电镜酶细胞化学实验
实验方法原理 电镜酶细胞化学反应分两步：①细胞内酶在一定条件下与底物进行初级酶反应（形成初级产物）；②应用捕捉剂与初级产物反应形成电子致密物质。电镜酶细胞化学捕捉方法很多，最常用于水解酶类的为金属盐沉淀法和应用于氧化还原酶类的为嗜锇物质形成法。金属盐沉淀法原理是酶反应初级产物与重金属结合形成不溶解的电子致密物，常用铅、铈等。嗜锇物质形成法原理是氧化酶类和二氨基联苯胺（DAB）反应形成嗜锇中间产物，然后与锇形成高电子密度的锇黑沉淀。实验步骤 1. 取材组织取材 10 mm × 5 mm × 5 mm 左右大小，固定后用振荡切片机切成 40～100 μm 厚片，也可用剃须刀片手工切厚片。取白细胞和骨髄时采用细胞分离液分离外周血。取培养细胞时用橡皮刮。游离细胞经离心（800 r/min）5 min，凝块后用剃须刀片切成厚片，漂洗备用。2. 固定固定方式与免疫电镜基本相同，分为血管灌注固定（10～15 min）、浸泡固定（1......阅读全文
免疫细胞化学技术观察细胞成分实验
实验方法原理免疫细胞化学是在细胞化学技术的基础上，吸收免疫学的理论和技术发展起来的一项技术，其基本原理是用荧光素或酶等标记物或显色物标记特异性抗体，通过免疫学中的抗原抗体反应与细胞内的相应抗原结合，形成带有荧光素或显色物的抗原抗体复合物，因此可用荧光显微镜或普通光学显微镜观察到复合物的存在，达到检测
细胞色素氧化酶实验
一、试剂 1%盐酸二甲基对苯二胺溶液. 1%α-萘酚-乙醇溶液. 二、试验方法 取37℃（或低于37℃）培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2~3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上. 三、结果
细胞色素氧化酶实验
一、试剂1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液. 二、试验方法取37℃（或低于37℃）培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2~3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.三、结果于2min内呈现蓝色者为阳性.阳性
细胞形态的观察实验——微丝的电镜照片观察
实验材料微丝仪器、耗材光学显微镜镊子平皿载片实验步骤1. 恒河猴脊髓内神经纤维中微丝电镜照片，可见微丝是实心结构，直径5~8cm。2. 它均匀地分散于细胞基质中，或排列成束和网状。
细胞化学词汇DNA酶Ⅰ超敏感性
中文名称：DNA酶Ⅰ超敏感性英文名称：DNase Ⅰ hypersensitivity定 义：DNA极易被DNA酶Ⅰ切割的特性，是染色质活化部位的特征。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
酶的细胞化学反应的反应过程
酶细胞化学反应实际上就是孵育反应的过程，孵育液的成分主要有酶的底物、捕捉剂，保证孵育液pH的缓冲液以及有关的添加剂等。孵育的温度和时间可根据不同的酶和组织通过实验而确定。电镜酶细胞化学的样品在孵育反应后需经锇酸后固定、梯度乙醇脱水、环氧树脂包埋和超薄切片，至电镜下观察。
细胞色素氧化酶的化学特性
细胞色素氧化酶催化的整体反应是： 4 Fe-细胞色素c + 8 H进 + O2 → 4 Fe-细胞色素c + 2 H2O + 4 H出 整个催化过程 如下：首先两个电子从两个细胞色素c分子通过CuA和细胞色素a传递到细胞色素a3-CuB双核中心，将中心的金属还原为Fe和Cu。连接两个金属离子的氢
酶免疫细胞化学染色操作指南1
一、材料和试剂1、玻片：须用免疫组化专用玻片，或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液，用PBS配。3、3%牛血清白蛋白（BSA），用PBS配。4、0.01M pH7.4 PBS5、1% BSA-PBS（含0.05% Tween20）6、AEC底物（1）底物缓冲液（20X）
细胞化学词汇DNA酶Ⅰ超敏感部位
中文名称：DNA酶Ⅰ超敏感部位英文名称：DNase I hypersensitive site定 义：特指由于特定蛋白质的结合或转录而使30nm染色质纤丝结构解体的染色质的活化部位。该部位的DNA序列极易被DNA酶Ⅰ所切割。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
酶免疫细胞化学染色操作指南2
2、加3% H2O2，细胞片20ul/孔，培养板100ul/孔，使充分覆盖住细胞。3、室温10分钟后，甩掉 H2O2，用PBS轻轻淋洗2分钟。用滤纸吸干细胞周围水份，96孔在滤水纸上扣干，但注意保持细胞湿润。三、封闭细胞片用5-10%正常山羊血清（20ml/孔），细胞板用2-5%BSA（PBS配制）
免疫细胞电镜技术
免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献，但由于光学分辨率的限制，不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此，Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法，为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上，相继发展了杂交抗
细胞组分的化学反应实验
实验方法原理 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后，其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应，一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力，且这两种染料的作用有选择性，甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色，呱咯宁染低聚分子的RNA呈红色。由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量
细胞组分的化学反应实验
Brachet反应细胞内碱性蛋白和酸性蛋白的显示细胞内过氧化物酶的显示过碘酸雪夫反应(PAS)实验方法原理细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后，其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应，一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力，且这两种染料的作用有选择性，甲基绿染高聚分子的DNA
非标记抗体免疫酶组织化学实验——酶桥法
由于在酶标记抗体过程中，酶与抗体的结合可损害部分抗体和酶的活性，从而降低了抗体的效价。另外，血清中的非特异性抗体也可以被酶标记，这些非特异酶标记抗体与组织中相应抗原结合，放大了非特异背景染色。为了避免酶标记抗体法的上述缺点，Sternberger（1969）在酶标抗体法的基础上，创建了非标记抗体免疫
非标记抗体免疫酶组织化学实验
实验方法原理 首先用酶免疫动物制备成效价高、特异性强的抗酶抗体。在特异性抗体与抗酶抗体之间利用第二抗体作「桥梁」，将它们连接起来，再将酶结合在抗酶抗体上，经显色显示抗原的定位。其基本流程为：抗原+特异性抗体 → 第二抗体（桥抗）→ 抗 HRP 抗体 → HRP → DAB+H2O2（显色）。因为桥抗
细胞膜糖类电镜显示实验——钌红染色法
细胞膜糖类 电镜 显示技术 免疫组织化学实验技术及应用 第十四章细胞膜糖类电镜显示实验可以用于：观察细胞膜上的糖蛋白和糖脂。其显示技术较常用的是凝集素细胞化学技术，此外，还有钌红染色法等。实验方法原理钌红染色法的原理是钌红可以与羧基（酸性基）通过静电结合，电镜下呈电子密度高染色。实验材料组织样品试剂
酶的细胞化学反应的样品制备过程
酶细胞化学的一个重要问题是既要保存好细胞内酶的活性，又要保存好细胞的结构，因此选择适当的固定剂种类、浓度、固定的方式和时间是细胞化学技术的一个关键问题。光镜样品固定多选用中性福尔马林或多聚甲醛,4℃、24小时，常规的石蜡包埋切片可以满足相当一部分酶的细胞化学要求；电镜样品固定通常用0.5～2%戊二醛
血液的化学检验项目红细胞烯醇化酶
红细胞烯醇化酶介绍： 红细胞烯醇化酶(EC)是细胞溶酶体中的一种裂合酶，烯醇化酶(enolase)总活性升高往往与神经元特异性烯醇化酶活性升高相一致，多见于小细胞肺癌，神经母细胞瘤等患者。红细胞烯醇化酶正常值： 习惯单位： 5.39±0.83U/g Hb 156±24U/1012 RBC
细胞裂解方法：化学裂解、酶裂解和机械裂解
裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解。化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法，通常会很少使DNA 断裂。这两种方法（包括SDS 和溶菌酶处理等）提取纯化DNA中常用的方法。机械裂解可以更均一的裂解细胞，同化学裂解相比，机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性。机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞，
临床化学检查方法介绍红细胞烯醇化酶
红细胞烯醇化酶介绍： 红细胞烯醇化酶(EC)是细胞溶酶体中的一种裂合酶，烯醇化酶(enolase)总活性升高往往与神经元特异性烯醇化酶活性升高相一致，多见于小细胞肺癌，神经母细胞瘤等患者。红细胞烯醇化酶正常值： 习惯单位： 5.39±0.83U/g Hb 156±24U/1012 RBC
免疫电镜相关技术实验
实验方法原理 该方法是用电镜直接观察病毒抗原与相应抗体结合后形成的大分子复合物。实验材料 病毒试剂、试剂盒 抗体仪器、耗材 电子显微镜实验步骤 直接将病毒抗原与对应抗体孵育后上电子显微镜观察即可。具有简单易行，抗原和抗体用量少在该时间内即可得到结果等优点，可用于检出病毒或进行病毒分型，并已用于临床诊
线粒体电镜照片观察实验
实验方法原理 线粒体同内质网一样，除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外，其他所有细期线粒体(mitochodri)。一个细胞中线粒体的数目、形状和大小常因细胞和生理状况等不同而有较大的差别，如某种海藻中只有一个线粒体，玉米根品中有100~300
免疫电镜标本固定实验
实验步骤1. 血管灌注固定固定效果最好，能使超微结构得到很好的保存。灌注装置由加压气球、压力表、三通接头和连接管道组成。不同的组织器官必须选择合适的灌注压力，详见有关书籍。灌注固定一般维持 10～15 min。然后用相同的固定液继续浸泡固定 2～4 h。2. 浸泡固定组织块切小后立即投入到固定液中，
免疫电镜标本固定实验
实验方法原理 实验步骤 1. 血管灌注固定固定效果最好，能使超微结构得到很好的保存。灌注装置由加压气球、压力表、三通接头和连接管道组成。不同的组织器官必须选择合适的灌注压力，详见有关书籍。灌注固定一般维持 10～15 min。然后用相同的固定液继续浸泡固定 2～4 h。2. 浸泡固定组织块切小后立即
扫描电镜分析实验
一 、实验目的1.了解扫描电子显微镜的原理、结构;2.运用扫描电子显微镜进行样品微观形貌观察。二、实验原理扫描电镜(SEM)是用聚焦电子束在试样表面逐点扫描成像。试样为块状或粉末颗粒，成像信号可以是二次电子、背散射电子或吸收电子。其中二次电子是主要的成像信号。由电子枪发射的电子，以其交叉斑作为电子源
线粒体电镜照片观察实验
实验方法原理线粒体同内质网一样，除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外，其他所有细期线粒体(mitochodri)。一个细胞中线粒体的数目、形状和大小常因细胞和生理状况等不同而有较大的差别，如某种海藻中只有一个线粒体，玉米根品中有100~3000 个，而海胆卵母细胞中线粒体多达30 万个;在光学显微镇粒
线粒体电镜照片观察实验
实验方法原理 线粒体同内质网一样，除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外，其他所有细期线粒体(mitochodri)。一个细胞中线粒体的数目、形状和大小常因细胞和生理状况等不同而有较大的差别，如某种海藻中只有一个线粒体，玉米根品中有100~300
线粒体电镜照片观察实验
电子显微镜常用的有透射电镜（transmissionelectronmicroscope，TEM）和扫描电子显微镜。与光镜相比电镜用电子束代替了可见光，用电磁透镜代替了光学透镜并使用荧光屏将肉眼不可见电子束成像。实验方法原理线粒体同内质网一样，除原核细胞和哺乳动物成熟的红细胞外，其他所有细期线粒体(
线粒体电镜照片观察实验
实验材料 兔子试剂、试剂盒 詹纳斯绿B染液Ringer氏液仪器、耗材 显微镜载玻片盖玻片实验步骤 一、线粒体的光镜切片观察1. 用詹纳斯绿B染色的兔肝细胞光镜切片，肝细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。二、线粒体的电镜照片观察1. 不同细胞中线粒体的形态和数目不同。线粒体的外形多样，如圆形、椭圆形、哑
自由基显示实验_细胞化学法
实验材料组织样品试剂、试剂盒DABMnCl2TrisCaCl2KClNaOHTris 缓冲液多聚甲醛锇酸实验步骤1. 组织取材后，即放入孵育液中，孵育 5 min。孵育液配方如下：DAB 2.5 mmol/L， MnCl2 0.5 mmol/L，Tris 4 mmol/L，CaCl2 2 mmol/