Cell:拉马克的逆袭,朊蛋白跨“界”交流

在酿酒行业中“发酵停滞”是一个令人头疼的老问题,本应当忙着将葡萄糖转变为酒精和二氧化碳的酵母提前罢工,结果剩下的糖都被破坏性的细菌吃掉了。 日前科学家们发现,朊蛋白在这一过程中起到了重要的作用。朊蛋白是一种异常折叠的可复制蛋白,酒里的细菌能通过朊蛋白起作用,在不改变酵母DNA的情况下使酵母发生可遗传的代谢改变。他们认为,这是拉马克式遗传的一个活生生的例子。相关论文于八月二十八日发表在Cell杂志上。 葡萄酒中的玄机 生物学家们知道,在酵母细胞膜中存在着一个古老的生物学回路,在葡萄糖存在的情况下阻止酵母使用其他碳源。这个回路就是葡萄糖阻遏。酿酒酵母中的葡萄糖阻遏特别强,能够有效处理糖类,因此被人们用来进行发酵酿酒。 研究人员发现,细菌能够使酵母细胞膜中发生朊蛋白复制,进而破坏葡萄糖阻遏。朊蛋白的这种干扰,让酵母得以利用葡萄糖以外的碳源,导致发酵显著减慢,直到出现“发酵停滞”。“这一过程,为我们提供了避免发酵停滞的线索,......阅读全文

酵母准备

Yeast DNA PreparationYeast Genomic Preparation  (Gottschling Lab)Rapid method for yeast genomic DNA isolation  Yeast DNA Preparation (rapid glass bead

胞内晶体蛋白基因的酿酒酵母真核表达

实验概要本实验将酿酒酵母作为胞内晶体蛋白的携带和表达宿主,同时,作为可能的营养体喂养海洋线虫P. redivivus将所表达的目的蛋白导入线虫机体,观察线虫的生长、发育、繁殖或是死亡情况,探讨胞内晶体蛋白对昆虫病原线虫以外的线虫是否具有营养作用。为此,首先构建一种重组大肠杆菌,其所携带的重组质粒能够

酵母遗传学方法2:蛋白质的抽提

酵母蛋白质的抽提此法抽提的酵母蛋白适用于SDS凝胶电泳和Western印迹分析。1.从OD600=2的细胞培养物中抽提酵母蛋白质。培养物的一种简单制备方法是将细胞接种到5ml YPD中,过夜培养后获得指数培养物(OD600=0.5~2.0)。2.在水浴上把OD600=2的细胞培养物转到含有2ml的5

酵母表达载体的构建与酵母转化

实验概要本实验介绍了酵母表达载体的构建、酵母转化方法及酵母抗逆实验。主要试剂试剂配制:1 .1 M Tris.Cl(pH 7.5)(100 ml):12.1g Tris碱,加80 ml ddH2O,浓HCl调pH 7.5,定容至100 ml;2. 0.5 M EDTA(pH 8.0) (100 ml

Cell:拉马克的逆袭,朊蛋白跨“界”交流

  在酿酒行业中“发酵停滞”是一个令人头疼的老问题,本应当忙着将葡萄糖转变为酒精和二氧化碳的酵母提前罢工,结果剩下的糖都被破坏性的细菌吃掉了。  日前科学家们发现,朊蛋白在这一过程中起到了重要的作用。朊蛋白是一种异常折叠的可复制蛋白,酒里的细菌能通过朊蛋白起作用,在不改变酵母DNA的情况下使酵母发生

酵母菌培养液是怎么配制的

YPD 或YEPD,:Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基,用于酵母菌的培养配方:1% Yeast Extract(酵母膏) ,2% Peptone(蛋白胨) ,2% Dex

上海生科院发现裂殖酵母端粒结合蛋白Taz1结构

  国际学术期刊Cell Research 于6月19日在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)雷鸣研究组的最新研究成果“Fission yeast telomere-binding protein Taz1 is a functional but

NC:分析酵母高效生产蛋白需要的全局性代谢调控

现代农业的集约化经营以及农药等化学试剂的大量使用,致使蜜蜂等多数授粉昆虫逐渐减少。这些昆虫给作物授粉,如果它们消失,大部分食物也会消失。油棕(Elaeis guineensis)属多年生单子叶植物,原来高度依赖于人工授粉和风媒,授粉效果差,产量低。自上世纪80年代,东南亚国家从非洲引种一种授粉昆虫—

啤酒酵母培养生产单细胞蛋白实验_菌种培养法

实验方法原理单细胞蛋白是通过培养单细胞微生物获得的菌体蛋白质。酵母菌、丝状真菌、微型藻类及非病源细菌等单细胞微生物均可用于生产单细胞蛋白,其中酵母菌是生产单细胞蛋白的主要单细胞微生物。多种原料可用于生产单细胞蛋白,如秸秆、薯干、石油、甲烷等,特别是一些工业废水、废渣可用来生产单细胞蛋白饲料,废物利用

酵母遗传学方法8:酵母活体染色

酵母活体染色1)核DNA和线粒体DNA1.当细胞培养到约107细胞/ml时,离心(5秒)收集细胞,再悬浮在70%乙醇中。2.固定5分钟或5分钟以上,用水洗2次。3.将细胞悬浮在含有50ng/ml的4,6-二脒基-2苯基吲哚的封固剂中。1mg/ml的4,6-二脒基-2苯基吲哚母液可在-20℃下贮存。4

酵母转化实验

实验材料酵母菌株质粒仪器、耗材YPD 平板SC-ura平板产孢子平板实验步骤展开

酵母菌

 提起酵母菌这个名称,也许有人不太熟悉,但实际上人们几乎天天都在享受着酵母菌的好处。因为我们每天吃的面包和馒头就是有酵母菌的参与制成的;我们喝的啤酒,也离不开酵母菌的贡献,酵母菌是人类实践中应用比较早的一类微生物,我国古代劳动人民就利用酵母菌酿酒;酵母菌的细胞里含有丰富的蛋白质和维生素,所以也可以做

酵母的作用

酵母在食品添加剂中作为一种生物膨松剂。发酵是指酵母与糖作用,产生二氧化碳和酒精的过程。烘焙中,酒精受热挥发,而二氧化碳会膨胀.进而起到增大产品体积之效。面团中糖有两个来源:1、根据配方加入的糖。2、小麦淀粉经酶转化而来,此种糖即面粉经酶作用产生的淀粉麦芽糖。酵母是一种微生物,通过产生酶来完成发酵过程

酵母的作用

酵母在食品添加剂中作为一种生物膨松剂。发酵是指酵母与糖作用,产生二氧化碳和酒精的过程。烘焙中,酒精受热挥发,而二氧化碳会膨胀.进而起到增大产品体积之效。面团中糖有两个来源:1、根据配方加入的糖。2、小麦淀粉经酶转化而来,此种糖即面粉经酶作用产生的淀粉麦芽糖。酵母是一种微生物,通过产生酶来完成发酵过程

酵母转化实验

实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材 摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤 1.  在开始实验前2天,接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中,于30℃恒温摇床,培养过夜。 2.  转化的前一天晚上,往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD

研究人员将低碳原料高效转化为糖类衍生物

  继将二氧化碳还原合成葡萄糖和脂肪酸之后,日前,中国科学院深圳先进技术研究院(以下简称深圳先进院)研究团队在人工合成糖类衍生物领域取得又一重要突破。该院合成生物学研究所研究员于涛团队与客座研究员杰·基斯林团队,利用合成生物学和代谢工程手段开发的酵母细胞平台,将二氧化碳衍生的甲醇、乙醇、异丙醇等低碳

酵母遗传学方法9:酵母免疫荧光

酵母免疫荧光1)细胞制备1.培养5ml酵母至对数生长早期(106~107细胞/ml)。2.直接加1/10体积的甲醛到培养基里固定细胞(加入的甲醛终浓度为3.7%,标准母液是37%)。3.细胞在甲醛中培养至少1小时。4.离心收集细胞,用0.1mol/L磷酸钾(pH7.5)洗一次。5.把细胞悬浮在1ml

酿酒酵母培养条件实验_酵母培养物的储存

实验方法原理酵母在琼脂或液体培养基中的理想培养温度是30℃,培养皿平板应倒置放入塑料盒中,于孵箱或培养室内进行培养。当孵育时间超过2或3天时,塑料盒可防止平板上的琼脂干裂。当使用液体培养基培养时,要使用旋转式或往复式摇床,至少每分钟200转,以保证充分通气;进行大体积液体培养时使用锥形瓶,培养基为瓶

酵母遗传学方法10:固定化细胞的肌动蛋白染色

固定化细胞的肌动蛋白染色1.培养细胞到对数生长期(约107细胞/ml)。2.直接取0.1ml甲醛加到含有1ml培养物的离心管中固定细胞(甲醛浓度为3.7%;标准母液是37%)。3.在甲醛中培养细胞30分钟或稍长时间。4.用PBS洗两次,离心5分钟收集细胞。5.用50μl的PBS悬浮细胞,加5个单位的

酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用

摘要  蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新兴的研究领域, 它的主要任务是识别鉴定细胞、组织或机体的全部蛋白质, 并分析蛋白质的功能及其模式。 因此, 揭示蛋白质组中蛋白质间的相互作用关系也是蛋白质组学的重要内容之一。 酵母双杂交技术是用来检测蛋白质间是否相互作用的一个非常有效的手段。 该技术在酵

酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用

     作为后基因组时代出现的新兴研究领域之一, 蛋白质组学(proteomics)正受到越来越多的关注。 蛋白质组学的研究目标是对机体或细胞的所有蛋白质进行鉴定和结构功能分析。 蛋白质组学的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白质分离技术如二维凝胶电泳和高效液相层析, 经典的蛋白质鉴定方法如

酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用

作为后基因组时代出现的新兴研究领域之一, 蛋白质组学(proteomics)正受到越来越多的关注。 蛋白质组学的研究目标是对机体或细胞的所有蛋白质进行鉴定和结构功能分析。 蛋白质组学的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白质分离技术如二维凝胶电泳和高效液相层析, 经典的蛋白质鉴定方法如氨

酵母三杂交系统检测和分析RNA蛋白相互作用

一、引入 RNA 质粒和 cDNA 文库通常首先将 RNA 质粒转化到宿主菌株-L40coat 内,得到包含 RNA 质粒的细胞,再转化一个融合了转录激活区的 cDNA 文库(杂交 RNA 对宿主细胞几乎没有毒性,与用于双杂交筛选的一些杂交蛋白

45种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)-(四)

28. Yeast Extract Peptone (酵母膏、蛋白胨琼脂)   Yeast extract (酵母膏) 1g Multi-peptone(多蛋白胨) 2g   Beef extract (牛肉膏) 1g Glucose (葡萄糖) 10g   Agar (琼脂) 20g Distil

146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基](六)

121、营养肉汤和葡萄糖培养基 (AS 100) 牛肉膏 10.0g 蛋白胨 10.0g 葡萄糖 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 15.0-20.0g 蒸馏水 1000ml pH 7.0122、(Trypticase Soya Agar) 胰蛋白胨 17.0g 大豆胨 3.0g 葡萄糖 2.5

酵母遗传学方法12:酵母菌落PCR方法

酵母菌落PCR方法1.在冰上配制反应混合液:2μl                  10×菌落PCR缓冲液1.2μl                 25mmol/L MgCl20.4μl                 10mmol/L dNTPs10pmol                引物

毕赤酵母表达系统能在酿酒酵母里表达么

不太可能,Invitrogen的商业化毕赤酵母表达系统属于甲醇酵母表达系统,用的是毕赤酵母独有的AOX1启动子,由甲醇诱导;酿酒酵母用的启动子大多用的是GAPDH或Gal启动子等,由葡萄糖和半乳糖诱导。虽然两种菌株有很多基因具有较高的同源性,但不能通用。建议使用毕赤酵母表达系统,酿酒酵母表达量低,诱

缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)

成分  磷酸氢二钾  5g  多胨     7g  葡萄糖     5g  蒸馏水     1000mL  pH7.0 制法  溶化后校正pH,分装试管,每管1mL,121℃高压灭菌15min。 甲基红(MR)试验   自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应

鸟类葡萄糖转运蛋白家族基因的丢失与生化补偿

  研究表明,鸟类丢失了许多在其他脊椎动物中保守的功能基因。人类与小鼠缺失这些功能基因通常会致死或致病,而鸟类并不表现出相应病症。因此,探索鸟类如何应对基因缺失引起的生化与生理功能丧失,对理解鸟类适应进化与人类疾病具有重要意义。目前,此方面有两种假说:一是功能基因缺失与鸟类特化性状有关,如丢失UCP

葡萄糖转运蛋白的缺失使老年痴呆更严重

  近日,来自南加州大学(University Of Southern California)的研究人员通过对小鼠研究发现,一种负责从大脑保护性血脑屏障中运输葡萄糖的蛋白的缺失或会加剧阿尔兹海默氏症的神经变性效应,相关研究刊登于国际杂志Nature Neuroscience上,文章中研究者表示,靶向