核酸免疫实验
基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理（附 录 2C) 和 接 种 的（附 录 2E) 指导说明。在正式实验之前需先进行肌肉和皮下注射练习； D N A 的精准注射对于免疫成功起关键作用。可以 用 India ink (或相同的染料）来定位注射的部位是否正确。材料2 mg纯化的表达质粒DNA (见实验策略和CPI 单 元 10. 3)无 菌 0.9% (m/V) 氯化钠100 mg/m l盐酸氯胺酮20 mg/ml 盐 酸 甲 苯 噻 曉（xylazine.HCl)合适品系的小鼠0.5 ml或 Im l的 2 7 号 或 3 0 号针头的注射器解剖刀，仅用于肌肉内接种（可选）外科手术用钉或缝合线，仅用于肌肉内接种小鼠固定板，仅 用 于皮下接种（可选）1.在 I.5m l的微量离心管中用乙醇沉淀2 mg纯化的表达质粒DNA (单 元 10. 1 中基本方案部分，步 骤 4〜8)。用 Iml无 ......阅读全文
核酸透射电镜样品制备实验——核酸样品
实验方法原理很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜，在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层，由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸分子与该蛋白质单分子膜作用时会由于蛋白质的氨基酸碱性侧链基团的作用，使得核酸从三维空间结构的溶液构型吸附于肽链网而转化为二维空间的构型，并从形态到结构均能
免疫核糖核酸的适应症
临床适应证与转移因子相似。目前主要用于恶性肿瘤如肾癌、肺癌、消化道癌及神经母细胞瘤和骨肉瘤等的辅助治疗。也试用于慢性乙型肝炎和流行性乙脑，可使细胞免疫功能低下的部分患者恢复正常。
免疫核糖核酸的不良反应
本品能引起头晕、恶心、胸闷、心悸以及荨麻疹、体温升高等全身反应。注射部位可能产生局部红肿疼痛，其范围直径l～10cm，反应持续1～3天。
关于免疫核糖核酸的基本介绍
免疫核糖核酸存在于淋巴细胞中，其分子量较转移因子为大，可以用人肿瘤组织免疫的羊或其他动物的脾脏、淋巴结提取（也可从正常人周围血白细胞和脾血白细胞中提取）。它使未致敏的淋巴细胞转变为免疫活性细胞。后者与肿瘤细胞直接接触或通过细胞介导的免疫，损伤肿瘤细胞胞膜，致使肿瘤细胞死亡。免疫核糖核酸在体内亦可
简述免疫核糖核酸的临床应用
1.肿瘤治疗用法尚不统一，一般多采用皮下注射或静脉滴注，剂量仍在探索中。 （1）皮下注射多注射于淋巴引流区的皮下，如腋下或腹股沟，可每周注射3～5次，连续2～3个月。 （2）静脉滴注溶于5%葡萄糖液中静脉滴注。 2.治慢性肝炎治疗每周注射1次，每次1支（正常人周围血白细胞免疫核糖核酸，每支
关于免疫核糖核酸的应用介绍
1、适应证 临床适应证与转移因子相似。目前主要用于恶性肿瘤如肾癌、肺癌、消化道癌及神经母细胞瘤和骨肉瘤等的辅助治疗。也试用于慢性乙型肝炎和流行性乙脑，可使细胞免疫功能低下的部分患者恢复正常。 2、不良反应 本品能引起头晕、恶心、胸闷、心悸以及荨麻疹、体温升高等全身反应。注射部位可能产生局部
关于核酸疫苗的免疫佐剂介绍
免疫佐剂指与抗原同时或预先应用，能增强机体针对抗原的免疫应答能力，或改变免疫应答类型的物质，包括无机佐剂（如氢氧化铝）、有机佐剂（如脂多糖、分支杆菌）及合成佐剂穴如双链多聚肌苷酸,胞苷酸眼。近年来随着细胞因子研究的进展，发现许多细胞因子也具有明显的免疫佐剂效应，能增强特异抗原的免疫原性或增强机体
人类免疫缺陷病毒的核酸检测介绍
艾滋病病毒核酸检测一般指检测病毒RNA。病毒入侵体内后快速复制，可在血浆中检测出病毒RNA，即病毒载量。通过测定病毒载量可以进行病程监控、治疗方案指导、疗效判定、疾病进展预测。病毒载量检测也可用于艾滋病病毒感染的辅助诊断，用于急性期/窗口期诊断、晚期患者诊断、艾滋病病毒感染诊断和小于18月龄婴幼
免疫学实验抗双链脱氧核糖核酸抗体（dsDNA）介绍
抗双链脱氧核糖核酸抗体（dsDNA）介绍： 抗dsDNA抗体对SLE有很高的特异性诊断意义，这些抗dsDNA抗体沉积在各脏器的微血管基底膜与器官原位抗原型DNA发生反应，形成免疫复合物，激活炎症系统，导致组织损伤，如狼疮肾炎，自身免疫性肝炎等。动物模型证实了大分子DNA参与了SLE的致病过
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中，最常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中，zui常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可
核酸分离纯化实验技术指南
核酸分离纯化实验技术指南： 总RNA提取常见问题分析 RNA降解 1. 新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如 果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。 2. 新鲜组织：某些富含
琼脂糖核酸电泳实验
琼脂糖核酸电泳实验1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架 好梳子；2.根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确 称量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般20~30 ml）；3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻，加
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中，zui常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将
DNA核酸浓度的测定实验
DNA核酸浓度的定量实验可以用于（1）对纯化的PCR产物进行浓度测定；（2）对纯化的酶切产物进行浓度测定；（3）对提取的质粒进行浓度测定。实验方法原理寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA可以定量溶于缓冲液，构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键，使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱，最大吸收
菌种保藏实验_核酸的保存
实验步骤1. 以溶液形式置低温保存DNA 溶于无菌 TE 缓冲液（10 mmol/L Tris • HCl，1 mmol/L EDTA，pH 8.0）中，其中 EDTA 的作用是整合溶液中二价金属离子，从而抑制 DNA 酶的活性（Mg2+ 是 DNA 酶的激活剂）。 TE 的 pH 为 8.0 是为
DNA核酸浓度的测定实验
实验方法原理 构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键，使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱，最大吸收峰为260nm。窄光带紫外分光光度计，长260nm．，比色杯光径1cm，1个吸光度值（1A）相当于50ug/ml双螺DNA，40ug/m1单螺旋DNA或RNA），20ug/ml寡核苷酸实验材料
免疫核糖核酸的信息和功能介绍
免疫核糖核酸存在于淋巴细胞中，其分子量较转移因子为大，可以用人肿瘤组织免疫的羊或其他动物的脾脏、淋巴结提取（也可从正常人周围血白细胞和脾血白细胞中提取）。它使未致敏的淋巴细胞转变为免疫活性细胞。后者与肿瘤细胞直接接触或通过细胞介导的免疫，损伤肿瘤细胞胞膜，致使肿瘤细胞死亡。免疫核糖核酸在体内亦可产生
免疫核糖核酸的主要适应症
临床适应证与转移因子相似。目前主要用于恶性肿瘤如肾癌、肺癌、消化道癌及神经母细胞瘤和骨肉瘤等的辅助治疗。也试用于慢性乙型肝炎和流行性乙脑，可使细胞免疫功能低下的部分患者恢复正常。
免疫核糖核酸的使用注意事项
给药后十分钟内如出现荨麻疹、体温升高者应停止使用。注射部位红肿直径在10cm以上者应停止使用。
影响核酸疫苗免疫效果的因素有哪些？
质粒载体和启动子的选择真核表达质粒是核酸疫苗的主体，表达载体表达抗原蛋白的能力越强，诱发宿主产生的免疫应答能力越强。不同类型的启动子/增强子、内含子序列、翻译起始序列、转录终止序列、mRNA的稳定性等调控元件可直接影响基因表达效率，其中启动子是影响核酸疫苗表达的最重要因素。RSV启动子/增强子的表达
免疫纯化实验
实验方法原理 制备免疫亲和柱要求抗体首先共价结合到介质上。另一方法是将抗体结合到蛋白 A 或 G 小珠上，再用交联剂固相化。后一方法由于蛋白 A 或 G 结合在杭体的 Fe 区， 所以结合抗原的部位获得充分暴露，从易于接近。免疫亲和柱
免疫纯化实验
实验方法原理 制备免疫亲和柱要求抗体首先共价结合到介质上。另一方法是将抗体结合到蛋白 A 或 G 小珠上，再用交联剂固相化。后一方法由于蛋白 A 或 G 结合在杭体的 Fe 区， 所以结合抗原的部位获得充分暴露，从易于接近。免疫亲和柱制备完成后，抗原溶液即可以上样，接着洗去污染物，然后洗脱抗
免疫PCR实验
实验方法原理 免疫PCR主要由两个部分组成，第一部分的免疫反应类似于普通的酶联免疫吸附试验（ELISA）的测定过程；第二部分即通常的PCR检测，抗原分子的量最终由PCR产物的多少来反映。第一步中，首先用待测抗原（如牛血清白蛋白（ESA））包被微滴板孔，再加入相应的特异抗体，于是抗体就与固相上的抗原结
免疫纯化实验
在蛋白质纯化方法中抗体亲和纯化是非常有效的方法之一。仅此一步常可获得 1000～10 000 倍的纯化。如果抗体与目的蛋白的结合的特异性得到证明，并且洗脱的目的蛋白没有受到不可逆的损伤，那么可以认为免疫纯化是极好的蛋白质纯化方法，特别是用在纯化过程的最后步骤。实验方法原理制备免疫亲和柱要求抗体首先共
动物免疫实验
实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应，通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面，加入抗血清，抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物，洗去未结合抗体，然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗（抗体的抗体），二抗与抗体结合，洗去未结合二抗，加底物显色剂显色，在一定波长下测定
动物免疫实验
实验概要将某种蛋白注射新西兰大耳兔产生免疫反应，通过ELISA检测免疫产生的抗体。实验原理将抗原吸附在固相载体表面，加入抗血清，抗体和抗原在载体表面形成抗原-抗体复合物，洗去未结合抗体，然后加入辣根过氧化物酶标记的二抗（抗体的抗体），二抗与抗体结合，洗去未结合二抗，加底物显色剂显色，在一定波长下测定
小鼠免疫实验
实验方法原理 实验材料 任意品系小鼠（6～8 周）试剂、试剂盒 PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材 22－G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤 1. 准备等体积 PBS 含 25～100 μg 抗原和弗氏完全佐剂的乳化液（200～40
免疫学实验免疫学实验细胞免疫检查介绍介绍
隐球菌病胶乳凝集试验介绍： 胶乳凝集试验检测新生隐球菌荚膜多糖抗原，是一种简便、快速、有效诊断隐球菌感染的实验室方法。它以胶乳颗粒为载体，表面连接有抗新生隐球菌抗体，形成致敏胶乳悬液， 如标本(血清、胸腔积液、支气管肺泡灌洗液或脑脊液)中含有一定量的隐球菌荚膜多糖抗原，则可产生肉眼可见的凝
免疫电泳实验_免疫电泳
实验材料待检抗原试剂、试剂盒抗体琼脂巴比妥缓冲液仪器、耗材电泳仪载物玻片打孔器玻璃铸型微量进样器实验步骤1. 取载物玻片（7.5ⅹ2.5厘米）加上3.5毫升1.5%琼脂凝胶，制成2毫米厚的琼脂板。2. 按图位置，在琼脂板未凝固时，放入抗血清槽铸型，注意勿使铸型全部浸入琼脂中，待凝固时再打孔。3.