Nature|胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚
哺乳动物的发育起源于受精卵,受精卵通过分裂,经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚(Morula)再到囊胚(Blastocyst)阶段,称之为着床前胚胎(pre-implantation)。随后胚胎植入子宫壁,诱导子宫内膜蜕膜化(decidualization)预示着成功着床(implantation)。着床后胚胎通过原肠作用形成外胚层/内胚层和中胚层,不同胚层细胞相互作用,为胚胎形成结构复杂的器官奠定基础。 复杂的生命历程有着复杂的分子调节机制,为了研究这些复杂的科学问题, 科研人员研发了 体外培养体系 。类器官(Organoids)的出现,为研究器官形成和人类疾病发生等问题,打开了新的篇章。目前,类器官模型已经成功应用于许多器官模型的建立,如脑、肝、肾等。类器官模型在研究疾病发生和药物筛选方面发挥着重要的作用。 人工培育胚胎作为胚胎研究的类器官一直受到科学家的广泛关注:2016年,研究人员成功......阅读全文
首次体外合成新冠病毒,只需一周!
反向遗传学是一种不可或缺的工具,它彻底改变了我们对病毒发病机制和疫苗开发的认识。大型RNA病毒基因组,如冠状病毒基因组,在大肠杆菌宿主中克隆和操作都很麻烦,因为它们体积庞大,而且有时不稳定。因此,为RNA病毒提供另一种快速、适用的反向遗传学平台将有利于研究人员加快相关研究。 近日来自瑞士伯尔尼
避免灭绝-濒危蟾蜍首次通过体外受精出生
一个国际科研团队宣布,他们在拯救波多黎各凤头蟾蜍方面取得新进展,让这种濒临灭绝的动物首次通过体外受精出生,为避免其灭绝带来希望。图片来源于网络 据物理学家组织网近日报道,一只名为“奥拉夫”的蟾蜍,其名字源于孕育它的冷冻精子,是此次孵化出的300多只波多黎各凤头蟾蜍中的一只。美国德克萨斯州沃斯堡
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(一)
一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol,需要用专用
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(三)
ITSFn and N3(分化培养基):配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分装在15ml 离心管中,(稀释为1×,ITSFn 7.05ml,N3 12.55ml),0.2μm滤膜过滤,贮存在-20℃。将该溶液加入DMEM/F12中制备培养基,贮存于4℃。 贮存液 DMEM(高
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(四)
第3步--ITSFn培养基在最少量培养基中选择神经前体细胞1.在胚状体接种在组织培养皿一天后将培养基换成ITSFn培养基2.并非所有胚状体在这一时期都已经发生粘附,因此在移除培养基时要小心谨慎以使大部分胚状体留在培养皿内。3.保持细胞在ITSFn中培养大约10天,根据需要更换培养基--大约每隔一天。
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(二)
Geltin(明胶)包被准备500ml 0.1%geltin溶液1.将0.5 g明胶溶解在500ml无钙镁的PBS中(50-65℃水浴15~30分钟)。2.最好在溶液没有冷却的情况下通过0.22 μm滤膜过滤,贮存在4℃。包被培养板或培养皿1.加入足量的明胶溶液覆盖培养平面(15 cm培养皿加2ml
吴朝晖:类脑计算构建“人造超级大脑”
人脑和计算机哪个结构更复杂?计算机可否像人脑一样自我学习与进化?智能机器是否可以像人类一样思考与行动?人类能否打造像人脑一样的“机器脑”?这些你可能想过的问题,都属于类脑计算研究的领域。 类脑计算,是借鉴生物大脑的信息处理方式,以神经元与神经突触为基本单元,从结构与功能等方面模拟生物神经系统,进
小分子药物与miRNA关联图首次构建
哈尔滨医科大学科研人员基于基因芯片数据、利用生物信息学方法,首次构建了人类癌症中小分子化合物与miRNA(微小核糖核酸)的关联图。近日,相关成果《基于转录反应识别人类癌症中小分子和miRNA关联》由Nature子刊《科学报道》在线发表。 miRNA是一种单链的非编码RNA,参与多种与人类癌
核移植技术的应用
1、细胞治疗细胞移植可以治疗由于细胞功能缺陷所引起的各种疾病,如糖尿病;中枢神经系统疾病(帕金森,阿尔莫茨症);肝功能衰竭;甲状腺疾病。2、异种器官移植治疗性克隆是利用核移植技术将病人的体细胞核移植到去核的卵母细胞中,使其重编程并发育成囊胚,然后再用胚胎干细胞分离技术从克隆囊胚的ICM分离出多能胚胎
类器官技术步骤
类器官技术是一种在体外培养环境中构建具有三维结构和部分功能的微型器官样组织的方法。它具有以下几个关键步骤:细胞获取:通常从胚胎干细胞、诱导多能干细胞或成体干细胞中获取起始细胞。培养体系建立:使用特定的培养基和添加物,为细胞提供适宜的生长环境。诱导分化:通过添加特定的生长因子、化学物质或物理信号,引导
体内组织细胞的体外培养1
体内组织细胞在体外培养时,所需培养环境基本相似,但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同,各自要求条件有一定差别,所采取的培养技术措施亦不尽相同,现介绍个别组织细胞培养的要点如下:一、上皮细胞培养上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别
体内组织细胞的体外培养2
培养方法如下:1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后,仔细剥除脑膜、血管和纤维成分,置Hanks液中漂洗一、二次。2、置于30―50倍体积的Hanks液中,此时脑组织比较柔软,反复吹打即制成细胞悬液。3、把悬液注入离心管室温中直立5-10分钟后,细胞或细胞团快自然下沉,脂肪等杂物易漂浮,可吸除上层、反复
细胞体外培养的三大污染
细胞培养技术是离体方法中主要的一种,是从动物体内取出细胞,模拟体内的生理环境,在无菌、适温、丰富的营养条件下,使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础,细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要,然
关于胚胎干细胞的研究进展—猪ES细胞的介绍
Piedrahita J A等采用STO、猪成纤维细胞和猪子宫上皮细胞作为饲养层,以DMEM为基础培养液,从猪囊胚ICM分离ES细胞,发现猪囊胚ICM在STO或PMEF饲养层上可以附着增殖,而在猪胎儿成纤维细胞饲养层上虽可附着但增殖甚微,传不过4代即发生死亡。Evans等将6天~7天猪囊胚直接培
美临床试验启动后,TMSC干细胞新药又获中国CDE受理
年春节,珠海横琴爱姆斯坦生物科技有限公司(以下简称爱姆斯坦或公司)迎喜讯,公司自主研发的T-MSC干细胞新药(IMS001注射液)临床试验申请,获得中国国家药品监督管理局药品审评中心(CDE)正式受理,受理号为:CXSL2200064。 T-MSC是一种来源于人胚干细胞的间充质样干细胞,此次申
干细胞领军人物Cell子刊重大突破
日本神户理化学研究所进化生物学中心的干细胞生物学家Yoshiki Sasai近年来成为干细胞研究领域的领军人物。Sasai曾成功地将神经干细胞诱导生成精细结构,并利用干细胞培育出视杯、大脑皮层精细组织层和初级的生成激素的垂体。布鲁塞尔自由大学干细胞科学家Luc Leyns评价他的一系列论
干细胞领军人物Cell子刊重大突破
日本神户理化学研究所进化生物学中心的干细胞生物学家Yoshiki Sasai近年来成为干细胞研究领域的领军人物。Sasai曾成功地将神经干细胞诱导生成精细结构,并利用干细胞培育出视杯、大脑皮层精细组织层和初级的生成激素的垂体。布鲁塞尔自由大学干细胞科学家Luc Leyns评价他的一系列论
新型超高通量悬浮芯片的设计构建获得突破性进展
近日,上海交通大学生物医学工程学院古宏晨-徐宏研究团队在新型超高通量悬浮芯片的设计构建及用于单反应多指标生物检测技术方面取得突破性进展,研究成果“Precisely Encoded Barcodes through the Structure-Fluorescence Combinational
20年间,胚胎干细胞的“革命之路”-|-Nature长文
由胚胎干细胞分化而来的神经群,在培养基中聚集成球状。图片来源:Brivanlou Lab/Rockefeller University 胚胎干细胞(ES)为生命的早期发育提供了丰富的信息。类似于天文学家们回顾宇宙大爆炸,生物学家们也倾向于在这类细胞中寻找生命起源的秘密。科学家们将胚胎干细胞
显微注射技术:跨越百年的不老传奇
江湖寒,刀锋冷,人断肠。问世间江湖,几许清醒,几许梦寒?狂歌以后,路遥遥,风沙厉! ——古龙 时光荏苒,岁月穿梭,现已是公元2019年,回望2018,请允许小编以这古龙先生之词怀金庸先生之作。2018,注定是不平凡的一年,生命科学领域可谓是悲喜交加,前有科学家利用单细胞分离与单细胞
干细胞培养制造技术新进展(一)
干细胞是一种能够长期存活,且具有不断自我繁殖能力和多向化潜能,几乎存在于所有组织中的原始细胞。近年来随着科学家们研究的深入,干细胞在血液系统疾病、神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病以及内分泌疾病等各种疾病的治疗上让人们看到了希望。干细胞技术是当今医学研究最前沿也是最热门的方向之一,近年来发展
体细胞融合实验——悬浮培养细胞的融合
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG1000仪器、耗材离心管实验步骤1. 从无血清培养基中沉淀杂交前体细胞。2. 倒尽上清。3. 用手指弹拨管底或双手搓转离心管,使细胞重新悬浮。4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分钟。5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培养基稀释 PEG。于室温,20
悬浮培养生物反应器的选择
反应器规模能否放大是选择反应器的一个霞要前提,悬浮培养规模的放大主要通过增加反应器体积或者增加反应器数量,增大反应器体积可以节省大量的配套工程及人员成本,而多台小的反应器虽然操作灵活,但成本相对高。在国外生物制品生产中采用的多是较大规模的、能够逐级放大的生物反应器。选择和配置生物反应器还需考虑和满足
如何将贴壁细胞驯化成悬浮培养
如何将贴壁细胞驯化成悬浮培养首先贴壁转悬浮驯化:搅拌瓶硅化,在搅拌力作用下使细胞完全适应悬浮培养再降血清驯化,逐步降低血清浓度至无血清培养
悬浮细胞在细胞培养瓶中的接种
实验方法原理淋巴样细胞通常呈悬浮状生长。常用的培养液为含 10%~15%FBS 的 RPMI1640 各种细胞系间最佳接种密度和平台期细胞密度各不相同。当培养一种新的细胞系时其最佳原则为按 1:2 和 1:4 的比例传代细胞,在 3~4 天时间内进行细胞计数以计算每毫升细胞数。细胞在传代后 24~3
悬浮培养生物反应器的选择
反应器规模能否放大是选择反应器的一个霞要前提,悬浮培养规模的放大主要通过增加反应器体积或者增加反应器数量,增大反应器体积可以节省大量的配套工程及人员成本,而多台小的反应器虽然操作灵活,但成本相对高。在国外生物制品生产中采用的多是较大规模的、能够逐级放大的生物反应器。选择和配置生物反应器还需考虑和
方案-21.9-悬浮培养细胞生长曲线的绘制实验
方案21.9 悬浮培养细胞生长曲线的绘制 实验方法原理 以三种不同细胞浓度进行系列细胞培养,每天计数细胞直至平台期。
悬浮细胞在细胞培养瓶中的接种
实验方法原理 淋巴样细胞通常呈悬浮状生长。常用的培养液为含 10%~15%FBS 的 RPMI1640 各种细胞系间最佳接种密度和平台期细胞密度各不相同。当培养一种新的细胞系时其最佳原则为按 1:2 和 1:4 的比例传代细胞,在 3~4
Nature:科学家构建人类发育细胞图谱
目前,发育生物学的研究主要基于模式生物。由于实践上存在的挑战,人类的胚胎发育(从受精卵到胎儿出生)仍是一个知之甚少的“黑匣子”。近期,来自多国研究机构的一项联合研究阐述了人类发育细胞图谱及妊娠期参考图谱构建的路线图,相关成果发表在《Nature》杂志,标题为“A roadmap for the