酶的特性实验—底物专一性

实验原理 酶的专一性是指一种酶只能对一种底物或一类底物(此类底物在结构上通常具有相同的化学键)起催化作用,对其他底物无催化反应。如淀粉酶只能催化淀粉水解,对蔗糖的水解并无催化作用。淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖及葡萄糖,这两种己糖的半缩醛基可与 Benedict试剂反应,生成氧化亚铜的砖红色沉淀。 本实验以唾液淀粉酶(内含淀粉酶及少量麦芽糖酶)和蔗糖酶对淀粉及蔗糖的催化作用,观察酶的专一性。 试剂和器材 一、试剂 2%蔗糖;1%淀粉溶液(含0.3%氯化钠)。 本乃狄(Benedict)试剂:溶解85g柠檬酸钠和50gNa2CO3•2H2O于400mL蒸馏水中;另溶 8.5g CuSO4•5H2O于50mL热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅匀,如有沉淀可过滤除去,此试剂可长期保存。 二、材料 (1) 唾液淀粉酶溶液:先......阅读全文

酶的特性实验—底物专一性

实验原理 酶的专一性是指一种酶只能对一种底物或一类底物(此类底物在结构上通常具有相同的化学键)起催化作用,对其他底物无催化反应。如淀粉酶只能催化淀粉水解,对蔗糖的水解并无催化作用。淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖及葡萄糖,这两种己糖的半缩醛基可与 Benedict试剂反应,生成氧化亚

酶免疫技术酶与底物

酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染

酶催化反应的专一性介绍

酶催化反应的专一性实际上包括两方面内容:⑴与底物结合的专一性,决定酶的催化作用专一性;⑵对底物催化的专一性,分别由结合与催化部位组成构成活性中心,决定催化活力和催化专一性。   如前所述,酶的活性中心是由肽链中的某些氨基酸基团组成,催化部位的氨基酸数目一般只有2~3个,而结合部位的氨基酸数目要多一些

酶免疫技术中酶和酶作用底物

酶和酶作用底物(一)酶的要求: 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。3.作用专一性强 ,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检

免疫酶技术中常用的酶底物系统

各种免疫酶技术,最终都是以某种显色反应而揭示待测物质来进行定性和定量分析。不同酶要选择相应的底物,见下表。免疫酶技术中常用的酶-底物系统酶底物显色反应测定波长/nm辣根过氧化物酶二氨基联苯胺深褐色沉淀5-氨基水杨酸棕色449邻苯二胺橘红色492/460邻联甲苯胺蓝色4254-硝基酚磷酸黄色400碱性

酶底物复合物的概念

中文名称酶-底物复合物英文名称enzyme-substrate complex定  义在酶催化的反应中,酶首先与底物结合形成的过渡态中间物。可转化成产物和酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

试剂盒酶的底物分类

酶的底物 1.3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应,最具代表性的过氧化物为H2O2,其反应式如下:DH2+ H2O2 D+ H2O上式中,DH2为供氧体,H2O2为受氢体。2.在ELISA试剂盒中,DH2一般为无色化合物,经酶作用后成为有色的产品,以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯

酶催化专一性的两种学说

酶为什么具有很高的催化效率呢?一般认为是酶降低了化学反应所需的活化能。所谓活化能,就是指一般分子成为能参加化学反应的活化分子所需的能量。然而在一个化学反应中并不是所有的底物分子都能参加反应的,因为它们并不一定都是活化分子。活化分子是指那些具备足够能量能够参加化学反应的分子。要使化学反应迅速进行,就要

ELISA中的试剂(3)-酶的底物

3.3  酶的底物 3.3.1  HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应,最具代表性的过氧化物为H2O2,其反应式如下:DH2+ H2O2 D+ H2O上式中,DH2为供氧体,H2O2为受氢体。在ELISA中,DH2一般为无色化合物,经酶作用后成为有色的产物,以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二

人激肽释放酶8的实验特性

人激肽释放酶8的实验特性产品中文名称:人激肽释放酶8(KLK 8)ELISA Kit 产品英文名称:Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU ELISA Kit试剂盒规格:96T/48T96T指可以做84个标本,12个标准对照48T指可以

酶的特性实验报告结果分析

酶的特性实验报告结果分析是:酶特异性指酶专性应该用同酶对应同反应底物来做。实验取A B两试管A试管加入1毫升蔗糖溶液,B试管加入1毫升淀粉溶液,分别加入等量唾液淀粉酶1毫升,两试管加入等量菲林试剂。水浴加热实验结:A试管无颜色,B试管有砖红色沉淀,说明淀粉被唾液淀粉酶分解成还原性糖而蔗糖没有被分解,

酶催化的特点和底物类型

特点一、酶促反应具有极高的效率二、酶促反应具有高度的特异性酶的特异性是指酶对底物的选择性,有以下三种类型:1.绝对特异性 酶只作用于特定结构的底物,生成一种特定结构的产物。如淀粉酶只作用淀粉。2.相对特异性 酶可作用于一类化合物或一种化学键。例如磷酸酶可作用于所有含磷酸酯键的化合物。3.立体异构特异

底物存放时间对酶活的影响

大量实验表明,长时间存放的底物,会造成较高的本底值,影响测定精度。我们分析了植酸钠溶液存放在4 ℃条件下,底物存放时间对酶活的影响,结果见表3。

大肠杆菌的呼吸酶和底物

大肠杆菌的呼吸酶和底物呼吸酶氧化还原对中点电位(伏)甲酸脱氢酶碳酸氢盐/甲酸盐−0.43氢化酶质子/氢−0.42NADH脱氢酶NAD/NADH−0.32甘油-3-磷酸脱氢酶DHAP/Gly-3-P−0.19丙酮酸氧化酶醋酸盐+二氧化碳/丙酮酸盐?乳酸脱氢酶丙酮酸盐/乳酸盐−0.19D-氨基酸脱氢酶2

底物种类对酶活的影响

实验结果表明,用Sigma植酸钠做底物,其酶活检测值相当于国产植酸钠的82.49%左右,经过反复多次的对比,两种底物的检测值都有相似的对应关系。国产植酸钠完全可以替代Sigma植酸钠用于中性植酸酶酶活的检测,同时,其价格只有Sigma植酸钠的0.5%,用国产植酸钠可以大大降低检测成本。

常用的酶和常用的底物有哪些?

常用的酶1.辣根过氧化物酶(HRP):目前酶联免疫吸附试验中应用最广泛的标记用酶。由无色的糖蛋白(主酶)和亚铁血红蛋白(辅基)结合而成的复合物。辅基是酶活性基团,而主酶则与酶活性无关,HRP的纯度用RZ(HRP分别在403nm和275nm处的吸光度比值)表示,RZ值应大于3.0。RZ值仅说明血红素基

生物酶学基础酶催化专一性的两种学说

酶催化专一性的两种学说酶为什么具有很高的催化效率呢?一般认为是酶降低了化学反应所需的活化能。所谓活化能,就是指一般分子成为能参加化学反应的活化分子所需的能量。然而在一个化学反应中并不是所有的底物分子都能参加反应的,因为它们并不一定都是活化分子。活化分子是指那些具备足够能量能够参加化学反应的分子。要使

使用荧光底物的直接-ELISA-实验

实验概要使用荧光偶联一抗的直接 ELISA 测定的程序。实验步骤第 1 天:1. 在滤过的 PBS 中稀释包被抗体后,在每孔中加入 100 μl 进行包被。用封板膜覆盖酶标板,将酶标板在 4℃下孵育过夜。 第 2 天:2. 将 4 g Block ACE 粉末稀释于 100 ml 去离子水中,使用其

用于酶联免疫测定(ELISA)酶的色原底物

辣根过氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2,2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2,2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6),ABTS](杂环吖嗪)、四甲基联苯胺(TMB)和4—氨基安替比林:苯酚耦联底

专一性反应和专一性试剂的概念

专一性,也称专属性。在分析化学中,当一个试剂只与一种离子或物质发生反应,而不与其他离子或物质起相同反应时,则该试剂可称专一性试剂,该反应称专属性反应。在大多数情况下,一种试剂往往可以与许多种离子或物质起作用。

底物浓度对酶反应速度的影响

底物浓度的改变,对酶反应速度的影响比较复杂。在一定的酶浓度下当底物浓度较低时(底物浓度从0逐渐增高),反应速度与底物浓度的关系呈正比关系。随着底物浓度的增加,反应速度不再按正比升高;如果再继续加大底物浓度,反应速度却不再上升,趋向一个极限 。

酶测定中底物浓度的影响有哪些?

在检测试剂中底物浓度、辅因子、活化剂、复构剂的种类和浓度均对酶的测定至关重要。其中以底物的种类和浓度最为重要。底物浓度影响遵循米氏方程:ν=V[S]/Km+[S]当底物浓度远远小于Km,增加底物浓度,反应速度增加。当底物[S]>>Km时,公式近似为ν=V,反应速度不再增加,故此时反应速度为最大反应V

大肠杆菌的呼吸酶和底物汇总

大肠杆菌的呼吸酶和底物呼吸酶氧化还原对中点电位(伏)甲酸脱氢酶碳酸氢盐/甲酸盐−0.43氢化酶质子/氢−0.42NADH脱氢酶NAD/NADH−0.32甘油-3-磷酸脱氢酶DHAP/Gly-3-P−0.19丙酮酸氧化酶醋酸盐+二氧化碳/丙酮酸盐?乳酸脱氢酶丙酮酸盐/乳酸盐−0.19D-氨基酸脱氢酶2

关于酶标记抗体的酶制剂及其底物

  凡无毒性又能呈现有色化学反应的酶,原则上均可作为标记用。但作为标记抗体用的酶应满足下列要求:(1)来源方便,易于纯化;(2)比活性高,性质稳定;(3)酶活性和量能用简单方法测定。在免疫酶技术中常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP),其次还有葡萄糖氧化酶,β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹

底物浓度对酶反应速度的影响

底物浓度的改变,对酶反应速度的影响比较复杂。在一定的酶浓度下当底物浓度较低时(底物浓度从0逐渐增高),反应速度与底物浓度的关系呈正比关系。随着底物浓度的增加,反应速度不再按正比升高;如果再继续加大底物浓度,反应速度却不再上升,趋向一个极限。

大肠杆菌的检测方法酶底物法

  酶底物法已被列为国家标准(GB/T4789.32-2002),用酶底物法来检测大肠杆菌的主要原理是:大肠杆菌细菌能够产生 β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase),它能够分解 ONPG(Ortho-nitro phenyl-β-D-galactopyr-anoside),从而使得培养

催化二糖水解的酶具有相对专一性吗

具有。酶是一种有机的胶状物质,该物质在进行催化二糖水解时是具有相对专一性的。酶是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA。

酶免疫技术中酶和酶作用底物是怎么样的呢?

  酶和酶作用底物  (一)酶的要求:  一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:  1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。  2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。  3.作用专一性强 ,酶活性不受样品

菊粉酶的特性

菊粉酶是水解菊粉的β-2,1-D-果聚糖果糖苷键的水解酶,产低聚果糖,分内切酶和外切酶两种。将黑曲霉菊粉内切酶基因克隆到毕赤酵母得到高效表达,重组酶活力达128 U/mL,达到国际水平。 

酶的基本特性

1、高效性:酶的催化反应可以在常温常压和温和的酸碱条件下进行,一个酶分子在一分钟内能引起数百万个底物分子转化为产物,较其他催化剂相比,酶的催化能力大1000万倍到10万亿倍。2、绝对或相对的专一性:酶促反应的另一个特点就是对底物的高度专一性。一种酶只能催化一种(绝对专一性)或一类物质(相对专一性)反