PCR扩增模板和抗体可变区基因的扩增
PCR 扩增模板和抗体可变区基因的扩增 如果构建Fab抗体库,必需利用RT-PCR获取抗体基因;构建ScFv抗体库,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在构建小鼠ScFv抗体库过程中,主要采用DNA作为扩增模板。 【材料和试剂】（1）PCR仪（2）Taq酶（3）氯仿（4）琼脂糖 【操作步骤】 （1）在200μl离心管中混匀下列成分： 模板DNA 5μg 10×PCR缓冲液 10μl(含25mmol/L MgCl2) 5’引物 ......阅读全文
PCR扩增模板和抗体可变区基因的扩增
PCR 扩增模板和抗体可变区基因的扩增 如果构建Fab抗体库,必需利用RT-PCR获取抗体基因;构建ScFv抗体库,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在构建小鼠ScFv抗体库过程中,主要采用DNA作为扩增模板。 【材料和试剂】（1）PCR仪（2）Taq酶（3）氯仿（4）琼脂糖 【
高GC比模板的PCR扩增
PCR条件的优化是一个麻烦耗时的过程，涉及到温度、时间、镁离子、引物、dNTP、Taq酶、模板等多个因素的调整。一般来说利用热启动，比如Platinum Taq DNA聚合酶（Invitrogen）可以达到更高的特异性，降低对镁离子浓度的依赖，并且有利于提高“问题模板”的产量。然而，传统的PCR条件
高GC比模板的PCR扩增
PCR条件的优化是一个麻烦耗时的过程，涉及到温度、时间、镁离子、引物、dNTP、Taq酶、模板等多个因素的调整。一般来说利用热启动，比如Platinum Taq DNA聚合酶（Invitrogen）可以达到更高的特异性，降低对镁离子浓度的依赖，并且有利于提高“问题模板”的产量。然而，传统的PCR条件
高GC比模板的PCR扩增
PCR条件的优化是一个麻烦耗时的过程，涉及到温度、时间、镁离子、引物、dNTP、Taq酶、模板等多个因素的调整。一般来说利用热启动，比如Platinum Taq DNA聚合酶（Invitrogen）可以达到更高的特异性，降低对镁离子浓度的依赖，并且有利于提高“问题模板”的产量。然而，传统的PCR条件
PCR基因扩增
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃
模板－DNA－的准备、实验的组织和－PCR－扩增实验
可以用各种方法分离基因组 DNA, 主要决定于初始材料的种类（血液还是组织）和数量。所有制备的 DNA 都应该储存于 pH8.0 的 TE 缓冲液中并装在灭菌的 Eppendorf 管内。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒PCR 缓冲液ddH20基因组 DNA
模板－DNA－的准备、实验的组织和－PCR－扩增实验
试剂、试剂盒 PCR 缓冲液ddH20基因组 DNAdNTP寡核苷酸引物仪器、耗材 离心机和转子丙烯酸防护板过滤阻挡吸头多道移液器PCR 仪托盘 固定器装置底座管盖小管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂含 15 mmol/LMgCl2 的 10XPCR 缓冲液 (GeneAmpPCR 缓冲液
模板－DNA－的准备、实验的组织和－PCR－扩增实验
试剂、试剂盒 PCR 缓冲液 ddH20 基因组 DNA dNTP 寡核苷酸引物 仪器、耗材
PCR基因扩增1
一、实验原理 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一种体外核酸扩增系统，其原理类似DNA分子的天然复制过程，是将在待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两个寡聚核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增 2n 倍。该技术已成为分子生物学中
PCR基因扩增2
（4）引物的熔点温度（Tm值）要适当。Tm值与引物的碱基组成和长度有关；PCR引物的GC/AT应与要扩增的模板DNA相当或略高些。一般熔点温度以大于55℃为宜。（5）引物的3，末端必须与模板严格互补，而5，末端的要求可灵活些。（6）目前在引物选择中已广泛应用计算机软件，从EMBL或Genebank中
PCR基因扩增原理
基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每1
PCR基因扩增实验
[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。[实验原理]多聚酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍。1．变性：加
基因扩增PCR的扩增与克隆方法介绍
①引物的序列应位于基因组DNA的高度保守区,且与非扩增区无同源序列。这样可以减少引物与基因组的非特异性结合,提高反应的特异性 ②引物长度:15-40bp为宜。引物过短或过长均可使反应的特异性下降。 ③引物的碱基尽可能随机发布,避免出现数个嘌呤或嘧啶的连续排列,G+C碱基的含量在40%-75%
目的基因的PCR扩增
实验概要进行目的基因的PCR扩增实验原理PCR（聚合酶链式反应）是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法。它包括3个基本步骤：⑴变性：目的双链DNA片段在94℃下解链；⑵退火：两种寡核苷酸引物在适当温度（50℃左右）下与模板上的目的序列通过氢键配对；⑶延伸：在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适
PCR基因扩增原理、材料和方法
一、原理多聚酶链式反应（polymerase chain reaction , PCR）类似于DNA 的天然复制过程：经过变性、退火、延伸多次循环（图1 ) , DNA 扩增倍数可达2 n 倍。即Y = ( 1 + X ) n式中，Y 为DNA 扩增倍数；X 为扩增效率；n 为循环次数二、材料（1）
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
PCR基因扩增仪的原理和程序
PCR技术即基因扩增技术。 PCR基因扩增仪扩增DNA的原理是：先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链，然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物，即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片
浅谈PCR基因扩增仪
聚合酶链式反应，简称PCR。聚合酶链式反应，其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。生命科学仪器
PCR基因扩增仪简介
聚合酶链式反应简称PCR（英文全称：Polymerase Chain Reaction）聚合酶链式反应 聚合酶链式反应，简称PCR。聚合酶链式反应，其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应
基因扩增梯度PCR仪
聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction ,简称PCR）是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观
PCR扩增制备目的基因
1．目的学会PCR操作的基本技术。2．原理是将待扩增的DNA模板加热变性，与其两侧互补的寡聚核苷酸引物复性，然后经过耐热的DNA聚合酶延伸。再进入下一轮变性—复性—延伸的循环，n次循环后DNA可被扩增（1+X）n倍。其中
PCR基因扩增仪简介
分类： PCR仪的种类总体来说可以分为两大类：PCR扩增仪和实时荧光定量PCR仪。用途： PCR仪是医学，农业，食品，医药，检验检疫等领域的实验室常规仪器设备。PCR仪原理： 为双链dna在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在dna聚合酶的作用下，以单链为模版，根据碱基互补配对
基因扩增PCR的扩增方法的注意事项
1、使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加,避免因组分不一导致结果差异; 2、配置和分装反应液时请一定使用新的(无污染的)喷头以避免污染; 3、如扩增条带多,可适当添加酶和dNTPs; 4、当多重PCR扩增产物的长度均在1kb以内时,使用3%～4%浓度的Agarosegel进行电泳分离效果。
PCR基因扩增仪的用途
西安天隆科技有限公司DTC-3G型PCR基因扩增仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction , PCR）为特征的、以检测D
PCR基因扩增仪用途和特点介绍
聚合酶链式反应，简称PCR。聚合酶链式反应是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。PCR基因扩增仪的用途：用于科研及临床的基因扩增定性PCR基因扩增荧光/酶免终点定
利用血清筛选噬菌体文库PCR扩增的模板
[器材和试剂] ●MicroAmp反应管（PerkinElmer） ●洗脱缓冲液（20mmol/LTris—ClpH8．5，2mmol/LEDTA，1％TritonX—100） ●GeneAmp9600PCR仪（PerkinElmer） ●正向引物：5’
基因扩增PCR的扩增出现片状拖带或涂抹带的原因和对策
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。其对策有:减少酶量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓 度。增加模板量,减少循环次数。
基因扩增PCR的扩增出现片状拖带或涂抹带的原因和对策
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。其对策有:减少酶量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓 度。增加模板量,减少循环次数。
PCR实验功能区扩增区的功能及常用仪器
PCR3区功能：cDNA合成、DNA扩增及检测。常用仪器设备：低温冰箱，移液器，荧光定量PCR仪，紫外灯及安全防护装备。
基因扩增仪PCR产品特点
优化的温控模式，升降温速度快，温控精确，热效率高，仪器寿命更长。一机多用：兼容0.2ml，0.5ml管，96标准微孔板。无油热盖调节方便，彻底防止蒸发。仪器操作简便，人机界面友好。体积小，重量轻，节省实验室空间。