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关于鬼笔环肽的化学合成介绍

由于鬼笔环肽因其结合和稳定肌动蛋白聚合物的能力而被开发利用,但细胞无法轻易吸收,因此科学家发现鬼笔环肽衍生物在研究中更有用。 本质上,它遵循典型的使用羟脯氨酸的小肽合成。 合成的主要困难是色氨酸的形成(半胱氨酸-色氨酸交联)。 以下是Anderson等人进行的一般合成机理。在2005年进行了ala7-鬼笔环肽的固相合成,其在残基7与鬼笔环肽的区别如下。 THPP代表四氢吡喃基聚苯乙烯接头,该接头用于在合成过程中将分子与固体支持物连接。 注意,下面的合成只是显示连接起始材料的键形成顺序的一般方案。 Ala7-鬼笔环肽以及鬼笔环肽的许多其他类似变体可用于相对于鬼笔环肽增加细胞吸收并附着荧光团,以帮助在显微镜下观察F-肌动蛋白。 鬼笔环肽的第一个全合成是通过固相和溶液相合成的组合实现的。 合成鬼笔环肽的物理和化学性质与天然鬼笔环肽相同。 以下为刘宝生(Baosheng Liu)和张建恒(Jianheng Zhang)所开发的......阅读全文

关于鬼笔环肽的化学合成介绍

  由于鬼笔环肽因其结合和稳定肌动蛋白聚合物的能力而被开发利用,但细胞无法轻易吸收,因此科学家发现鬼笔环肽衍生物在研究中更有用。 本质上,它遵循典型的使用羟脯氨酸的小肽合成。 合成的主要困难是色氨酸的形成(半胱氨酸-色氨酸交联)。  以下是Anderson等人进行的一般合成机理。在2005年进行了a

关于鬼笔环肽的毒性介绍

  发现后不久,科学家将鬼笔环肽注射入小鼠体内,并通过IP注射发现其LD50为2 mg / kg。 当暴露于最小致死剂量时,这些小鼠死亡需要几天时间。 鬼笔环肽中毒的唯一明显副作用是极度饥饿。 这是因为鬼笔环肽仅通过胆汁盐膜转运蛋白被肝脏吸收。 一旦进入肝脏,鬼笔环肽会结合F-肌动蛋白,从而阻止其解

关于鬼笔环肽的基本介绍

  鬼笔环肽(phalloidin),是从一种剧毒蘑菇(Amanita phalloides(Vaill ex Fr.)Secr.) (伞菌目,毒伞属的毒伞)中分离出来的一种多肽物质,属于毒伞肽类毒素,是一种强烈毒素。无色,细针状结晶。鬼笔环肽中毒的主要症状是由于肝细胞的破坏引起的急性饥饿。它通过结

关于鬼笔环肽的物质介绍

  鬼笔环肽是最早发现的环状肽之一。它是从Amanita phalloides中分离出来的,并于1937年由Feodor Lynen和Ulrich Wieland结晶。它的结构不同寻常,因为它包含一个半胱氨酸-色氨酸键,形成一个双环七肽。这种连接以前没有被表征过,这使得鬼笔环肽的结构阐明变得更加困难

关于鬼笔环肽的配制内容介绍

  0.1mg鬼笔环肽溶于1ml无水甲醇(也可用DMSO或无水乙醇溶解)配成贮存液,可在-20度避光的条件下长期保存,工作液的浓度为5ug/ml,由贮存液加生理盐水PBS稀释20倍即可。  一、染色程序  1、生理盐水PBS清洗细胞2次,每次10分钟;  2、3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分

关于鬼笔环肽的生物合成介绍

  鬼笔环肽是一种双环七肽,含有不寻常的半胱氨酸-色氨酸键。 编码鬼笔环肽合成的基因是死亡帽蘑菇中MSDIN家族的一部分,编码34个氨基酸的前肽。 脯氨酸残基位于七个残基区域的两侧,稍后将变成鬼笔环肽。 翻译后,必须对肽进行蛋白水解切除,环化,羟基化,使Trp-Cys交联形成色氨酸,并差向异构化以形

关于鬼笔环肽用作显影剂的介绍

  荧光鬼笔环肽(红色)标记内皮细胞中的肌动蛋白丝鬼笔环肽的特性使其成为研究F-肌动蛋白在细胞中分布的有用工具,方法是用荧光类似物标记鬼笔环肽并用它们对肌动蛋白丝染色以进行光学显微镜检查。鬼笔环肽的荧光衍生物在定位活细胞或固定细胞中的肌动蛋白丝以及体外观察单个肌动蛋白丝方面非常有用。开发了一种高分辨

简述鬼笔环肽的作用机理

  鬼笔环肽结合F-肌动蛋白,防止其解聚并中毒细胞。 鬼笔环肽特异性结合在F-肌动蛋白亚基之间的界面,将相邻的亚基锁定在一起。 鬼笔环肽(一种双环七肽)与肌动蛋白丝的结合比与肌动蛋白单体的结合更紧密,从而导致肌动蛋白亚基从丝端解离的速率常数减小,这通过防止丝解聚而基本稳定了肌动蛋白丝。此外,发现鬼笔

关于环肽的命名介绍

  环肽(cyclic peptides)的名称由肽的名称(放在括号内)加前缀“环(cyclo)”构成。由符号构成的肽的名称放在括号“( )”内,前面也加上前缀“环(cyclo)”。完全由氨基酸残基以正常肽键[真肽键(eupeptide linkage)]组成的肽对其中 D -型的氨基酸残基需要使用

关于环肽的基本信息介绍

  通常生物学中所指的环肽是指以氨基酸肽键形成的化合物,在植物化学中这一概念被扩大成以酰胺键形成的一类化合物,因此范围被扩大至包括有机胺类和大环生物碱类,根据成环与否分为环肽和直链肽。 已报道的环肽类化合物具有多方面的生物活性,包括抗肿瘤、抗HIV、抗菌、抗疟、安眠、抑制血小板聚集、降压、抑制酪氨酸

细胞骨架观察实验——鬼笔环肽显示微丝蛋白染色法

实验材料细胞试剂、试剂盒PBS三硝基甲苯甘油仪器、耗材显微镜实验步骤1.  盖片培养细胞(70 %~80 %汇合),PBS洗3 次;2.  2 %的甲醛/PBS 液(甲醛按37 %)固定3 分钟;3.  0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次,每次10 分钟;4.  PBS漂洗3 次;5.  用罗

关于基因的化学合成的介绍

  1、基因片段的全化学合成  首先合成一个基因的所有片段,相邻的片段间有4—6个碱基的重叠互补,退火后,用T4DNA连接酶将各片段以磷酸二酯键的共价键形式连接成一个完整的基因。  2、基因的化学—酶促合成  不需要合成完整基因的所有寡核苷酸片段,而是合成其中一些片段,相邻的3'-末端有一短

关于RNA干扰的化学合成介绍

  许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。  最适用于:已经找到最有效的siRNA的情况

技术和方案13 已固定细胞的肌动蛋白染色

试剂、试剂盒PBS固定液实验步骤鬼笔环肽专一性地结合 F 肌动蛋白,荧光标记的鬼笔环肽染细胞与肌动蛋白抗体的染色模式类似。1.在 500 ml 三角瓶中振荡培养 25 ml 酵母菌至密度为 2X107 个/ml。2.添加 17 ml 10% 甲醛(EM 电子显微级)到培养基中至终浓度 4%,在酵母菌

关于阿魏酸的化学合成法介绍

  阿魏酸的化学合成法是以香兰素为基本原料,主要应用的有机反应有Wittig-Horner反应和Kneoevenagel反应。  1、Wittig-Horner反应合成阿魏酸  亚磷酸三乙酯乙酸盐和乙酰香兰素在强碱体系中发生Wittig-Horner反应,再用浓盐酸酸化得到阿魏酸。该法需要预先保护酚

自动细胞成像系统进行细胞表型的多参数评估

简介自动细胞成像是一种分析化合物对包括细胞形态,活力和标志物表达在内的细胞表型的影响的有效方法。这里,我们将展示ImageXpress® Pico自动细胞成像系统和CellReporterXpress 自动成像分析软件如何应用于化合物影响的表型分析。成像和分析方法可提供工具来鉴定细胞活力,细

细胞骨架观察实验

鬼笔环肽显示微丝蛋白染色法 抗管蛋白免疫染色法 考马斯亮蓝染色法             实验材料 细胞

细胞肌动蛋白的影响

有许多毒素可以通过阻止肌动蛋白聚合(latrunculin和细胞松弛素D)或通过稳定它(鬼笔环肽)来干扰肌动蛋白的动力学:Latrunculin是一种由海绵产生的毒素,它与G-肌动蛋白结合,阻止它与微丝结合。细胞色素D是由真菌产生的生物碱,其与F-肌动蛋白的(+)末端结合,阻止添加新单体。已发现Cy

肌动蛋白的生理影响

有许多毒素可以通过阻止肌动蛋白聚合(latrunculin和细胞松弛素D)或通过稳定它(鬼笔环肽)来干扰肌动蛋白的动力学:Latrunculin是一种由海绵产生的毒素,它与G-肌动蛋白结合,阻止它与微丝结合。细胞色素D是由真菌产生的生物碱,其与F-肌动蛋白的(+)末端结合,阻止添加新单体。已发现Cy

肌动蛋白的影响简介

  有许多毒素可以通过阻止肌动蛋白聚合(latrunculin和细胞松弛素D)或通过稳定它(鬼笔环肽)来干扰肌动蛋白的动力学:  Latrunculin是一种由海绵产生的毒素,它与G-肌动蛋白结合,阻止它与微丝结合。  细胞色素D是由真菌产生的生物碱,其与F-肌动蛋白的(+)末端结合,阻止添加新单体

siRNA的化学合成方法的介绍

许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的siRNA的情况下,需要

简述环肽的合成方法

  Jame P.Tam[88-90]等建立了分子内转移硫内酯化和Ag+离子辅助环合来制备非保护环肽的方法。对于N端为半胱氨酸,C端为硫酯的线性多肽,在pH=7的磷酸缓冲液中,巯基与硫酯基生成共价的硫内酯,这种硫内酯自发地经过S原子到N原子酰基迁移而形成环肽。  作者应用上述方法合成了一系列N端为半

细胞骨架的荧光探针标记方法

细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT),微丝(microfilament, MF),中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组

概述脯氨酸的化学合成介绍

  1、明胶、干酪素之类蛋白质的水解物,用离子交换树脂处理,再用苦味酸或雷因克特盐(Reineckeatesalt)处理中性氨基酸部分,仅使L-脯氨酸沉淀,最后用无水乙醇加异丙醇重结晶而得。由嗜乙酰乙酸棒杆菌(Corynebacteriumacetoacidophilum)XQ-3(由无锡轻工大学中

化学合成虾青素的相关介绍

  由β-胡萝卜素转变为虾青素需加上2个酮基和2个羟基,化学合成比较困难,且产物大多为顺式结构,而生物合成需要的虾青素大多数为反式结构。虾青素的合成需经多步化学和生物催化反应才能完成,其中生物催化作用是选择确定合成过程中间体碳原子的立体构型或氧原子的取代位置,化学合成的主要前体物质为(S)-3-乙酸

阿魏酸的化学合成法介绍

  阿魏酸的化学合成法是以香兰素为基本原料,主要应用的有机反应有Wittig-Horner反应和Kneoevenagel反应。  1、Wittig-Horner反应合成阿魏酸  亚磷酸三乙酯乙酸盐和乙酰香兰素在强碱体系中发生Wittig-Horner反应,再用浓盐酸酸化得到阿魏酸。该法需要预先保护酚

酵母遗传学方法10:固定化细胞的肌动蛋白染色

固定化细胞的肌动蛋白染色1.培养细胞到对数生长期(约107细胞/ml)。2.直接取0.1ml甲醛加到含有1ml培养物的离心管中固定细胞(甲醛浓度为3.7%;标准母液是37%)。3.在甲醛中培养细胞30分钟或稍长时间。4.用PBS洗两次,离心5分钟收集细胞。5.用50μl的PBS悬浮细胞,加5个单位的

青蒿素的化学合成的相关介绍

  1983年,化学家HofheinzW等通过化学研究发现了青蒿素的化学合成方法,以(-)-2-异薄勒醇为原料,利用光氧化反应引进氧基得到中间体,再经过环合反应合成了最终产物。合成倍半萜内酯,主要有两个限速步骤:倍半萜母核的折叠和环化;含过氧桥的倍半萜内酯的形成程。  1986年,中国科学家周维善以

脯氨酸的化学合成方法介绍

  1、明胶、干酪素之类蛋白质的水解物,用离子交换树脂处理,再用苦味酸或雷因克特盐(Reineckeatesalt)处理中性氨基酸部分,仅使L-脯氨酸沉淀,最后用无水乙醇加异丙醇重结晶而得。由嗜乙酰乙酸棒杆菌(Corynebacteriumacetoacidophilum)XQ-3(由无锡轻工大学中

化学合成法提取奎尼酸的相关介绍

  这是利用有机合成和化学工程相结合的制备方法。1954 年,有人首次报道了奎尼酸的化学合成法,该法较直接提取要经济,但是其产物为DL型外消旋体,必须经过光学拆分才能得到能够被利用的奎尼酸。后来,Smissman= 和Wolinsky加以完善,用不对称合成法获得了具有光学活性的奎尼酸,但工艺过程极其