凝胶电泳的显色
观察凝胶中DNA的最简便、最常用的方法就是利用荧光染料溴化乙锭进行染色。溴化乙锭是一种具有扁平分子的核酸染料,在高离子强度下,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。在DNA溴化乙锭复合物中,DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而结合的染料分子本身吸收302nm和399nm的光辐射,因此吸收的能量可在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。因此对核酸分子染色之后,将电泳标本放置在紫外光下观察,便可以十分敏感而方便地检测出凝胶介质中DNA的谱带部位,即使每条DNA带中仅含有0.05g的微量DNA,也可以被清晰地显现出来。在适当的染色条件下,荧光的强度是同DNA片段的大小或数量成正比的。在包含有几种DNA片段的电泳谱带中,每一条带的荧光强度是随着从最大的DNA片段到最小的DNA片段方向逐渐降低的。......阅读全文
tunel法荧光和显色法原理的区别
TUNEL法检测细胞凋亡操作步骤操作步骤1.用二甲苯浸洗2次,每次5min;2.用梯度乙醇(100、95、90、80、70%)各浸洗1次,每次3min;3.PBS漂洗2次;4.用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C或者加细胞通透液8min;5.PBS漂洗2次;6
Elisa显色淡的主要原因有哪些?
下面一起来看看今天的重点内容,劲马解析Elisa显色淡的主要原因有哪些:1.原因:试剂盒在运输途中时间太长,温度太高。 解决方案:尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温。2.原因:试剂盒未充分平衡。 解决方案:试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,确保所有试剂已平衡至室温(约2
神经肌肉接头部位运动终板的显色
我在做人的肌肉组织神经肌肉接头部位的直接免疫荧光,观察末梢神经和终板形态。取新鲜组织,4%多甲固定,蔗糖脱水,OCT包埋,冰冻切片机切片,35um,用两种本身自带荧光的试剂,一种染末梢神经,在激光共聚焦显微镜下显绿色,而且绿色一直显色很好,另外一种是invitrogen公司的α-Bungarotox
蒽苷的鉴别_碱成盐显色法
实验材料大黄粉末试剂、试剂盒乙醇氢氧化钠过氧化氢硫酸乙醚蒸馏水氨蒸汽甲醇醋酸镁仪器、耗材水浴锅回流瓶试管滴管载玻片短木棍三足架铁纱网盖玻片显微镜园形滤纸紫外灯1.检品溶液的制备:取大黄粉末2克,加乙醇20ml,在沸水浴上回流浸提10分钟,过滤供鉴别用。2.鉴别试验:(1)与碱成盐显色反应(Bornt
茚三酮反应的显色反应方法介绍
常用法将点有样品的层析或电泳完毕的滤纸充分除尽溶剂,用 5g/L 茚三酮无水丙酮溶液喷雾,充分吹干,置 65℃烘箱中约 30min(温度不宜过高,避免空气中氨,以免背景泛红色),氨基酸斑点呈紫红色。使各种氨基酸呈现不同颜色的方法用 0.4g 茚三酮,10g 酚和 90g 正丁醇的混合液显色。用 1g
茚三酮显色反应的影响因素分析
茚三酮与谷氨酸的显色反应灵敏度较高 ,但同时也受到多种因素的影响。当实验条件控制不好时 ,会造成实验数据的较大偏离 ,从而产生较大的误差。此显色反应的影响因素主要有以下几方面。谷氨酸浓度的影响实验表明 ,谷氨酸与茚三酮水溶液在表 3所注条件下反应的最低显色浓度为70μg/ mL 。随谷氨酸浓度变大
凝胶电泳的分类
(1)琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖是一种线性多糖聚合物,是从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的电泳介质,其密度是由琼脂糖的浓度决定的。经过化学修饰的低熔点(LMP)的琼脂糖,在结构上比较脆弱,因此在较低的温度下便会熔化,可用于DNA片段的制备电泳。聚丙烯
凝胶电泳的原理
当一种分子被放置在电场当中时,它们就会以一定的速度移向适当的电极,这种电泳分子在电场作用下的迁移速度,叫做电泳的迁移率。它同电场的强度和电泳分子本身所携带的净电荷数成正比。也就是说,电场强度越大、电泳分子所携带的净电荷数量越多,其迁移的速度也就越快,反之则较慢。由于在电泳中使用了一种无反应活性的稳定
凝胶电泳
以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大,对一般蛋白质不起分子筛作用,但适用于分离同工酶及其亚型,大
人ELISA试剂盒显色的重要性
人ELISA试剂盒的显色是ELISA中的最后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色
薄层层析分离中的显色与定量
一、薄层层析分离中的显色:薄层层析分离中的薄层板展开后,从展开装置中取出,放入干燥器中干燥,然后根据被分离物质的种类和性质,选用相应的显色剂显色或用紫外光检测被分离物质的斑点,测量和计算各斑点的迁移率。样品所含溶质较多或某些组分在单相薄层层析分离中的迁移率比较接近,不易明显分离时,可采用双相薄层层析
纸层析分离中的显色与结果分析
一、纸层析分离中的显色:1、显色剂显示:被分离物质与显色剂生成有颜色的化合物,显示斑点位置。常用喷雾法 、浸渍法和涂刷法。2、紫外光显示:有些物质受紫外光照射会发出荧光,可在紫外光照射下观察到被分离物质的斑点。3、荧光薄层检测:如果样品斑点在紫外光照射下不显荧光,可在吸附剂中加入荧光物质或在制备好的
避免ELISA试剂盒显色淡的小妙招
在实验室工作的科研人员们在做ELISA实验的时候,难免会遇到elisa试剂盒显色淡灵敏度偏低的问题,其实这些问题我们只要稍微注意一点是可以避免的,今天就为大家整理了一些避免ELISA试剂盒显色淡及灵敏度偏低的操作方法,希望能对您有所帮助!避免显色淡及灵敏度偏低的方法:A、尽量缩短运输时间,夏季应放冰
薄层层析分离中的显色与定量
一、薄层层析分离中的显色: 薄层层析分离中的薄层板展开后,从展开装置中取出,放入干燥器中干燥,然后根据被分离物质的种类和性质,选用相应的显色剂显色或用紫外光检测被分离物质的斑点,测量和计算各斑点的迁移率。 样品所含溶质较多或某些组分在单相薄层层析分离中的迁移率比较接近,不
纸层析分离中的显色与结果分析
一、纸层析分离中的显色: 1、显色剂显示:被分离物质与显色剂生成有颜色的化合物,显示斑点位置。常用喷雾法 、浸渍法和涂刷法。 2、紫外光显示:有些物质受紫外光照射会发出荧光,可在紫外光照射下观察到被分离物质的斑点。 3、荧光薄层检测:如果样品斑点在紫外光照射下不显荧光,可在吸附剂中加入荧光物质
有机合成实验猿的福音!TLC显色剂大全
显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。 l.通用显色剂 ①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5
关于茚三酮反应的显色反应方法介绍
茚三酮反应的显色方法有下列数种: 一、常用法 将点有样品的层析或电泳完毕的滤纸充分除尽溶剂,用 5g/L 茚三酮无水丙酮溶液喷雾,充分吹干,置 65℃烘箱中约 30min(温度不宜过高,避免空气中氨,以免背景泛红色),氨基酸斑点呈紫红色。 二、使各种氨基酸呈现不同颜色的方法 1、用 0.
免疫组化实验中DAB显色的原理
DAB是过氧化物酶重要的显色底物之一,能被催化生成水不溶性的棕黄色产物,能直观地观察到,适用于各种斑点检测和免疫组化中的染色步骤。建议可以直接选用absin品牌的DAB试剂盒,试剂盒里的选色液都是配置好直接用的,可以根据实验需要选择不同的颜色
念珠菌显色培养基用途
用于白色念珠菌分离和鉴定:念珠菌显色培养基根据酶底物法,通过显色来区别不同念珠菌,25-28℃培养48小时后,白色念球菌显蓝绿色,热带念珠菌显蓝灰色或铁蓝色,光滑念珠菌显紫色,克柔假丝酵母显粉色,其它念珠菌显白色,细菌被抑制。
血凝分析仪底物显色法简述
底物显色法(生物化学法) 底物显色法是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性的,该方法又可称为生物化学法。其原理是通过人工合成与天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列顺序、并含有特定作用位点的小肽,并将可水解产色的化学基因与作用位点的氨基酸相连。测定时由于凝血因子具有蛋白水解酶的活
土壤硝态氮测定不显色原因
土壤硝态氮测定不显色原因可能是掩蔽剂过早加入,使显色反应很慢。影响显色反应的主要因素有显色剂的用量、溶度的酸度、显色时间以及干扰离子等。土壤硝态氮测定,是指用水或中性盐溶液制备待测溶液,测定方法可用还原蒸馏法、镀铜镉柱还原-重氮化偶合比色法等。还原蒸馏法适用于硝态氮含量较高的土壤,土壤浸提液中的硝酸
Elisa实验步骤温育反应之显色
在Elisa实验步骤中,温育是不可或缺的一项要点。而显色是Elisa中的*后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。我公司每周都有*新技术分享给您,今天上海劲马公司带给您的*新技术是Elisa实验步骤温育反应之显色: 反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴
western-blot显色方法有哪几种
有很多种显示方法,其中HRP、化学发光检测(ECL、SuperSignal)居多,DAB显色很少见。主要分为两大类,分别介绍如下: 化学发光Chemiluminescent:随着各大厂家努力开发研制灵敏度更高的发光底物,化学发光法的灵敏度已经达到pg级别,甚至还有 Femto级别的,灵敏度超过了同
蛋白marker为什么能作为显色条带
蛋白marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。在western Blot过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Wes
TMB单组分显色液使用说明
产品简介:目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,由于3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)在HRP的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无至癌性而被广泛应用。
地衣酚显色法测定RNA含量
原理 核糖核酸与浓盐酸共热时,即发生降解,形成的核糖继而转变为糠醛,后者与3,5-二羟基甲苯(地衣酚)反应呈鲜绿色,该反应需用三氯化铁或氯化铜作催化剂,反应产物在670nm处有最大吸收。RNA在20~250μ g范围内,光吸收与RNA的浓度成正比。地衣酚反应特异性较差,凡戊糖均有此反应,DNA和其他
HER2显色原位杂交法
一、预处理1. 脱蜡至水(1)二甲苯5分钟,2次(2)100%酒精1分钟,2次(3)95%酒精1分钟,1次(4)85%酒精1分钟,1次(5)双蒸水1分钟,3次2. 加热预处理(1)热预处理液(试剂盒内带)加热至98-100℃时,放入切片,15-20分钟。(2)双蒸水洗1分钟,3次3. 胃蛋白酶消化(
沙门氏菌显色培养基
【用途】 用于食品或环境样本中沙门氏菌的筛选和分离。 【规格】 干粉培养基,34.5g/1L/瓶 【配制】 1.称取基础培养基 34.5g 于 1L 蒸馏水或去离子水中(可根据实验实际需要配比加水);充分混匀, 加热并不断搅拌至完全溶解;煮沸灭菌约 2min; 2
蛋白marker为什么能作为显色条带
蛋白marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。在western Blot过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Wes
蛋白质印迹法的显色的方法介绍
Western Blot显色的方法主要有以下几种:i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理