免疫荧光标记的应用
半个多世纪以来，经过许多学者不断改进和发展，使此项技术成为微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法，在临床上得到了广泛的应用，使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。......阅读全文
概述卫星DNA的标记应用
卫星标记应用遗传多样性的分析与评估,生物个体表现出的各种遗传变异,在本质上就是DNA的差异,因此通过研究DNA的变异来分析群体的遗传结构及遗传多样性则更为直接,Arranz等（1996）对牛的卫星DNA和蛋白质标记的比较研究发现卫星标记比蛋白质标记具有更加丰富的多态性,且其两者所得到的系统发生树
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实验材料实验样品试剂、试剂盒抗体、PBS溶液仪器、耗材移液器移液吸头离心机实验步骤一、不同来源样品的处理1 . 培养细
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理 取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理 取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实
免疫学技术:悬浮细胞的免疫荧光标记实验
免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。实验方法基本方案实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒
免疫荧光标记最常用的荧光染料有哪些条件呢
用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件： 荧光染料应有较高的量子产额和消光系数； 荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收； 发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差； 容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。 1.异硫氰酸荧光素（FITC）：可产生亮绿色荧光。F
免疫荧光组织（细胞）化学技术——荧光素及其标记抗...2
免疫荧光组织（细胞）化学技术——荧光素及其标记抗体的方法 2P3（2）Chadwick氏法 试剂和材料：抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%重碳酸钠水溶液、0.01 mol/L pH8.0磷酸盐缓冲盐水、1%硫柳汞、离心机及离心管、三角烧瓶(25 ml)、冰槽、无菌吸管及毛细滴管、烧杯(500 ml
免疫荧光组织（细胞）化学技术——荧光素及其标记抗...1
制备荧光抗体是免疫荧光组织化学的重要技术之一，制备特异性强和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高效价的抗体。 一、荧光素 荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光，停止能量供给，发光也瞬时停止。可以产生明亮荧光的染料物质，称荧光素。目前主要常用于标记抗体的荧光素如下： 1、异硫氰酸
标记抗体的应用技术——ELISA
标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。常用的标记物包括荧光素、酶和放射性核素等，用这3种标记物进行标记的免疫检测技术被称为3大免疫标记技术。目前，使用的免疫标记物还有化学发光物质、铁蛋白和胶体金
微卫星标记的概念和应用
微卫星DNA 是真核生物基因组重复序列中的主要组成部分，主要由串联重复单元组成，每单元长度在1－10bp 之间，1 个SSR 的总长度可达几十到几百个bp。每个微卫星DNA 都由核心序列和侧翼序列组成，其核心序列呈串联重复排列。侧翼DNA 序列位于核心序列的两端，为保守的特异单拷贝序列，能使微卫星特
光亲和标记的原理和应用
中文名称光亲和标记英文名称photoaffinity labeling定 义应用化学标记试剂R-P的亲和标记法。其中R能特异、可逆地与拟标记分子的活性部位结合，P是在黑暗中不起反应的基团，经光激活作用后，R-P转变为高度活化的中间产物，在结合的部位与拟标记分子形成共价键连接而标记。P可以是亲和物质
光镜下双/多重免疫标记实验——双重免疫荧光染色
实验步骤1. 古兹菲德-雅各氏病（CJD）病人的尸解脑组织，4％ 中性甲醛固定，石蜡包埋，连续切片，厚 5 μm（贴片前的载玻片应预涂不含有荧光色素的黏合剂）。2. 常规脱蜡，水化。3. 抗原修复（柠槺酸盐缓冲液 pH 6.0 中，高压灭菌器加热 100℃，20 min）及 96％ 甲酸孵育 2 m
标记抗体的方法和对应的应用
荧光素标记荧光色素是最常用于标记抗体的标记物之一。荧光素经恰当的激发可发光，从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况，主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色，是一种非常好的亚细胞水平精确定位的方法。酶标记酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成，其应用范围非常广泛，结果即时可见、敏感性高，但较难应用
脉冲追踪标记的的方法和应用
中文名称脉冲追踪标记英文名称pulse-chase labeling定 义使生物体(整体、细胞、细菌等)某成分能够被标记(如放射性标记)的环境中短暂生存，然后转入到非标记环境(如非放射性培养液)中，追踪观察被标记成分变化的实验。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
免疫标记技术及其应用
近二十几年来，免疫学检测的方法发展很快，特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后，使检测的敏感性和特异性都大大提高。继20世纪50年代的免疫荧光(1FA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后，在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。 标记免疫技术是将某种可微量测定或超微量
－免疫组织化学法实验——悬浮细胞的免疫荧光标记
实验材料细胞生长于含培养液的15 mL Falcon管中试剂、试剂盒PBSPFA固定液仪器、耗材多聚L-赖氨酸包被的载玻片实验步骤1) 细胞在冰浴中冷却，然后用台式离心机在4℃以800 g离心5 min (用于淋巴细胞）。吸去培养液并以4℃的PBS重悬细胞。离心机转速依细胞类型进行调整，但必须低转速
免疫组织化学法实验——组织切片的免疫荧光标记
实验材料组织样本冰冻切片置于载玻片上试剂、试剂盒PBS第一抗体5〜10μg mL第二抗体特异性针对第一抗体的抗体突光染料结合物封片介质（如Gelvatol)仪器、耗材塑料玻片盒或加湿盒实验步骤1) 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒。从冰冻切片机或冰箱取出载有切片的载玻片，交叉放入玻片盒（每边约6片
免疫荧光技术的实验方法及其分类（免疫标记法和荧...2
一、免疫标记法及其分类1.荧光免疫法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮，检测产物发出的荧光，荧光强度与Mb浓度呈正比，可在8min内得出结果。结果以 Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。该法重复性好，线性范围宽，具有快速、敏感、准确的特点。以双抗夹心法为例，首先将特异性
细胞化学基础卫星DNA的标记应用
卫星标记应用遗传多样性的分析与评估，生物个体表现出的各种遗传变异，在本质上就是DNA的差异，因此通过研究DNA的变异来分析群体的遗传结构及遗传多样性则更为直接，Arranz等（1996）对牛的卫星DNA和蛋白质标记的比较研究发现卫星标记比蛋白质标记具有更加丰富的多态性，且其两者所得到的系统发生树基本
应用激酶交换反应的末端标记
应用激酶交换反应的末端标记1．在置冰浴中的1.5ml微量离心管内依次加入：50 pmol合成寡核苷酸2.5μl 10×反应缓冲液1.5μl ADP（300μmol/L终浓度）10μl γ－[32P]ATP（33pmol）1.5μl T4多核苷酸激酶（15U）蒸馏水加至25μl2．37℃水浴温育30分
免疫荧光技术应用食品检测的原理
将抗体球蛋白稀释成2mg/mL,和2%绵羊红细胞1∶1混合(混合后血球成1%),再加依文斯兰2滴(0.1%)。这样的悬液里和血球表面带有沙门氏菌的抗体,加上增菌液,在湿的环境下使抗原和抗体结合,其余的杂质和非特异的物质不与抗体结合,不易固定在玻片上,易被水冲击。因此,有特异性的抗原就能滞留在玻璃片上
链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 生物素荧光染料链亲和素仪器、耗材 离心机摇床实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3.
链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验
免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法，在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光
免疫组织化学法实验——单层生长细胞的免疫荧光标记
实验材料在3〜5 cm培养皿上生长的单层细胞（培养皿越小所需的抗体就越少 但培养皿应适合显微镜下观察）试剂、试剂盒VPBS40℃2% (m V)高聚甲醛（PFA)固定液 4℃ 用于细胞表面抗原固定100%甲醇 -10〜-20℃ (置于冰箱的结冻室冷却较为理想）；或含0.1% (V V) Triton
简单描述肿瘤标记物外科应用
肿瘤标记（tumor marker)是指肿瘤发生、增殖过程中，在宿主体液内出现的浓度异常的生化物质。 这些物质可以是肿瘤细胞的产物，如肿瘤相关抗原、异位激素等；也可以是宿主反应产物，如抗病毒抗体、急性反应期蛋白等。广义的肿瘤标记还应包括可释放入体液的肿瘤细胞表面抗原和胞质蛋白成分，以 及包括肿
微卫星DNA分子标记及其应用
微卫星（Microsatellite，MS）又称短串联重复（Short Tandem Repeats，STR）或简单序列重复（Simple Sequnce Repeat，SSR），是指基因组中以少数几个核苷酸（多数为2-4个）为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核苷酸
免疫荧光技术应用食品检测方法
(1)取10%戊二醛血球悬液0.3mL于10mL刻度离心管中用2mL生理盐水洗两次(2500r/min,5min)。将沉淀血球配成2%血球悬液,以1∶20000鞣酸生理盐水1∶1混合,置37℃水浴中15min鞣化。(2)将提纯的伽马球蛋白稀释成2mg/mL,和以上血球1∶1混合。此时血球为1%球蛋白
标记抗体的应用技术——BAELISA
实验方法原理BA-ELISA是在常规ELISA原理的基础上，结合生物素（B）与亲和素（A）间的高度放大作用，而建立的一种检测系统。亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，分子量为68 kDa，由4个亚单位组成，对生物素有非常高的亲和力（结合常数高达1015M-1）。生物素很易与蛋白质（如抗体等）以共
肿瘤标记物的应用具体包括哪些？
(1)早期诊断和发现肿瘤。(2)提示肿瘤发生的部位和组织来源。(3)肿瘤的鉴别诊断。(4)肿瘤治疗的疗效观察和预后判断。(5)监测肿瘤复发。注：要达到上述应用，须具有以下条件：(1)肿瘤标志物的特异性强。(2)肿瘤标志物的诊断灵敏度高。(3)肿瘤标志物的产量或血清浓度应与肿瘤组织大小呈正相关。
化学发光标记的原理和应用
中文名称化学发光标记英文名称chemiluminescence labeling定 义在待检测的分子(蛋白质、核酸等)上连接可激活发光的化合物的方法。也可以连接上半抗原(如地高辛精、生物素等)，再用酶标记的抗半抗原抗体或抗生物素蛋白与之结合，结合于半抗原上的酶标记抗体或抗生物素蛋白能催化化学发光底