动物染色体标本的制备_秋水仙素阻断细胞分裂法

实验材料蟾蜍试剂、试剂盒秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋酸 低渗液 PH6.8 磷酸缓冲液 Giemsa 染色液仪器、耗材显微镜 培养皿 手术剪 镊子 冷冻载片 滴管实验用品器具:显微镜、培养皿、手术剪、镊子、冷冻载片、滴管试剂:秋水仙素、生理盐水、甲醇、冰醋酸、低渗液、PH6.8 磷酸缓冲液、Giemsa 染色液材料:蟾蜍实验方法步骤1. 前处理 实验前3-4 小时,按每克体重3ug 剂量给蟾蜍的腹腔注射秋水仙素;2. 取材 打开蟾蜍腹腔,截取1-2cm 长的一段小肠(以十二直肠为好),用见到剖开成片状,在生理盐水中洗净;3. 低渗 将洗净的小肠投入到盛有5mL 低渗液的小试管中,在37℃水浴下处理30 分钟以上;4. 固定 弃去低渗液,加入新配制的甲醇(3):冰乙酸(1)固定液约5ml,静止固定40分钟左右;5. 解离 弃去固定液,加入约2ml60%的冰乙酸,轻轻摇动,使解离的细胞充分散开,5 分钟后弃去小肠,即得细胞悬浮液;......阅读全文

实验动物组织标本的制备实验

实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2

应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本

 一、原理    两个或两个以上的同种或不同种细胞可以在诱导物的作用下融合成一个细胞。    七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前

应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本

实验概要通过细胞融合技术,初步了解染色体提前凝集标本制备原理、方法及间期细胞三种时相的提前凝集染色体特点。实验原理在自然条件下或用人工的方法(物理、化学或生物)将两个或两个以上的同种或不同种细胞融合成一个细胞的过程称为细胞融合。七十年代初,由于发现M  期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异

染色体提前凝集标本制备实验

实验方法原理七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyConde

染色体提前凝集标本制备实验

基本实验实验方法原理七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyC

动物骨髓细胞染色体的制备与观察1

[实验目的]1. 通过青蛙或小白鼠骨髓细胞染色体的制备,初步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体的方法。2. 熟悉染色体的形态、种类及青蛙、小白鼠等动物染色体的数目或类别。[实验原理]骨髓细胞是具有旺盛分裂能力的细胞,从这些分裂细胞中,可观察到处于分裂中期的染色体,能对一种动物染色体的形态特征、数目进行

动物骨髓细胞染色体的制备与观察2

二、染色体制备各种动物骨髓细胞染色体的制备方法基本都采用低渗法,现以青蛙为例,说明其制备的过程。1. 取健康小鼠一只,按每10g体重由腹腔注入含量为0.02% 的秋水仙素0.3ml(此步在实验前12~24小时完成,哺乳动物在实验前2~4小时完成)。2. 将青蛙处死,迅速取出后腿长骨,包括股骨和胫骨,

正常细胞常规核型的标本制备_人体染色体常规核型分析

实验材料染色体仪器、耗材显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤一、人体染色体的观察1.  取制备较好的染色体玻片标本,先在低倍镜下观察。2.  在标本中选择一个染色体之间分散较好,互不重叠的中期分裂相,置于视野中央,然后换油镜仔细观察。3.  每个染色体都含有两条染色单体,两单体连接处为着丝粒。4.  计数时

实验动物组织标本的制备实验_解剖法

通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2 )保温(37 ℃)的营养液中,并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔

染色体CBG标本制备实验——基本方案

实验方法原理异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的,因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近,或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C显带技术呈现,故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA,但在C带区有很强抗性,仍保留大部分

染色体的标本制作及其组型实验

在真核生物中, 染色体的数量和形态具有物种的特异性一直可以作为此物种分类的基本依据之一。染色体作为遗传物质-DNA的载体, 对生物的遗传、变异、进化和个体发生, 以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。每一个物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。将体细胞核中全部染

人体外周血淋巴细胞培养及染色体制片

实验概要学习和掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法。实验原理人体的1ml 外周血中一般含有约1-3×106个小淋巴细胞,通常它们都处于间期的GO和G1期。在培养条件下给予药物刺激时,经过53-72小时可在培养物中获得大量的有丝分裂细胞,供染色体标本制备和分析之用。这种外周血培养方法是在1

人癌细胞染色体制备及观察

一、实验目的学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。二、实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括:1.秋水仙素的预处理:秋水仙素又叫秋水仙碱,它是

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析             实验方法原理 采用微量全血培养人体外

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析             实验方法原理 采用微量全血培养人体外

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋

人癌细胞染色体制备

实验概要本实验介绍了人癌细胞染色体制备的基本原理及操作步骤。有助于学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括

绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验

实验材料 绒毛样本试剂、试剂盒 HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺 枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材 无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气

绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验

实验材料绒毛样本试剂、试剂盒HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气增湿器空

小白鼠骨髓细胞染色体制片技术

实验概要1、掌握哺乳动物骨髓细胞染色体玻片标本的制备方法。 2、观察动物染色体的形态特征,统计小白鼠体细胞中染色体数目。实验原理制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 制备动物染色体标本原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬液中

动物细胞的染色体工程

又称为染色体转导,或染色体介导的基因的转移。染色体转导术,目前有两类,其一,称为微细胞转移术。应用低浓度秋水仙素长时间处理可使细胞微核化,经去核处理后,可得到只含相当于几个乃至一个染色体的微细胞。微细胞被导入完整细胞以后仍显示RNA合成,因而微核编码的基因信息可望在微细胞异核体内表达出来。如小鼠的微

流式细胞仪标本的制备

流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细

流式细胞仪标本的制备

流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细

流式细胞仪标本的制备

流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。

流式细胞仪标本的制备

流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细

小鼠骨髓细胞染色体标本制作

实验概要        通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。实验原理        由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许

人淋巴细胞染色体标本制作

实验概要动物细胞染色体标本的制作方法,认识染色体形态实验原理染色体是细胞遗传的研究对象,分析认识眼行为对于认识遗传物质的传递、复制、畸变等都有重要的意义。 获得染色体的方法很多,目前对于哺乳动物比较常用的方法是外周血细胞培养法,就是将外周血接种在适当的培养基中进行培育,人类外周血细胞是终未分化细胞,

小鼠骨髓细胞染色体标本制作

实验方法原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 秋水仙素姬姆萨染液固定液低渗液生理盐

小鼠骨髓细胞染色体标本制作与观察

实验目的掌握动物骨髓染色体标本制备基本过程,了解操作步骤的原理实验原理小鼠骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验原理制备方法包括以

正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养

正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的