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基因调控区的DNA甲基化状态的改变可导致多种癌症的发生。这种表观遗传学改变在生物学上是稳定的，并存在于循环肿瘤DNA（ctDNA）中，使其适合于早期检测和无创动态监测肿瘤负荷。数字PCR技术凭借其较高的灵敏度、精准度以及对抑制剂的耐受度，在对低拷贝样品检测时表现出了极大的优势。在转移性和II/III期结直肠癌（CRC）患者中，WNT抑制因子1（WIF1）和神经肽T（NPY）的甲基化程度较高，为了评估是否可以使用WIF1和NPY的甲基化程度作为一种结直肠癌标志物，法国Stilla Technologies联合法国国家科学研究中心（CNRS）、AP-HP等相关单位建立了一种将亚硫酸氢盐法（bisulfite-将未甲基胞嘧啶转化为尿嘧啶）与数字PCR相结合的方法。 为了检测WIF1和NPY，利用亚硫酸氢盐-3色dPCR检测方法，选择白蛋白基因ALB作为参考基因，测试了从健康个体和CRC患者血浆中提取的ctDNA。并对......阅读全文
基因调控区的DNA甲基化状态的改变可导致多种癌症的发生。这种表观遗传学改变在生物学上是稳定的，并存在于循环肿瘤DNA（ctDNA）中，使其适合于早期检测和无创动态监测肿瘤负荷。数字PCR技术凭借其较高的灵敏度、精准度以及对抑制剂的耐受度，在对低拷贝样品检测时表现出了极大的优势。在转移性和II/III
DNA甲基化是目前研究最多的表观遗传修饰之一，发生于CpG二核苷酸序列C5位置的胞嘧啶上，多发生于CpG岛上，研究发现，DNA甲基化参与调节多种细胞过程，包括胚胎发育，转录，X染色体失活，基因组印迹、染色体稳定性等。许多研究发现，DNA甲基化在一系列的疾病（如癌症等）起到十分重要的作用。在癌症患者中
非小细胞肺癌（NSCLC）肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第一位。其中，非小细胞肺癌约占所有肺癌的80%，约75%的患者发现时已处于中晚期，5年生存率很低。而非小细胞肺癌中最常见，且有针对性靶向药物的突变就是“表皮生长因子受体”（EGFR）突变。表皮生长因子受体
人类DNA中HPV16和HPV18的灵敏度和特异性检测 全世界有超过5％的癌症是因人乳头瘤病毒（HPV）导致的，它主要通过性传播的方式感染[1]。十多种HPV亚型由于其在细胞转化中的作用以及宫颈癌和口咽癌发病率的增加而被认为是高风险的。在这些亚型中，HPV16和HPV18是最普遍的，在大约
甲基化荧光检测(methylight)是利用荧光定量性PCR检测亚硫酸氢钠处理后的序列改变。在TaqManR技术中，可以使用3种不同的单核苷酸(正义引物、反义引物和荧光杂交探针)，进行不同序列的检测。与已存在的技术相比，甲基化荧光检测最明显的优点就是能同时对几百甚至几千例样品迅速检测。&
甲基化荧光检测（methylight）是利用荧光定量性PCR检测亚硫酸氢钠处理后的序列改变。在TaqManR技术中，可以使用3种不同的单核苷酸（正义引物、反义引物和荧光杂交探针），进行不同序列的检测。与已存在的技术相比，甲基化
循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA，ctDNA）来源于肿瘤细胞的凋亡、坏死或分泌产生的DNA片段，是循环游离DNA（circulatingcell-free DNA，cfDNA）的一部分。健康人群中大部分cfDNA的长度在70~200 bp，但肿瘤患者的ctDNA长度
概述2015年刚成历史，2016年已在眼前。就这样，年复一年间沧海成桑田。生命科学领域，新方法层出不穷，老方法不断升级，好不热闹。也如孔子的感叹：逝者如斯夫，不舍昼夜。就拿PCR技术来说，荧光定量PCR作为一种进行基因表达分析的技术，截至目前最大的应用市场是病原微生物的核酸体外诊断。展望未来，作为q
一． PCR的发展历史 PCR技术自问世以来，在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展，1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 应运
4、能够有效区分浓度差异（变化）微小的样品：更好的准确度、精密度和重复性，可以用于精确测定靶基因的相对表达，基因拷贝数变异分析等。图4. qPCR和dPCR的对比 四．dPCR的多指标检测的实现 如同qPCR一样，dPCR中实现多指标的并行检测能显著降低检测成本，获取更丰富的检测信息。 不同于qPC