染色体外DNA——导至癌症恶变的罪魁
北京时间11月21日，发表在《Nature》上的一篇新研究发现，在人类肿瘤细胞中发现大量如“甜甜圈”般的环状染色体外DNA(EcDNA)，改变了与癌症相关基因的表达方式，从而促进了癌细胞的侵袭性，并在肿瘤快速进化和抵御威胁的能力（如化疗、放疗和其他治疗）中发挥了关键作用。该研究由美国加州大学圣地亚哥分校（UCSD）、UCSD路德维希癌症研究所、斯坦福大学和霍华德·休斯医学研究所组成的联合研究团队，在先前具有启发性工作的基础上完成的突破性研究。研究联合通讯作者、UCSD病理学系教授、路德维希成员Paul S.Mischel说：“这是一个范式转变。癌症ecDNA的形状不同于正常的DNA，这对我们理解癌症生物学和临床影响都具有非常重要的意义。人类DNA通常形成长而扭曲的双螺旋结构，其中大约30亿个碱基对组成了23对染色体，并奇迹般地挤进每个平均直径只有6微米的细胞核中。一个细胞核内的所有DNA首尾相连，展开后大约能达到6英尺（1.8米......阅读全文
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的： 学习DNA的Feulgen染色方法，观察染色结果，了解反应原理。实验原理： DNA经弱酸(1mol／L HCl)水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应，形成紫红色的化合物，
染色体DNA的提取
一、实验目的与原理DNA是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象。DNA的提取是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作。本实验通过植物样品在液氮下研磨以粉碎组织，通过裂解液裂解细胞，有机溶剂反复抽提，使DNA进入水相与蛋白质成分分开，在RNase作用下，降解RNA以纯
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理 实验目的： 学习DNA的Feulgen染色方法，观察染色结果，了解反应原理。 实验原理： DNA经弱酸(1mol／L HCl)水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚
DNA荧光染色的样品制备
试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪实验步骤 DNA是细胞内含量比较恒定的参量，随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料（如PI）可选择性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的双螺旋碱基之间，与细胞特异性结合，DNA含量与荧光染料的结合量成正比，因此通过测定荧光强度可获知细胞的
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的：学习DNA的Feulgen染色方法，观察染色结果，了解反应原理。实验原理：DNA经弱酸(1mol／L HCl)水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应，形成紫红色的化合物，使细胞内含有
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料细胞实验步骤1． 体外培养的细胞，在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞（传代后24h，圆形发亮的细胞）时，加入秋水仙素溶液，终浓度为0.3μg/ml培养液； 2． 继续培养3h； 3． 胰酶消化收集细胞至离心管； 4． 离心1000转/min，离心10min，去上清； 5． Hanks液洗，离心
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料 细胞实验步骤 1． 体外培养的细胞，在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞（传代后24h，圆形发亮的细胞）时，加入秋水仙素溶液，终浓度为0.3μg/ml培养液； 2． 继续培养3h； 3． 胰酶消化收集细胞至离心管； 4． 离心1000转/min，离心10min，去上清； 5． Hanks液洗，
微生物拟核体内体外染色观察实验_溴化乙锭染色法
实验方法原理如果将微生物细胞裂解，使其拟核（即染色体 DNA）被抽提出来，通过溴化乙淀（ethidium bromide，简称 EB）染色并进行琼脂糖凝胶电泳，便可观察到释放到细胞外的染色体 DNA。EB 是一种扁平分子染料。可特异性插入 DNA 碱基对之间，在紫外线照射下，使 DNA 呈现荧光，因
微生物拟核体内体外染色观察实验
实验方法原理 富尔根氏（Feulgen）染色法是根据席夫氏（Schiff）试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸，碱性复红与亚硫酸结合后，失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后，使醌式结构恢复，合成一种带紫红色的碱性复红衍生
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒PBS仪器、耗材DNA荧光染料流式细胞仪实验步骤DNA是细胞内含量比较恒定的参量，随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料（如PI）可选择性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的双螺旋碱基之间，与细胞特异性结合，DNA含量与荧光染料的结合量成正比，因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤
染色体DNA的片段化
实验概要琼脂糖(agarose)或聚丙烯酰胺(PAGE)电泳是分离、鉴定和纯化DNA的标准方法。琼脂糖凝胶的分辨率比聚丙烯酰胺电泳低，但分离范围广，可以分离200 bp一50 kb的DNA。细胞凋亡时染色体从核小体间断裂形成大小为180-200bp整数倍的片段，在琼脂糖凝胶中电泳后可呈现出规
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备
实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种
质粒DNA的转化和染色体DNA的转化差异
质粒DNA的转化和染色体DNA的转化有显著的不同。在一般情况下前者的转化效率远远低于后者。但如果先用一定浓度的钙离子处理大肠杆菌细胞，再用质粒DNA和染色体DNA对它做转化实验则情况恰好相反。此外，质粒DNA很容易进入去掉了细胞壁的细菌的原生质体，说明对它的吸收并不通过专门的接受位点；质粒DNA的转
聚合酶链式反应体外扩增DNA：PCR
聚合酶链式反应体外扩增DNA1. 按以下次序，将各成分加在0.5 ml灭菌离心管、扩增管或灭菌滴定板的孔内混合：10×扩增缓冲液 5μl20 mmol/L 4种dNTP混合液（pH 8.0） 1μl20 μmol/
微生物拟核体内体外染色观察实验_富尔根氏染色法
实验方法原理富尔根氏（Feulgen）染色法是根据席夫氏（Schiff）试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸，碱性复红与亚硫酸结合后，失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后，使醌式结构恢复，合成一种带紫红色的碱性复红衍生物。此
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2
⑦ 再固定：加固定液8ml，混匀，固定10min。⑧ 离心：同上，吸去上清液。⑨ 制细胞悬液：根据细胞量多少，加入适量固定液，充分混匀，制成细胞悬液。⑩ 滴片：取出预先经冰水浸泡的载玻片，用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片，每片约滴2～3滴细胞悬液，使细胞较好分散。一般每一培养瓶
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1
一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植
染色质的组成DNA的简介
细胞中编码和控制的信息是与DNA分子紧密地联系在一起的。DNA与染色质有着重大联系。DNA是一种高分子聚合物，即由重复单位构成的大分子。每一单位都由三种较小分子组成，它们彼此结合形成核苷酸。碱基共有四种：胸腺嘧啶(T)，胞嘧啶(C)，腺嘌呤(A)，鸟嘌呤(G)。人的碱基比例 A:T:G:C是29
染色质免疫沉淀DNA分析
实验概要染色质免疫共沉淀是一种强力的方法，来联系蛋白质或其修饰的定位与基因组的关系。染色质分离并用特异性抗体判断是否与特异性 DNA 序列相结合。染色质免疫沉淀法亦可用来检测目的位点在基因组中的时空分布（用芯片或 DNA 测序）。本操作规程详细阐述了交联染色质免疫沉淀 (X-ChIP) 实验的具
染色质免疫沉淀DNA分析
实验概要染色质免疫共沉淀是一种强力的方法，来联系蛋白质或其修饰的定位与基因组的关系。染色质分离并用特异性抗体判断是否与特异性 DNA 序列相结合。染色质免疫沉淀法亦可用来检测目的位点在基因组中的时空分布（用芯片或 DNA 测序）。本操作规程详细阐述了交联染色质免疫沉淀 (X-ChIP) 实验的具
人体外周血淋巴细胞培养及染色体制片
实验概要学习和掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法。实验原理人体的1ml 外周血中一般含有约1-3×106个小淋巴细胞，通常它们都处于间期的GO和G1期。在培养条件下给予药物刺激时，经过53-72小时可在培养物中获得大量的有丝分裂细胞，供染色体标本制备和分析之用。这种外周血培养方法是在1
体外哺乳动物细胞染色体畸变试验方法！
在加入或不加入代谢活化系统的条件下，使培养的哺乳动物细胞暴露于受试样品中。用中期分裂象阻断剂（如秋水仙素）处理，使细胞停止在中期分裂象，随后收获细胞、制片、染色、分析染色体畸变。通过检测受试样品诱发体外培养的哺乳动物细胞染色体畸变的能力，从而评价受试样品的致突变性及其强度。 一、材料⒈受试样品固体受
我国团队在体外成功重构DNA双链断裂的形成
北京时间2月19日24点，国际学术期刊Nature 在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（原生物化学与细胞生物学研究所）童明汉课题组联合上海交通大学医学院附属新华医院黄旲团队的研究成果，题为“In vitro reconstitution of meiotic DNA double-st
DNA裂解分析实验_乙醇固定后PI染色
实验材料细胞试剂、试剂盒EDTA-PBS洗涤缓冲液乙醇RNA 酶PI 溶液仪器、耗材流式细胞计量术实验步骤1. 在 5 mmol/L EDTA-PBS 中洗 1X106 细胞，重悬于 300 μl 洗涤缓冲液中。加 700 μl 100% 的冰冷乙醇，滴加，并轻微搅拌。旋转搅拌混匀。2. 14000
DNA荧光组织化学染色的方法
一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色，再用FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织
DNA的化学检测项目介绍染色体
染色体介绍： 常用的正常和异常染色体的命名、缩写和符号（ISCN，1978）如下： A-G成 染色体组； 1-22 常染色体序号； X，Y 性染色体； / 用于分开嵌合体不同的细胞系； +，二 放在常染色体号或组的符号之前时，表示整个染
DNA重组的染色体交换的介绍
真核生物中染色体交换促进了减数分裂过程中的DNA重组。交换过程导致后代具有与其亲本不同的基因组合，并且偶尔可以产生新的嵌合等位基因。由DNA重组引起的基因改组增加了遗传变异。 染色体交叉涉及从父母遗传的配对染色体之间的重组，通常在减数分裂过程中发生。在前期I（粗线期）期间，四种染色单体彼此紧密
染色质DNA基因组的介绍
凡是具有细胞形态的生物其遗传物质都是DNA,只有少数病毒的遗传物质是RNA。在真核细胞中,每条未复制的染色体包含一条纵向贯穿的DNA分子。狭义而言,某一生物的细胞中储存于单倍染色体组中的总遗传信息,组成该生物的基因组。真核生物基因组DNA的含量比原核生物高得多。 突变分析结果表明,并非所有基因