正常小鼠原代骨骼肌细胞培养

PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:鼠抗人及大鼠desmin一抗,肌球蛋白(myosin)单克隆抗体 二、实验器械1、培养皿2、培养瓶3、直剪和眼科剪4、眼科镊和止血钳5、烧杯6、15ml离心管 三、实验流程取肌肉于平皿,Hank’s洗3次↓剔除脂肪、结缔组织↓肌肉标本剪约0.1cm3小块↓移至离心管,Hank’s洗3次↓静置1min,弃去上层液及漂浮组织↓......阅读全文

肿瘤组织源性的原代细胞培养

一、肿瘤细胞培养的概述        肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用肿瘤原代细胞培养基础培养基、5~10%血清浓度、细胞培养添加剂、抗生素等等即可。或在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1~2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、

原代细胞培养之分离注意事项

  1、组织块培养法  1)组织块接种后的前3天,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动,否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。  2)加入的培养液不宜过多,避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。  3)当细胞向外迁徙出来后要注意记录并去除漂浮的组织块和残留的

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

 原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。  在体外培养原代细胞时,为了保

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

            实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。 实验材料

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

细胞培养技术             实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百

正常成熟破骨细胞原代培养

实验材料:1. 细胞来源:新生大鼠或兔,妊娠6个月以内的引产胎儿等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 细胞支持物:薄骨片、盖玻片;4. 培养液:199培养基、MEM或DMEM培养基均可,须补加15%—20%小牛血清、25

正常成熟破骨细胞原代培养

实验材料:1. 细胞来源:新生大鼠或兔,妊娠6个月以内的引产胎儿等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 细胞支持物:薄骨片、盖玻片;4. 培养液:199培养基、MEM或DMEM培养基均可,须补加15%—20%小牛血清

正常视网膜米勒细胞原代培养

实验材料:1. 材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶-100IU/ml透明质酸酶混合消化液;4. 消毒无菌的手术器械若干;实验方法:1. 取材(1)取自人的供体眼球

常用原代动物细胞培养:肝星状细胞培养材料和方法

材料 相差显微镜,荧光显微镜,手术器械,雄性SD大鼠,体重250-450 g,戊巴比妥钠,200目尼龙网,小牛血清(或胎牛血清,则更好),DMEM,胰酶消化液(以HBSS配),Nycodenz(以GBSS配),D- Hanks'(KCl 0.4 g/L,KH2PO4 0.06 g

原代细胞和传代细胞培养有哪些区别

区别一:定义不同原代细胞培养:原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养,也叫初代培养。传代细胞培养:传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。区别二:特点不同原代细胞培养:与体内原组织

原代细胞培养中的6个常见错误

当培养原代细胞时,重要的是要记住,他们不是细胞系,不能同等对待。因为ScienCell在原代细胞培养方面的广泛工作,我们非常熟悉研究人员在培养原代细胞时遇到的常见问题。这里有六个在原代细胞培养中的常见错误,以及如何纠正这些错误。错误1:一小管原代细胞在水浴中解冻一段时间纠正#1:原代细胞对解冻过程非

原代细胞培养的技巧,看完这篇都懂了!

原代细胞培养的应用1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段;2、为传代培养创造条件;3、服务于临床实践,用于药物筛选等。原代细胞培养之分离注意事项1、组织块培养法1)组织块接种后的前3天,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动,否则组织块不易附着于瓶壁上或附着

原代神经细胞培养方法-Neuron-Cell-Culture

1. Preparation of coverslips1.1- Mass cultureOur standard mass cultures are plated on astrocytes.  Those, in turn, are plated on glass coverslips pre-

原代细胞和传代细胞培养有哪些区别

  区别一:定义不同  原代细胞培养:原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养,也叫初代培养。  传代细胞培养:传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。  区别二:特点不同  原代细

原代细胞和传代细胞培养有哪些区别

区别一:定义不同原代细胞培养:原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养,也叫初代培养。传代细胞培养:传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。区别二:特点不同原代细胞培养:与体内原组织

原代细胞和传代细胞培养有哪些区别

区别一:定义不同原代细胞培养:原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养,也叫初代培养。传代细胞培养:传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。区别二:特点不同原代细胞培养:与体内原组织

人类滑膜原代细胞培养步骤和体会

1、将切下的组织在手术台上请护士将标本放入低温生理盐水中(可不要动它),在手术完成时将标本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中带回实验室;2、在超净台中将标本放入培养皿中,加入α-MEM洗涤;3、获得组织切开,仔细辨认于关节反折处及增生的白色光滑的滑膜组织,附于关节软骨面的增生的血管翳也为滑膜组织(

细胞培养原代培养的注意事项

一、注意污染1、严格进行动物皮肤消毒,使用三套器械取材。新生动物皮肤先用2%碘酒液消毒,成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。2、严格进行无菌操作,防止细菌、霉菌、支原体污染,避免化学物质污染。自取材开始,保持所有组织细胞处于无菌条件。细胞计数可在有菌环境中进行。3、吸取液体前,瓶口和吸

原代细胞和传代细胞培养有哪些区别

原代细胞和传代细胞培养有含义、培养过程、培养结果和应用四个方面区别:1、含义不同原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,也称初代培养。原代培养是将培养物放置在体外生长环境中持续培养,中途不分割培养物的培养过程。有几方面含义:原代培养中的代并非细胞的代数,因为培养过程中细胞经多次分裂已经

小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养

实验概要小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养主要试剂75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、细胞基础培养液 主要设备35 mm培养皿、60 mm培养皿、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、冻存管、眼科剪、眼科弯镊、离心机实验材料怀孕13.5天【将成年雌、雄小鼠放在同笼中饲养

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养

实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 孕鼠试剂、试剂盒 PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM仪器、耗材 眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离

小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析

实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离

小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析

实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

小鼠胚胎干细胞培养实验

实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃,5%CO2,100%湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化,也可以采用低浓度的RA进

正常骨内成骨细胞原代培养

实验材料:1. 骨组织来源:新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg/mlⅡ型胶原酶溶液;4. 培养液:RPMI 1640培养基,配制培养液

正常人原代角膜间质细胞的分离

正常人原代角膜间质细胞的分离 实验材料: 1.完整的人角膜; 2.GMF-Saline G; 3.中性蛋白酶Ⅱ;PriCellls原代细胞分离试剂盒 4.L型胶原酶,1mg/ml在DMEM/F12/GA中; 5.GMF-Saline G配制的TrypLE Expre或0.