酿酒酵母培养基制备实验—检测酵母中β半乳糖苷酶活性
试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材磁力搅拌器锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的螺旋盖瓶或锥形瓶中将下面的成分溶于水中，置于搅拌器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g，葡萄糖 12.0 g，SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物 0.4 g，蒸馏水 565.0 ml，琼脂 10.0 g。2. 将培养基高压灭菌并冷却到 55℃。3. 小心加入 35 ml 灭菌的 1.0 mol/L pH 为 7.0 的磷酸钾缓冲液，在磁力搅拌器上充分混匀，避免产生气泡。4. 加 1.0 ml 60 mg/ml 用 DMF 溶解的 X-gal，充分混匀，倒入培养皿中铺板。展开......阅读全文
人抗酿酒酵母抗体（ASCA）elisa试剂盒分析检测说明
检测范围： 48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本抗酿酒酵母抗体（ASCA）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人抗酿酒酵母抗体（ASCA）水平。用纯化的人抗酿酒酵母抗体（ASCA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往
酵母菌培养基配方
培养酵母菌所用的培养基和霉菌所用的培养基是一样的，它们都属于真菌。常用的有PDA培养基、孟加拉红培养基、高盐察氏培养基、酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂等等。培养7天后如果菌落长毛的就是霉菌，没有毛的就是酵母菌，形态可能会不一样，因为酵母菌不止一种，不同的酵母菌长出来的形态会不一样。酵母菌的适宜培养基是米曲培
酵母培养基和相关试剂
Yeast Hartwell's Complete (HC) Media (Gottschling Lab) Yeast Complete Media Yeast Media (PMCI) Yeast Media, Solutions and Stocks (Donis Keller
酵母菌细胞密度检测实验
实验材料酵母菌仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 在培养基中细胞的密度可以通过分光光度计测定的菌液在600 nm 波长的光密度OD600值来放映。2. 要得到可靠的测量结果，菌液最好稀释到OD600值1以下，在这个范围内，毎0.1OD600相对于约3×105细胞/ml。如此推算，1OD600
关于重组乙型肝炎疫苗酿酒酵母的介绍
1982年Valenzuela首先在酿酒酵母中成功表达乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg），1986年9月美国默克公司的重级酵母乙肝疫苗首次取得ZL并得到美国FDA的批准。1989年7月比利时史克比成公司的另一重组酵母乙肝炎疫苗也取得ZL。重组酵母乙肝疫苗的生产厂家除默克公司，史克公司外，我国北京
微生物所揭示酿酒酵母的竞争智慧
葡萄糖抑制(glucose repression)是存在于大多数微生物中的一个中心调控系统，借此抑制其他碳源的代谢途径，保证以最经济和高效的方式优先利用能效最高的碳源葡萄糖。葡萄糖抑制机制在酵母菌的不同谱系中独立进化并逐渐加强，最终在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中
微生物所揭示酿酒酵母的竞争智慧
葡萄糖抑制(glucose repression)是存在于大多数微生物中的一个中心调控系统，借此抑制其他碳源的代谢途径，保证以最经济和高效的方式优先利用能效最高的碳源葡萄糖。葡萄糖抑制机制在酵母菌的不同谱系中独立进化并逐渐加强，最终在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中
感受态制备：酵母感受态细胞制备实验
酵母感受态细胞制备可以：（1）用于建立酵母转化体系；（2）用于酵母表达系统构建；（3）用于酵母其他分子生物学研究。实验方法实验材料酿酒酵母 试剂、试剂盒YPDA液体培养基 蒸馏水 甘油 二甲基亚砜 仪器、耗材培养皿 离心机 离心管 冰箱 实验步骤一、试剂与耗材 1. 试剂 细菌用-酵母提取物（Fi
酵母原生质体制备
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材 摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤 将酵母菌接种于YPD培养基（100 ml 到20 L），剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期（OD600≈1~5）。培养物在预称重的离心瓶中于4℃， 1 500 g 离
2.5.1－酵母总RNA的制备
试剂、试剂盒AE 缓冲液。 苯酚10%SDS酚氯仿 无水乙醇乙醇. 3mol L 乙酸钠无 RNase 的水仪器、耗材髙速离心机实验步骤一 材料与设备1)AE 缓冲液：50 mmol/L 乙酸钠 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 缓冲液预先平衡）。3)10%SDS4)
酵母细胞核制备
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 细胞核缓冲液Ficoll缓冲液仪器、耗材 匀浆机实验步骤 1. 将酵母菌接种于YPD培养基（100 ml 到20 L），剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期（OD600≈1~5）。培养物在预称重的离心瓶中于4℃， 1 500 g 离心5 min。 2. 确定酵母细
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_转化含有质粒菌株
实验材料细胞试剂、试剂盒YPAD仪器、耗材培养瓶SC 减样选择培养基实验步骤1. 在一个 250 ml 的培养瓶中，接种该菌株到 25 ml 相应的 SC 减样选择培养基中，200 r/min 培养过夜。2. 检测每毫升细胞数，按 2.5X108 个细胞计算所需培养物体积。3. 将该体积的培养物加到
酵母功能互补实验
实验概要本实验将在构建了大蒜重金属抗性基因表达载体并转入大肠杆菌DH5α的基础上，选择鉴定准确的质粒转化酵母细胞，对转化子进行了PCR鉴定和RT-PCR分析，及重金属抗性实验。主要试剂YPD培养基，醋酸锂，PEG(50%)，乙醇，少量酵母菌总RNA快速抽提试剂盒主要设备摇床，离心机，水浴锅，PCR仪
酵母双杂交实验
实验概要本实验构建了Bait载体和prey载体，酵母双杂交后，应用CPRG法定量测试了蛋白质相互作用。实验步骤1. Bait载体的构建将高保真PCR扩增的OsCCTlb(引物为OsCCT1bEcoRI5'和OsCCTlbXhoI3')和OsCNTlb(引物为OsCNTlb Eco
酵母细胞中质粒的加工实验
定位突变质粒缺口修复技术和等位基因修复技术实验材料酵母菌株试剂、试剂盒带选择标记的YRp或YCp质粒适当的限制性内切核酸酶相应选择标记突变的酵母菌质粒标记的选择培养基平板仪器、耗材培养皿实验步骤1）将目的基因亚克隆到带恰当的选择标记的YRp或YCp质粒上。2) 在基因内部的两个限制酶酶切位点上切割以
酵母细胞中质粒的加工实验
实验方法原理 在非选择性生长条件下，大多数大肠杆菌/酵母菌穿梭载体的丢失频率大约1%。 在本方案中含质粒的酵母菌株接种于非选择性平板上以分离质粒并可得到单菌落。然后通过影印到选择性平板上可以鉴别丢失了质粒的菌株实验材料 含质粒的酵母菌株试剂、试剂盒 YPD或其他非选择性液体培养基及平板CM缺失成分
酵母细胞中质粒的加工实验——从酵母细胞中分离质粒
利用一个假定的突变通过互补作用克隆酵母菌基因的一般方法。该突变为cdc101-1，它对酵母菌的生长来说既是隐性的又是温度敏感的。它使酵母可以很正常地在30°C生长，而不能在37°C形成菌落。如果用一个酵母菌基因组文库转化cdc101-1菌株，通过分离温度不敏感菌落，那么就可能分离到一个可以互补这种突
酵母菌RNA制备实验—玻璃珠法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 培养并收集酵母菌细胞，冷冻细胞沉淀。2. 用300 μl RNA缓冲液中重悬细胞沉淀。 3. 加1体积冷的酸洗玻璃珠（体积与约200 μl 水相等）、300 μl 的用RNA缓冲液平衡的25：24 ：1酚/
酵母细胞核制备实验——差速离心法
细胞核（nucleus）是细胞中最大、最重要的细胞器（初中老教材认为细胞核不是细胞器，大学细胞生物学则认为是细胞器，这里以大学教材为准），它是由核膜（nuclear membrane）、核骨架（nuclear scaffold）、核仁(nucleolus) 几部分组成。实验材料酵母菌试剂、试剂盒细胞
酵母感受态细胞制备实验——化学法
酵母感受态细胞制备可应用于：（1）建立酵母转化体系；（2）酵母表达系统构建；（3）酵母其他分子生物学研究。实验方法原理感受态是受体最容易接受外源DNA片段并实现转化的一种生理状态，用对应化学物质处理细胞后，细胞逐渐形成感受态细胞并进行转化。化学法简单，快速，稳定，重复性好，广泛用于外源基因的转化。实
重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）的不良反应
基于国内已完成的1105例16岁以上无应答者的临床试验结果汇总分析（详见【临床试验】），60μg（445例）、30μg（439例）和10μg（221例）疫苗组不良反应总体发生率分别为33.03%、31.21%、29.86%。所观察到的不良反应均以1级不良反应为主，未发生3级以上不良反应，所有不良
酿酒酵母在畜牧养殖业上的应用
活菌可以作为益生菌或发酵菌剂使用。酿酒酵母属于兼性厌氧菌，在进入动物胃肠道后，可以消耗胃肠道的氧气，造成厌氧环境，从而促进有益菌群的繁殖，改善动物消化道微生态平衡。体外试验研究表明，酿酒酵母还可以有效吸附肠道病原菌（鼠伤寒沙门氏菌）。布拉迪酵母是属于酵母属、酿酒酵母亚种的一种酵母，大部分酿酒酵母
酿酒酵母胞内代谢通量调控机制方面获进展
细胞内的代谢通量受胞内基因表达、转录调控、蛋白修饰、别构效应等调控体系共同作用。然而，目前关于细胞内代谢通量的详细调控机制存在较多未知，例如代谢通量的变化到底在多大程度上依赖基因表达以及有多大程度通过酶活力调控。酿酒酵母的Crabtree效应是重要的代谢调控表型，但该表型下各种调控因子对胞内代谢
重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）的注意事项
（1）以下情况者慎用：家族和个人有惊厥史者、患慢性疾病者、有癫痫史者、过敏体质者。 （2）对于处于乙型肝炎潜伏期的患者尚不明确接种本品能否预防乙型肝炎；本品不推荐用于暴露后的免疫预防（如针刺损伤等）。 （3）由于皮内注射和臀部肌肉注射不能达到最佳免疫效果， 应避免这些途径接种；但因为肌肉注射
酵母感受态细胞制备实验——试剂盒制备法
实验方法原理酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。实验材料酵母菌试剂、试剂盒YPD培养基酵母化学感受态细胞制备试剂盒仪器、耗材离心管冰箱冷冻管保温冰盒实验步骤一、挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落（4℃放置不超过3周的也可以），接
染色法分析高温对酵母细胞的影响
酵母细胞在高温的刺激下，有些酵母不能忍受高温环境，而早衰，或者死亡。本文用美兰染色法观察两种酿酒酵母对于高温的不耐受性。1 菌种酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）Y14（LYCD制备菌株），从茅台酒生产酒醅中分离，最佳生长温度为35-38℃，最高可达42℃；酿酒酵母（
霉菌和酵母检测怎么鉴定？标准方法与快检有哪些不同？
霉菌和酵母的检测是我们食品微生物检测的一个重要项目。霉菌是丝状真菌的俗称，绒毛状、絮状或蛛网状的真菌菌落；没有菌丝的称之为酵母。这并非分类学名词。 相对于细菌来说，霉菌和酵母生长缓慢，竞争能力较弱，故培养霉菌和酵母时要注意形成抑制细菌的环境。 下面是我们在检测霉菌酵母时遇到的几个问题
概述乳酸克鲁维酵母的生理特征
乳酸克鲁维酵母的细胞形态一般为球形或橄揽形，与酿酒酵母的细胞形态有些相似。虽然茵株间的自然习性有一定差别，但是乳酸克鲁维酵母的绝大多数菌株都分离自主要碳源为乳搪的牛奶制品中。这些菌株在以乳糖为碳源的培养基中生长良好而酿酒酵母则不能在这样的培养基中生长，因为酿酒酵母中缺少乳糖利用的相关基因。另外与
霉菌和酵母检测怎么鉴定？标准方法与快检有哪些不同？
下面是我们在检测霉菌酵母时遇到的几个问题： 1、计数前的鉴定 计数霉菌酵母结果前是需要鉴定菌落是否是真菌的。 霉菌的形态相对比较明显，不容易被混淆。但是对于酵母来说，培养基里抑制细菌的成分，例如氯霉素在此的剂量不足以抑制所有的细菌种类。部分细菌会在孟加拉红培养基上生长的也很好，如下
酵母菌RNA制备实验—热酸性酚抽提法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材离心管离心机摇床实验步骤1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50 ml，离心管，于4℃，1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1 ml 冰冷的水重悬，转