磷酸酶的催化机制
半胱氨酸依赖的磷酸酶通过形成磷酸－半胱氨酸中间体来催化磷酸酯键的断裂，具体过程如下（以磷酸化的酪氨酸去磷酸化过程为例，参见右图）[1]首先，酶活性位点上的自由的半胱氨酸亲核基团进攻磷酸基团中的磷原子并成键；然后，连接磷酸基团与酪氨酸的P-O键接受位置合适的酸性氨基酸（如天冬氨酸）或水分子所提供的质子，发生质子化，从而形成磷酸－半胱氨酸中间体；这一中间体被另一个水分子所水解，酶的活性位点被释放，可以继续下一个去磷酸化反应。金属磷酸酶的活性位点上结合了两个催化所必需的金属离子。而对于这两个金属离子的性质的研究结果并不一致，因此到目前为止还没有定论。现有的证据只能够表明，这两种金属可以是镁、锰、铁、锌的任意组合，并且两个金属离子之间通过一个氢氧根离子相连。目前认为这一氢氧根离子参与了对磷的亲核攻击。根据所催化的底物特异性，磷酸酶可以被细分为如下五种。类别 例子 底物酪氨酸特异性磷酸酶 PTP1B 磷酸化酪氨酸丝氨酸/苏氨酸特异性磷酸酶......阅读全文
磷酸酶制备实验——膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）
试剂、试剂盒提取缓冲液仪器、耗材微型离心机Superose 6 柱子实验步骤1. 用 1 ml 含有 1% NP-40 去污剂的提取缓冲液提取颗粒部分（按照上面组织/细胞的制备和提取所述方法准备）15 分钟，用一个小匀浆器固定在微型离心管里匀浆或者通过微量移液器吸头尖反复吸入和排出悬浮液以确保沉淀分
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） 实验材料 细胞
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A)膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）实验材料细胞 试剂、试剂盒缓冲盐清洗液
磷酸酶－a－的测定
实验方法原理 4-α-D-葡聚糖：正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1，4-糖苷键：（葡萄糖）n＋Pi →（葡萄糖）n-1＋葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联：葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化：葡萄糖-6-P＋NADP＋ → 葡萄糖酸-6-P
磷酸酶制备实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 缓冲盐清洗液抽提缓冲液实验步骤 一、组织/细胞制备和提取1. 配制下列溶液：(1) 缓冲盐清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 缓冲液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2
碱性磷酸酶的测定实验_细菌碱性磷酸酶
实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl磷酸硝基苯仪器、耗材分光光度计实验步骤实验混合物25℃ 时，于 405 nm 处吸收值降低，ε405＝18.5×103 l/（mol·cm）。
磷酸酶－a－的测定实验
基本方案 实验方法原理 4-α-D-葡聚糖：正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。 酶断裂多糖的α-1，4-糖苷键： （
焦磷酸酶的功能
此酶的功能乃是在脂代谢（包括脂合成与分解）、钙吸收以及骨形成和DNA合成中扮演重要角色，其他生物化学转化也是如此。
磷酸酶－a－的测定实验
实验方法原理4-α-D-葡聚糖：正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1，4-糖苷键：（葡萄糖）n＋Pi →（葡萄糖）n-1＋葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联：葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化：葡萄糖-6-P＋NADP＋ → 葡萄糖酸-6-P＋
焦磷酸酶的功能
此酶的功能乃是在脂代谢（包括脂合成与分解）、钙吸收以及骨形成和DNA合成中扮演重要角色，其他生物化学转化也是如此。
酸性磷酸酶染色
经染色后，细胞浆内可见棕色或棕黑色颗粒或片状沉淀，为阳性反应。 中性粒细胞，单核细胞、T-淋巴细胞、浆细胞、网状细胞、组织细胞（包括吞噬细胞、多毛细胞、组织嗜碱细胞）呈阳性反应。 红细胞系列、巨核细胞及血小板等一般为阴性反应。B-淋巴细胞、非T-非B淋巴细胞亦呈阴性。 【临床意义】 用以
蛋白酪氨酸磷酸酶
蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)是一组酶，它们具有具有磷酸酪氨酸特异性磷酸水解酶活性的催化结构域。PTP能够以正向和负向方式改变受体酪氨酸激酶的活性。PTPs可以使RTKs上激活的磷酸化酪氨酸残基去磷酸化，这实际上导致信号终止。涉及PTP1B的研究表明，PTP1B是一种广为人知的参与细胞周期和细胞因子受体
磷酸酶的催化机制
半胱氨酸依赖的磷酸酶通过形成磷酸－半胱氨酸中间体来催化磷酸酯键的断裂，具体过程如下（以磷酸化的酪氨酸去磷酸化过程为例，参见右图）[1]首先，酶活性位点上的自由的半胱氨酸亲核基团进攻磷酸基团中的磷原子并成键；然后，连接磷酸基团与酪氨酸的P-O键接受位置合适的酸性氨基酸（如天冬氨酸）或水分子所提供的质子
碱性磷酸酶的测定实验_哺乳动物碱性磷酸酶
正磷酸单酯磷酸水解酶（最适碱度）。正磷酸单酯＋H2O → 醇＋Pi这个酶可以从各种渠道得来，如细菌和哺乳动物肠黏膜。每个酶分子有两个 Zn2＋离子键。碱性的磷酸酶频繁地与抗体配位，例如在 Westernblots 中及酶联免疫鉴定（ELISA）中。细菌酶的最适 pH 是 8.0，哺乳动物的要较高一点
DAB显色，碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶显色原理是什么？
DAB显色在辣根过氧化物酶的作用能形成一种灰褐色的终末产物，该产物难溶于醇和其他有机溶剂，DAB的氧化还能引起聚合作用，导致与四氧化锇反应而增加其染色强度和电子密度。
腺苷三磷酸酶的测定
实验方法原理 ATP → ADP＋Pi很多 ATP 酶是与膜组分联系在一起的酶，比如氧化磷酸化或离子转运系统。在细胞匀浆中或膜悬浮物中必须测定它们的不溶性。实验材料 酶样品试剂、试剂盒 TES-TrisATPMgCl2BSA 溶液十二烷基硫酸钠实验步骤 在 37 ℃ 下轻轻地振荡培养 1 ml
碱性磷酸酶生化检验
碱性磷酸酶检验参考范围及临床意义： 英文缩写：ALP； 正常参考值：30-115IU/L ； 医|学教育网临床意义：增高常见于肝癌，肝硬化，阻塞性黄疸，急慢性黄疸型肝炎，骨细胞瘤，骨折及少年儿童。
酸性磷酸酶染色结果
阳性结果为胞质中出现鲜红色颗粒沉淀：①（一）胞质无色。 ②（+）胞质出现淡红色颗粒。③（++）胞质布满鲜红色颗粒。④（+++）胞质充满深红色颗粒。
碱性磷酸酶生化检验
碱性磷酸酶检验参考范围及临床意义： 英文缩写：ALP； 正常参考值：30-115IU/L ； 医|学教育网临床意义：增高常见于肝癌，肝硬化，阻塞性黄疸，急慢性黄疸型肝炎，骨细胞瘤，骨折及少年儿童。
碱性磷酸酶染色实验
实验方法原理细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性（PH9.0－9.6）环境下使作用液中的底物（a一磷酸萘酚钠）水解，产生出a萘酚，然后再与偶氮盐偶联，生成不溶性的耐晒染料（最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同）．试剂、试剂盒磷酸萘酚钠偶氮盐丙二醇实验步骤一、实验试剂：底物作用液的配制：α－磷酸萘酚
关于磷酸酶的功能介绍
分泌型的酸性磷酸酶按照其最终发挥作用的位置又可分为释放到环境介质中的酸性磷酸酶和附着在根表面的酸性磷酸酶。分泌到介质中的酸性磷酸酶相对而言更易于研究，是因为可以通过悬浮细胞培养或者幼苗培养的方法，收集液体培养基中的分泌蛋白。通过生化的方法富集、分离、鉴定出不同的酸性磷酸酶，并进行相关的遗传和生理
碱性磷酸酶的简介
碱性磷酸酶（ALP或AKP）是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。但它不是单一的酶，而是一组同功酶。目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与A
焦磷酸酶的功能介绍
此酶的功能乃是在脂代谢（包括脂合成与分解）、钙吸收以及骨形成和DNA合成中扮演重要角色，其他生物化学转化也是如此。
酸性磷酸酶的简介
酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）广泛存在于体内各组织、细胞和体液中。血液中的酸性磷酸酶的组织来源是前列腺、肝、脾、肾、红细胞、白细胞、血小板，以前列腺含量最为丰富。正常男性血清中酸性磷酸酶1/3～1/2来自于前列腺，女性血清中的酸性磷酸酶主要来自肝脏、红细胞和血小板。酸性磷
碱性磷酸酶标记试剂
BCIP／T是碱性磷酸酶最常使用的呈色底物，碱性磷酸酶标记的试剂应该用真核生物的碱性磷酸酶，因为这种酶容易被EDTA灭活。细菌酶难以终止其活性，易引起显色过度，导致较高背景。 BCIP／T底物在酶结合位点形成强烈的黑紫色沉淀，此反应是一个稳定进行的过程。因此，可设定一个精确的反应对照。可以
酸性磷酸酶的测定
实验方法原理 正磷酸单酯磷酸水解酶（最适酸度）。最适 pH 在 5 左右，描述 σ-磷酸硝基苯的碱性磷酸试验系统可以用于酸性情况。邻磷酸羧基苯＋H2O → 水杨酸＋Pi实验材料 酶样品试剂、试剂盒 乙酸缓冲液σ-磷酸硝基苯仪器、耗材 分光光度计实验步骤 25℃时，持续 3 min0.1 ml 酶样品
碱性磷酸酶的测定
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 甘氨酸-KOH对磷酸硝基苯仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.02 ml 酶样品25 ℃ 时于 405 nm 处吸收值降低，ε405＝18.5×103 l/（mol·cm）。注意事项 其他 试剂：0.1 mol/L 甘氨酸
碱性磷酸酶染色实验
实验方法原理 细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性（PH9.0－9.6）环境下使作用液中的底物（a一磷酸萘酚钠）水解，产生出a萘酚，然后再与偶氮盐偶联，生成不溶性的耐晒染料（最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同）．试剂、试剂盒 磷酸萘酚钠偶氮盐丙二醇实验步骤 一、实验试剂：底物作用液的配制：α－磷
细胞碱性磷酸酶染色
实验概要细胞碱性磷酸酶染色实验原理胚胎干细胞中碱性磷酸酶的活性比较高， 5-溴-4-氯-3吲哚-磷酸盐（BCIP）能被碱性磷酸酶水解，形成一个中间体，这个中间体能与氯化硝基四氮唑蓝，也称氮蓝四唑（NBT）反应生成白色的中间二聚体和NBT-蓝紫色结晶物。通过染色结果可以相对得知碱性磷酸酶的活性，进
碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（APAAP）免疫组化染色技术
实验方法原理APAAP（Alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase technique）技术的基本原理为：抗鼠IgG抗体作为桥梁，将鼠源性识别细胞抗原的第一抗体与鼠源性的抗碱性磷酸酶单克隆抗体-碱性磷酸酶复合物相连接，使之成为Ag，-Ab1－Ab2-