动物染色体标本的制备_秋水仙素阻断细胞分裂法
实验材料蟾蜍试剂、试剂盒秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋酸 低渗液 PH6.8 磷酸缓冲液 Giemsa 染色液仪器、耗材显微镜 培养皿 手术剪 镊子 冷冻载片 滴管实验用品器具：显微镜、培养皿、手术剪、镊子、冷冻载片、滴管试剂：秋水仙素、生理盐水、甲醇、冰醋酸、低渗液、PH6.8 磷酸缓冲液、Giemsa 染色液材料：蟾蜍实验方法步骤1. 前处理 实验前3－4 小时，按每克体重3ug 剂量给蟾蜍的腹腔注射秋水仙素；2. 取材 打开蟾蜍腹腔，截取1－2cm 长的一段小肠（以十二直肠为好），用见到剖开成片状，在生理盐水中洗净；3. 低渗 将洗净的小肠投入到盛有5mL 低渗液的小试管中，在37℃水浴下处理30 分钟以上；4. 固定 弃去低渗液，加入新配制的甲醇（3）：冰乙酸（1）固定液约5ml，静止固定40分钟左右；5. 解离 弃去固定液，加入约2ml60％的冰乙酸，轻轻摇动，使解离的细胞充分散开，5 分钟后弃去小肠，即得细胞悬浮液；......阅读全文
小鼠骨髓细胞染色体标本制作[细胞遗传]
一、实验目的和要求 通过这一实验，要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法，并对动物染色体进行观察。 二、实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
一、实验目的： 1、掌屋植物染色体标本的去壁低渗方法 2、了解中期染色体的形态结构 二、实验原理： 植物细胞有很坚实的细胞壁，染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上，可通过纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁；用低渗溶液处理可以提高染色体的分散程度。陈瑞阳等（1979，19
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
实验材料黑麦(Secalecereale)、大麦(Hordeumvulgare)种子或洋葱(Alliumcepa)鳞茎试剂、试剂盒对二氯苯饱和溶液甲醇冰醋酸70%酒精纤维素酶果胶酶Giemsa原液磷酸缓冲液(pH6.8～7.2)KCl仪器、耗材恒温培养箱显微镜载玻片酒精灯实验步骤1.取材:先将种子浸
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验
实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程，是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份，然后分配到子细胞中，因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、早期、中
骨骼细胞染色体制备方法
1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度
染色体实验技术分析
染色体分裂指数低：患者处于非常时期（感染期、放、化疗期）： 培养基营养成份不良； 培养基PH偏低或偏高； PHA过量或不足； 小牛血清质量不高； 小牛血清数量偏低或过高； 培养温度
流式细胞仪标本制备1
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行精确分类，还能分离纯化某一群或亚群细
小鼠骨髓的染色体制备
实验概要本实验介绍了制备小鼠骨髓染色体的原理及操作流程。实验原理小鼠骨髓细胞有高度的分裂活性，并且数量非常多，因此不必进行体外培养，可直接观察到分裂期细胞。处于分裂期的细胞经秋水仙素处理，阻断纺锤丝的形成，使细胞分裂停止于中期，此时染色体达到最大收缩，具有典型的形态。低渗处理使细胞破裂，便于染色体分
胸腹水细胞染色体制备方法
在恶性肿瘤的胸腹水中有大量的分裂期细胞，其中多以非整倍体细胞存在，并含有各种标记染色体。 1、 实验材料 2.5%碘精、75%酒精、无菌棉球、镊子20-22号无菌腰穿包、50ml离心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片等。 2、 操作过程（1）采样：选择有胸或腹水患者，在无菌条件下，轻腹
淋巴细胞染色体制备方法
1. 向含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加全血0.5ml，盖紧培养瓶，充分混均；2. 水平培养72 h(37℃)；3. 加入20ul 秋水溶液，培养2 h；4. 离心5 min（2000 rpm）；5. 去除上清液，保留0.5ml的细胞；6. 重新充分混悬细胞1；7. 加入5ml 低渗溶液(KCl
人外周血淋巴细胞的培养及染色体制片实验
实验方法原理外周血是制备动物染色体标本的重要材料之一,但通常情况下哺乳动物的外周血中是没有分裂相的,其他动物如两栖类外周血中也只是偶尔能见到分裂相。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期,在人工离体培养的培养基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴细胞受刺激
人外周血淋巴细胞的培养及染色体制片实验
实验方法原理 外周血是制备动物染色体标本的重要材料之一,但通常情况下哺乳动物的外周血中是没有分裂相的,其他动物如两栖类外周血中也只是偶尔能见到分裂相。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期,在人工离体培养的培养基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴细胞受刺
怎么制作动物标本
以昆虫标本为例：1、把昆虫整体用热水浸泡还软（不用担心变色等问题，放心大胆的泡吧），待昆虫身体关节变软后取出，一般是5-30分钟，可中途取出虫子试验虫腿关节软硬程度，根据软硬程度自行提前或延长浸泡时间。彻底还软后，用吸水纸吸干虫子表面的水分。（备注，带密毛或鳞片的昆虫不适合浸泡）2、取出昆虫针，扎在
如何制作动物标本
[摘 要]动物标本制作对教学、科研、文化生活、资源保藏和利用都具有非常重要的意义。本文介绍了动物标本的分类，详细阐述了骨骼标本、剥制标本、铸型标本、干制标本、透明标本等制作方法。[关键词]动物标本；制作；骨骼标本；铸型标本；透明标本[中图分类号]Q95-34 [文献标识码]A“标本”在古希腊语中意为
染色体－G－显带核型分析
核型分析简介染色体是细胞分裂期高度凝集的 DNA 蛋白质纤维，是间期染色质结构紧密盘绕折叠的结果。核型是指一个体细胞内的全部染色体按其大小、形态特征排列起来构成的图像。将待检细胞进行染色体数目、形态结构分析，确定其核型是否与正常核型一致，称为核型分析。染色体核型分析，是遗传学科学研究和辅助临
染色体制备
一、 人外周血染色体制备 1. 实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验_压片法
实验方法原理有丝分裂是细胞均等增殖的过程，是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份，然后分配到子细胞中，因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、早期、中
培养细胞染色体显示法实验——传代培养细胞染色体显示法
实验方法原理培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点，是制备染色体极好的对象。实验材料细胞试剂、试剂盒HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %～90 %汇合单层培养细胞；2. 加
培养细胞染色体显示法实验
实验方法原理 培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点，是制备染色体极好的对象。实验材料 细胞试剂、试剂盒 HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材 酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤 1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %～90 %汇合单层培养细胞；
如何巧妙提高外周血培养成功率？
人体外周血淋巴细胞培养搭配染色体核型分析技术是诊断染色体变异的重要手段。淋巴细胞的培养是染色体标本制备的关键。培养基的选择、秋水仙素的用量及时间、温度、pH，固定、滴片等其中任何一点处理不当，就极有可能导致实验失败。本期专题，我们就聊聊 “外周血淋巴细胞培养，如何简化操作、做好细节、提高细胞培养
人类外周血染色体制备
实验方法原理人的外周血淋巴细胞培养疗法是1960年由Moorhead提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期)。但在体外给予一-定的条件，进行培养，经72h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植物血凝素(PHA)，淋巴细胞受到
CHO细胞染色体制备[Harvard－Medical－School]
Mitshison Lab, Department of Systems Biology, Harvard Medical Schoolhttp://mitchison.med.harvard.edu/protocols/chr1.htmlBuffers:Swelling Buffer (PME):
组织培养细胞染色体制备方法
组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株，多为恶性肿瘤细胞株，且呈贴壁生长，仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态，只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相，所以积水仙素处理的时机及量是染
羊水细胞染色体制备方法（原位法）
细胞培养1. 将羊水（约20ml）转移到无菌的离心管中，1000rpm离心10分钟；2. 去除上清液，用于其它分析，保留细胞悬液约0.5~1ml，用培养基混匀到2~2.5ml左右；3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中；4. 培养24/48小时后，向每只Chromslide培养皿中加
动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤2
2.第3步可省去，改用1ml 注射器直接钻入骨末端即可，避免剪去骨骺时损失过多骨髓细胞； 3.在分离股骨大转子一端时，应防止折断股骨头； 4.如有需要，细胞悬液可用尼龙网过滤，进一步去除骨碎片及杂质。 四、实验结果及思考题 1．在低倍及中倍镜下观察Giemsa染色之后的染色体制片，寻
实验动物血液标本的采集
实验概要本文介绍了实验动物(小鼠和大鼠、豚鼠、兔、猴等)血液标本的采集方法。实验步骤1. 小鼠和大鼠血液标本的采集 1) 割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的温水中数分钟，使尾部血管充盈。再将尾擦干，用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0
实验动物标本的采集方法
实验概要本文介绍了实验动物标本(脑脊液、骨髓、消化液、腹水、胸水、尿液等)的采集方法。实验步骤1. 脑脊液的采集 1) 脊髓穿刺法狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法。穿刺部位在两髂连线中点稍下方第七腰椎间隙。动物轻度麻醉后，侧卧位固定，使头部及尾部向腰部尽量弯曲，剪去第七腰椎周围的被毛。消毒
细胞培养中的一些试剂（纺锤体阻断剂、低渗液、固定液、...
细胞培养中的一些试剂（纺锤体阻断剂、低渗液、固定液、滴片与Gi一、纺锤体阻断剂（Spindle inhibitor）在有丝分裂过程中，随着纺锤丝的形成，染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡，因此，改变细胞质的粘度，即可破坏纺锤体形成，从而使得染色体均匀
动物组织/细胞总RNA的制备及检测
实验目的：使学生掌握采用Trizol抽提法从动物新鲜组织或细胞制备总RNA的实验技术，以及用紫外分光光度法检测RNA的纯度及定量、用琼脂糖电泳法检测RNA的完整性及质量。实验原理：Trizol是一种新型的总RNA即用型制备试剂，适用于从各种组织或细胞中快速分离总RNA。Trizol 试剂是由苯酚
动物细胞基因组DNA的制备
实验概要本实验介绍了动物细胞基因组DNA的制备原理及操作流程。本方法一般可从5×107培养的非整倍体细胞（如HeLa细胞）中获得大约200μg DNA。DNA的长度可达到100~150kb。20ml正常血的DNA产量约为250μg。实验原理真核生物的一切有核细胞（包括培养细胞）都能用来制备基因组