PCR不同温度之间的循环，恒温扩增不需要反复的升温降温过程，有些恒温扩增的速度是快于PCR的扩增速度的。例如：环介导恒温核酸扩增（LAMP），重组聚合酶扩增法（RPA）以及切刻内切酶恒温扩增（NEAR）。目前英国公司optigene已经成功的改造了
核酸扩增—转录介导的扩增技术(TMA)
TMA是一种利用RNA聚合酶和逆转录酶在约42℃等温条件下来扩增RNA或DNA的技术，其原理是带有T7 RNA聚合酶识别的启动子序列的启动子引物与模板退火经反转录形成RNA-DNA杂交分子，被反转录酶的RNase H活性水解形成单链RNA，然后与引物2退火，通过反转录合成双链DNA，在T7 RN
realtime－PCR技术的原理及应用
一、实时荧光定量PCR原理（一）定义：在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 。（二）实时原理1、常规PCR技术：对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析无法对起始模板准确定量，无法对扩增反应实时检测。2、实时定量PC
基因扩增PCR的扩增与克隆方法介绍
①引物的序列应位于基因组DNA的高度保守区,且与非扩增区无同源序列。这样可以减少引物与基因组的非特异性结合,提高反应的特异性 ②引物长度:15-40bp为宜。引物过短或过长均可使反应的特异性下降。 ③引物的碱基尽可能随机发布,避免出现数个嘌呤或嘧啶的连续排列,G+C碱基的含量在40%-75%
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料 重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。 实验材料 重悬重组噬斑 贴壁生长良好的
噬斑扩增实验
实验方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材杯状超
PCR扩增过程
①首先是将含有待扩增DNA样品的反应混合物放置在高温（>91℃）环境下加热1分钟，使双链DNA变性，形成单链模板DNA；②降低反应温度（约50℃），致冷1分钟，使寡核苷酸引物与两条单链模板DNA发生退火作用并结合在靶DNA区段两端的互补序列位置上;③将反应混合物的温度上升到72左右保温1-数分钟，在
PCR基因扩增
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃
PCR扩增仪
聚合酶链锁反应，Polymerase chain reaction，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于扩增特定的DNA片段，这种方法可在生物体外进行，不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。PCR这项技术，被广泛地运用在医学和生物学的实验室，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊
PCR扩增过程
①首先是将含有待扩增DNA样品的反应混合物放置在高温（>91℃）环境下加热1分钟,使双链DNA变性,形成单链模板DNA；②降低反应温度（约50℃）,致冷1分钟,使寡核苷酸引物与两条单链模板DNA发生退火作用并结合在靶DNA区段两端的互补序列位置上;③将反应混合物的温度上升到72左右保温1-数分钟,在
pcr扩增效率怎么算
第一种计算： 第二种计算方法：两个都是通过标准曲线法计算扩增效率，其实是一样的，按照定义理解，完全扩增的话1条变2条，2条变4条，扩增效率200％，但一般通过软件计算都是提供第一种方法（用的比较多），扩增效率最大为100％。本质上两者是相同的。
溶解曲线双峰可以用吗
如果不是很明显的话，是可以用的，但是很明显，就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话，是引物二聚体，而如果主峰后面出峰的话，一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰，可以通过改变引物浓度，退火温度和镁离子浓度来解决，但如果次峰强于主峰，就是说杂带的特异性高于目的条带，一般的只能换引物了。扩
基因扩增的含义和扩增方式有哪些
基因芯片(genechip)（又称DNA芯片、生物芯片）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG，与基因芯片上对应位置的
基因扩增的含义和扩增方式有哪些
基因芯片(genechip)（又称DNA芯片、生物芯片）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG，与基因芯片上对应位置的
PCR扩增模板和抗体可变区基因的扩增
PCR 扩增模板和抗体可变区基因的扩增 如果构建Fab抗体库,必需利用RT-PCR获取抗体基因;构建ScFv抗体库,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在构建小鼠ScFv抗体库过程中,主要采用DNA作为扩增模板。 【材料和试剂】（1）PCR仪（2）Taq酶（3）氯仿（4）琼脂糖 【
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
pcr扩增效率怎么算
在网上搜到了两个计算realtime PCR扩增效率的公式，但相互不同，不知哪个才是正确的。请大家明辨！第一种计算： 第二种计算方法：两个都是通过标准曲线法计算扩增效率，其实是一样的，按照定义理解，完全扩增的话1条变2条，2条变4条，扩增效率200％，但一般通过软件计算都是提供第一种方法（用的比较多
pcr扩增效率怎么算
在网上搜到了两个计算realtime PCR扩增效率的公式，但相互不同，不知哪个才是正确的。请大家明辨！第一种计算： 第二种计算方法：两个都是通过标准曲线法计算扩增效率，其实是一样的，按照定义理解，完全扩增的话1条变2条，2条变4条，扩增效率200％，但一般通过软件计算都是提供第一种方法（用的比较多
校准曲线
校准曲线包括标准曲线和工作曲线，前者用标准溶液系列直接测量，没有经过预处理过程，这对于样品往往造成较大误差；而后者所使用的标准溶液经过了与样品相同的消解、净化、测量等全过程。 凡应用校准曲线的分析方法，都是在样品测得信号值后，从校准曲线上查得其含量（或浓度）。因此，绘制准确的校准曲线，直接影响到样品
J型曲线与U型曲线之争
经过多年的争论和临床实践探索，强化降压理念凸显弊端，但高血压患者的最佳血压目标值是多少？不同人群是否都存在J型曲线，最佳目标值是否相同？这些问题仍然是困扰临床医生的难题。2013年5月，新版欧洲高血压指南正式公布：指南虽然出现了J型曲线的相关文字表述，但对于是否存在J型曲线、最佳血压目标值界