RTqPCR需要注意的那些事
rt-qpcr需要注意的那些事，你都了解吗？在rt-qpcr实验中不论是实验小白还是老司机，都会遇到各种不同的实验问题。解决问题不仅要浪费额外的样品和试剂，还要占用大量的时间一遍遍的重复和分析，真是被实验折磨得焦头烂额。那实验过程中应该注意哪些细节呢？小翊精心为大家总结了rt-qpcr实验的注意事项，希望助小伙伴们一臂之力。rt-qpcr实验包括rna提取与质量评估，逆转录和qpcr三大步骤，每个步骤都有很多注意事项，才能做出可靠的数据。下面由小翊给您详细介绍。rna质量评估在rt-qpcr实验中，rna提取完成后，需要对rna的质量进行评估，合格后才可进行后续实验。评估方法有分光光度计，琼脂糖凝胶电泳，agilent 2100分析等，其中最常用的有分光光度计和琼脂糖凝胶电泳法检测。我们需要注意的是这两种方法需要搭配使用，才能完成对rna浓度、纯度和完整度的检测分析，以保证rna的质量。分光光度计检测法分光光度计主要用于测定rn......阅读全文
RTqPCR的原理
提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用0ligo (dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR 使测的灵敏性提高了几个数量级，使- - 些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录
RTqPCR的原理
提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用0ligo (dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR 使测的灵敏性提高了几个数量级，使- - 些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录
RTqPCR需要注意的那些事
rt-qpcr需要注意的那些事，你都了解吗？在rt-qpcr实验中不论是实验小白还是老司机，都会遇到各种不同的实验问题。解决问题不仅要浪费额外的样品和试剂，还要占用大量的时间一遍遍的重复和分析，真是被实验折磨得焦头烂额。那实验过程中应该注意哪些细节呢？小翊精心为大家总结了rt-qpcr实验的注意事项
HBV－RNA检测技术盘点——RTqPCR－VS－RNA捕获探针法
慢性乙型肝炎影响着世界上超过2.4亿人口[1]，难以治愈已成为公认的事实。大多研究认为难以治愈与肝细胞核内HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）半衰期过长且难以清除有关。[2]因此，肝内检测cccDNA对评估抗病毒治疗疗效和治疗终点具有重要意义。但直接检测cccDNA十分困难，通常需要进行肝组织活
一文掌握MIQE指南的RTqPCR发表数据的实用方法
考虑到mRNA转录的高度动态特性以及样品处理和下游处理步骤中引入的潜在变量，RT-qPCR工作流程的每个步骤的标准化方法对于可靠和可重现的结果至关重要。MIQE为这种方法提供了一份包含85个参数的清单，以确保质量结果符合任何期刊的接受标准。接下来，小编将为大家详细介绍如何应用MIQE指南来建立一个可
RTqPCR常用的SYBR@Green－I双链DNA结合染料的应用
随着新冠病毒肆虐全球，聊病毒是个敏感话题。今天我们就从这个敏感话题着手，好好聊一聊。 病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA）。我们现在提起来就咬牙切齿的的新冠病毒（COVID-19），就是一种RNA病毒。当然除了COVID-19，我们常听到的其他臭
JCM：4种埃博拉病毒检测的性能评估
最新发表的一项研究评估了美国FDA紧急授权的4种埃博拉病毒检测。这项研究由美国疾控中心、埃默里大学医学院、内布拉斯加大学医疗中心等机构的研究人员开展，发表在《Journal of Clinical Microbiology》杂志上。 他们评估的检测包括：美国CDC的NP2和VP40 RT-qP
Science子刊：一种检测新冠病毒RNA的双色RTLAMP检测方法
新型冠状病毒SARS-CoV-2导致2019年冠状病毒病（COVID-19），如今正在全球肆虐。基于此，人类面临着一项重大的公共卫生挑战。快速检测现有的SARS-CoV-2感染和评估病毒传播至关重要。 基于逆转录环介导等温扩增（reverse transcription loop-mediat
无需提取－直接检测——Real－Time－PCR
针对客户对实验快速、高效率的需求，Takara不断努力探索。2019年6月，Takara推出无需从粪便、血液、细胞等样本中提取RNA，即可直接检测样本中目的基因的One Step Real Time PCR Premix试剂【PrimeDirect™ Probe RT-qPCR Mix】（Cod
数字PCR技术更准确检测新冠病毒
对于新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的检测，实时定量PCR一直是金标准。不过对于某些患者，qPCR的结果似乎每天都在变化，而且有不少假阴性。近期的研究表明，ddPCR检测能够减少假阴性结果，而Bio-Rad Laboratories公司也利用其微滴式数字PCR系统开发出新型冠状病毒的检测产品
“条形码”序列测序（BRBseq）廉价且高效
RNA测序是一种通过观察基因表达来分析整个基因组的技术。如今，这种全基因组表达分析是基因组研究的标准工具，因为它们依赖于高通量技术，而这些技术本身已经变得广泛可用。 尽管如此，RNA测序仍然是昂贵和费时的，因为它首先需要昂贵的准备一个完整的基因组库——由细胞RNA生成的DNA池——同时数据本身
生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功...（四）
FFPET 样本特异性RealTime ready qPCR检测潜在生物标志物假设检验我们使用的第一套临床样本来自于各种用于人类研究的福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）组织。肿瘤来源的 FFPE 组织是临床试验或生物标志物研究中，治疗复合物研发最具有相关性的样本材料。使用 High Pure
DSF群体淬灭及调控机制研究获新进展
近日，华南农业大学群体微生物研究中心教授张炼辉团队在DSF（diffusible signal factor）群体淬灭及调控机制方面取得新进展。他们报道了一个关键的调控因子RdmA及其调控的代谢基因簇dmgA-H在DSF群体淬灭过程中的重要作用。相关研究发表于mBio。博士后研究员王惠杉为该论文
RTPCR、QPCR、Realtime－PCR、realtime－RTPCR你真的区分的开吗？
多少同学能将 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR区分开？有多少同学还在犯晕？今儿这贴，师兄就带你区分区分，拨开那扇 PCR 迷雾。什么是 RT-PCR？RT-PCR就是逆转录 PCR（reverse transcription PCR）或者称反转录PCR(reverse transcr
荧光定量PCR(qPCR)内参的选择对基因表达差异分析结果的...
荧光定量PCR(qPCR)内参的选择对基因表达差异分析结果的影响与应用实时荧光定量PCR技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。由于其精准度好、灵敏度高，在分子生物学研究和医学研究等方面得到了广泛的应用，尤其是在基因表达差异分析方面。基因表达差异分析一般是比较不同
美国FDA发布冷冻浆果中有害病毒抽样检测结果
据美国食品药品监督管理局（FDA）消息，2019年9月26日，美国FDA发布关于对冷冻浆果进行有害病毒抽样检测的报告。 截至2019年6月30日，美国食品和药物管理局已经检测了253份国内冷冻浆果样品和320份进口冷冻浆果样品，使用定量即时聚合酶链锁反应（RT-qPCR）方法在3个样品中
实时定量PCR数据分析
所谓的实时荧光定量 PCR 就是通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行，PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这
miRNA的qPCR检测
测序技术的引入促使miRNA研究领域进入快速发展阶段，然而qPCR仍是验证测序数据的重要标准。本文将为您介绍使用qPCR进行miRNA分析的基本要点，希望能帮助新人快速入门。什么是miRNA？miRNA是一类小的非编码RNA，能够与RNA诱导沉默复合物（RISC）结合，通过作用于mRNA，进而介导转
20分钟出核酸结果！985高校，再创新方法
近日，武汉大学团队研究出一种新的核酸检测方法，灵敏度高、特异性高、操作便捷，仅需20分钟便能完成检测。 在新冠病毒及变异毒株不断传播的背景下，快速筛查对于病源检测、控制疫情的传播十分重要。RT-qPCR是目前新冠病毒的检测金标准，该方法特异性强、灵敏度高, 但由于其依赖于实验室专业仪器的使用和
23分钟！比同类检测技术更快的新冠病毒检测技术
30多年来，聚合酶链反应(PCR)一直是分子诊断测试的金标准，用于检测来自病毒或人类DNA等遗传物质。但是，包括逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)在内的PCR大多是在大型的中央实验室进行的，而不是在即时护理(POC)环境中进行的，因为其仪器笨重、昂贵、需要很长时间得出结果，并且需要训练有素的技术人员
开门红！珀金埃尔默预计第一季度营收将大幅增长98％
分析测试百科网讯 近日，珀金埃尔默预计今年第一季度营收将比去年同期的6.524亿美元增长98％，至约12.9亿美元。 这家总部位于马萨诸塞州沃尔瑟姆的公司表示，本季度的有机收入预计将同比增长90％。此次增长是由整个公司的“广泛动力”驱动的，截至4月4日的三个月，与COVID-19相关的收入就贡
实现新冠病毒单拷贝检测的重点在Taq酶单克隆抗体的性能
假如您从事新冠核酸检测体系的开发和评估，想问问您是否遇到过以下问题：? 非特异性扩增、引物二聚体？? 灵敏度上不去，检出率低？? Taq酶性能不稳定，qPCR线性关系差？遇到这些问题莫要慌，翊圣Hieff? Taq酶单克隆抗体来救驾！ Hieff? Taq酶单克隆抗体高效封闭Taq酶的DNA聚合酶活
最新研究：新冠病毒能在92˚C高温下生存－但还有个难题...
法国科学家团队的最新研究发现：新冠病毒可以在高温环境下生存，在接近沸点的92˚C高温下，要15分钟才能完全灭活。之前常用病毒灭活方案：60˚C--1小时，56˚C--30分钟 均不能完全杀死新冠病毒。 之前，有研究表明，在高温高湿的环境中，病毒的传播速度会大大减弱。很多人甚至寄希望于夏天的高温
新型冠状病毒病原学检测假阴性的产生原因及高效检测...
新型冠状病毒病原学检测假阴性的产生原因及高效检测方法分析自2020年开始，新型冠状病毒肺炎的疫情就一直牵动着亿万人的心。截至2月11日8:29，全国已确诊病例累计42708例，疑似21675例，疫情防控形势依然严峻。 新型冠状病毒传播方式多样，除了经呼吸道飞沫和接触传播的主要途径外，目前已有报道病毒
实时定量PCR技术简介
技术方法简介 所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行，PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循
美国科学家发布诱导多能干细胞成熟性的标准研究指南
研究人员开发了一个指南，帮助实验室标准化从干细胞中产生成熟的类肝细胞(hepatic-like cells，HPCs)的方法，并将HPCs的基因表达与实际人体肝脏组织进行比较。这种中度的高通量的方案可以相对快速地评估干细胞分化的有效性，并有助于指导再生医学应用中分化条件的优化。该操作指南及其影响
烟台海岸带所在海洋微生物还原Sb(V)研究中取得进展
环境中的锑（Sb）主要以三价和五价两种形式存在，Sb的存在形态影响其毒性及迁移性。研究环境中Sb的形态转化，有利于揭示Sb的环境地球化学循环规律和环境风险。理论上来说，Sb(V) 和Sb(III) 各自稳定存在于好氧和厌氧环境中。但是，在自然环境中，Sb(V) 和Sb(III) 也分别能在缺氧和
QIAGEN囊泡exosome－RNA的解决方案
exosome是直径约为30-150nm的小囊泡，在30年前被人们所发现。exosome天然存在于所有体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，且其蛋白、RNA和脂肪成分特异，早期的研究认为，exosome执行蛋白运输功能，特异靶定受体细胞，交换蛋白和脂类或引发下游信号事件。直到2007年，研究人员发现e
免疫治疗新靶点TNFR2（一）
在这个草长莺飞的春天，是否记得那句“要想富，多栽树”的宣传标语？今天的植树节，百奥赛图知识拓展课堂携智慧树如期而至，与您携手探寻TNFR2。 基本信息 基因功能简介 TNFRSF1B（TNF receptor superfamily member 1b） 为TNF受体超家族成员, 也称为TN
罗氏FFPET组织样本抽提RNA试剂盒实验结果分析
High Pure FFPET RNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理，在柱上直接进行高效DNase消化，在整合的实验流程中方便地去除残留DNA。图1：抽提获得宽泛的RNA片段范围，FFPET RNA抽提物片段长度范围在100-4000bp 使用3中不同的方法从乳腺癌组织的5um