制备互补DNA的方法和过程

DNA－芯片的制备与应用

DNA 芯片的制备与应用DNA 芯片的出现，是生物技术领域的一次革命，虽然现在无法预知它带给我们的变化。但由于它在人类基因组计划，基因表达和药物筛选等方面的潜在用途。目前已有越来越多的公司和研究机构加入到DNA芯片的设计与开发。DNA芯片技术集成了集成电路制造，照相平板印刷，DNA合成，探针的荧光标

质粒DNA的小量制备实验——

实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱，在特定的条件下，使质粒能在离心过柱的瞬间，结合到质粒纯化柱上，在一定条件下又能将质粒充分洗脱，从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒LB培养基卵清溶菌酶异丙醇TE仪器、耗材离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤一、实验步骤1.  接种一

DNA－亲和介质的制备实验

DNA 亲和介质的制备实验             试剂、试剂盒 ATP [y-32P]ATP T4多核苷酸激酶

质粒DNA的小量制备实验

实验方法原理 当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 细菌克隆试剂、试剂盒 LB培养基抗生素葡

细菌质粒－DNA－的小量制备

实验方法原理 由于大肠杆菌染色体 DNA 比通常用作载体的质粒 DNA 分子大得多，因此在提取过程中，染色体 DNA 易断裂成线型 DNA 分子，而大多数质粒 DNA 则是共价闭环型，根据这一差异便可以设计出各种分离、提纯质粒 DNA 的方法。碱裂解法就是基于线型的大分子染色体 DNA 与小

DNA荧光染色的样品制备

试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪实验步骤 DNA是细胞内含量比较恒定的参量，随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料（如PI）可选择性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的双螺旋碱基之间，与细胞特异性结合，DNA含量与荧光染料的结合量成正比，因此通过测定荧光强度可获知细胞的

质粒DNA的小量制备实验

碱裂解小量制备法 煮沸法             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

动物组织中DNA的制备

（一）原 理DNA是所有生物体的基本组成物质。真核生物DNA主要存在于细胞核中。制备DNA时应将细胞核膜打破方能释放出来。细胞中的DNA和RNA分别与蛋白质相结合，形成脱氧核糖核蛋白及核糖核蛋白。在细胞破碎后，这两种核蛋白将混杂在一起。因此，要制备DNA首先要将这两种核蛋白分开。已知这两种核蛋白在不

质粒DNA的小量制备实验

实验方法原理 碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 培养基试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇VTE仪器、耗材 平板实验步骤 1.  接种一个单菌落于5 ml无菌LB培养液中，在37°C培养至饱和状态（过夜）。2.  取1.5 ml培养液以最大转速离心20 S。弃上清。3.  沉淀用10

质粒DNA的大量制备实验

碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法             实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠，而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制

斑马鱼胚胎DNA的制备

材料和试剂1.        蛋白酶K（罗氏03115836001）2.        1M的Tris，pH值8.33.        氯化钾4.        吐温20（10％，EMD4 biosciences，655207）5.        NP40（10％，Merck，492018）设备1.

碱基互补原则规律计算方法

关于碱基互补配对规律的计算，其生物学知识基础是：基因控制蛋白质的合成。由于基因控制蛋白质的合成过程是：⑴微观领域—分子水平的复杂生理过程，学生没有感性知识为基础，学习感到非常抽象。⑵涉及到多种碱基互补配对关系，DNA分子内部有A与T配对，C与G配对；DNA分子的模板链与生成的RNA之间有A与T配对，

DNA混编的定义和方法特点

中文名称DNA混编英文名称DNA shuffling定　　义对一组进化上相关的DNA序列进行重新组合去创造新基因的手段。是分子定向进化的一种方法。如将不同种属或同一基因家族不同来源的基因或DNA混合，用酶或超声等方法切成短片段，再重新随机连接组装，用预定的功能标志来筛选期望的基因或DNA。此法可有效

真菌的DNA和RNA提取方法

搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取，由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择，在此分享一下我一直在用的提取方法，供大家参考。真菌DNA的提取（方法一）1.取真菌菌丝0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2

DNA检测的原理、方法和手段

要看你是要测DNA的序列还是仅仅检测有没有DNA。如果要检测DNA的存在就用二苯胺试剂在水浴加热的条件下观察到蓝色现象（原理是DNA遇二苯胺试剂在水浴加热的条件呈蓝色），如果要检测DNA的序列就通过DNA分子杂交技术对从生物细胞内提取的DNA分子进行测序（原理是DNA的碱基互补配对原则），如果是检测

真菌的DNA和RNA提取方法

一、真菌DNA的提取(方法一)1.实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1％SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:异戊

真菌的DNA和RNA提取方法

一、真菌DNA的提取(方法一)1.实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1％SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:异戊

真菌的DNA和RNA提取方法

搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取，由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择，在此分享一下我一直在用的提取方法，供大家参考。真菌DNA的提取（方法一）1.取真菌菌丝0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2

DNA的克隆过程概述

DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接，然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分子操作的过程，因此DNA克隆又称分子克隆，基因操作或重组DNA技术。DNA克隆涉及一系列的分子生物学技术，如目的DNA片段的获得、载体的选择、各种工具酶的

组织芯片制备的技术路线和基本制作过程

组织芯片制作机细针打孔法实验材料组织蜡块试剂、试剂盒莱卡石蜡蜂蜡水冰块仪器、耗材载玻片组织芯片制作机塑料盒温箱冰箱切片机冰袋APES切片黏合剂取样针通过组织芯片制作机细针打孔的方法，从众多的组织蜡块（称为供体蜡块，donor）中采集到数十至上百的圆柱形小组织（组织芯，tissue core），并将其

组织芯片制备的技术路线和基本制作过程

组织芯片制备的技术路线和基本制作过程：通过组织芯片制作机细针打孔的方法，从众多的组织蜡块（称为供体蜡块，donor）中采集到数十至上百的圆柱形小组织（组织芯，tissue core），并将其整齐排列另一空白蜡块（称为受体蜡块，recipient）中，而制成组织芯片蜡块。然后对组织芯片蜡块进行

关于薄层层析法的简介和制备过程介绍

　　一、简介　　薄层层析法以吸附层析使用最为普遍。常用的吸附剂为硅胶、氧化铝等。薄层层析和其他层析法一样，除吸附法外，也可进行分配、离子交换、分子排阻等机理的层析，即将铺制薄层的材料相应换为涂以固定相的载体、离子交换剂、凝胶等，其操作与吸附法基本相同。　　二、过程　　制板　　铺制薄层板时，要求基底板

Northern杂交操作步骤和DNA探针的制备与标记（1）

一．原理Northern 杂交是用来测量真核生物RNA的量和大小估计其丰度的实验方法，可以从大量的RNA样本同时获得这些信息。其基本步骤包括：1. 完整mRNA的分离2. 根据RNA的大小通过琼脂糖凝胶电泳对RNA进行分离3. 将RNA 转移到固相支持物上，在转移的过程中，要保持RNA 在凝胶中的相

Northern杂交操作步骤和DNA探针的制备与标记（2）

(4) 将1 ~ 2 μl RNA 上样缓冲液加到乙二醛化的RNA 样品中，然后马上把RNA样品加到凝胶加样孔中，留着两边最外面的两个孔不要加样。将RNA 相对分子质量标准参照物加到最外面的孔中。(5) 以5V/cm 的电压进行电泳，直到溴酚蓝迁移大约8 cm。(6) 将凝胶放在保鲜膜上，在紫外灯下

质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法

实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状，离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA，尽管该方案十分快捷，但制备的DNA的

凝乳酶制备方法和用途

制法 1.小牛、小山羊或羊羔（亦可由牛、绵羊城或山羊）第四胃（皱胃）的水抽提液。一般经水洗、干燥、切片后在4%硼酸水溶液中于30℃下浸渍5天抽提而得，或用食盐浸出后干燥而成。2.蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus)、栗疫菌（Endot.hia parasitica)的非致病菌菌种或毛霉（M

染色体制备过程中的滴片方法

样品：外周血，骨髓，羊水（消化法）及其它样品等滴片方法：1.载玻片：干的干净载玻片2.滴片的细胞悬液量：每张载玻片1～２滴，每滴20～30ul3.染色体分散时间：将滴有细胞固定悬液的载片放在Maxchrome抽屉中分散5分钟（>５分钟，不影响染色体分散度）４.滴片方式；可以将载玻片放在Maxchro

移植体制备过程

脉冲场凝胶电泳制备DNA（哺乳动物细胞和组织DNA的分离）

本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要，DNA 也可以从哺乳动物细胞分离出的胞核制备。经验表明：从胞核制备 DNA 没有优点，因为从完整细胞制备的 DNA 同样易于酶切。本实验来源「分子克隆实验指南第三

脉冲场凝胶电泳制备DNA（哺乳动物细胞和组织DNA的分离）

实验方法原理 本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要，DNA 也可以从哺乳动物细胞分离出的胞核制备。经验表明：从胞核制备 DNA 没有优点，因为从完整细胞制备的 DNA 同样易于酶切。实验材料