T细胞中丝裂原活化的蛋白激酶（MAPK)活性分析
实验步骤基 本 方 案 1 免疫复合物蛋白激酶测定此方法可用于测定 E R K 、 J N K 和 p38 M A P K 的活性，也可使用针对每个 M A P K组分的商品化抗体。然而，特定的抗体对各组分内特定的亚型会显示一定的特异性。材 料基本方案 2 固相蛋白激酶法检测 J N K 活性这种方法最适合于测定 J N K 活 性 ，它依赖于 J N K 与它的靶转录因子 c-J u n 的 N H 2 末端活化区结合的特异性。材 料清晰。在真空中 80°C 下利用干胶仪在 Whatman 3M M 滤纸上将其干燥 lh。9 . 确认在每一步试验中底物蛋白质的水平均相同。将凝胶曝 光 在 X 射线胶片上使其显影或者利用磷成像仪分析法，对 32P 掺 入 GST-cJun (1-79) 的量进行定量。基本方案 3 SDS-P A G E 后原位检测 J N K 蛋白激酶活性 [「胶内」（IN-G E L )激酶测定]该方案改良自......阅读全文
T－细－胞－中－丝－裂－原－活－化－的－蛋－白－激－酶（MAPK)－活性分析
实验步骤基 本 方 案 1 免疫复合物蛋白激酶测定此方法可用于测定 E R K 、 J N K 和 p38 M A P K 的活性，也可使用针对每个 M A P K组分的商品化抗体。然而，特定的抗体对各组分内特定的亚型会显示一定的特异性。材 料基本方案 2 固相蛋白激酶法检测 J N K 活性这种方
淋－巴－细－胞－活－化－过－程－中－肌－醇－磷－脂－周－转－的－分－析
实验步骤 基 本 方 案 1 通 过 道 威 克 斯（DOWEX) 离 子 交 换 层 析 分 析 [3H] 肌醇磷酸 材料 备 选 方 案 通 过 HPLC 方 法 分 析 [3H] 肌醇磷酸 附加材料 [3 H ] InsP 样 本（见基本方案，步 骤 6) 和标准
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验（三）
2.2 糖基化糖 基 化 是 一 种 常 见 的 P T M , 并 且 已 经 证 明 能 够 影 响 酶 的 活 性 、蛋 白 质 定 位 、稳 定 性 、信 号 转 导 、细 胞 黏 附 和 蛋 白 质 相 互 作 用 (Spiro, 2002k 目 前 已 经 发 现 在 肿 瘤 恶
免－疫－球－蛋－白－融－合－蛋－白－的－构－建
实验步骤 基 本 方 案 1 免疫球蛋白融合蛋白的构建材 料编码靶基因的 D N A展开
NK/L－A－K－细－胞－杀－伤－活－性－的－检－测
实验步骤基 本 方案 51C r 释 放 法检 测 NK/LA K 细胞杀伤活性材 料展
巨－噬－细－胞－抗－肿－瘤－活－性－的－检－测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开
丝裂沙参的介绍
龙胆草（拉丁学名：Gentiana scabra Bunge），是龙胆科龙胆属植物。 枝单生，直立，黄绿色或紫红色，中空，近圆形，具条棱，棱上具乳突，稀光滑。枝下部叶膜质，淡紫红色，鳞片形，先端分离，中部以下连合成筒状抱茎。性喜潮湿凉爽气候，野生于山区、坡地、林绿及灌木丛中。分布于内蒙古、黑龙
外－源－性－抗－原－向－T－细－胞－的－呈－递
实验步骤基本方案 一 种 抗 原 加 工 处 理 和 呈 递 的 检 测 体 系材 料具有增殖能力的（如转化的 B 细胞）或非增殖的且与 T 杂交瘤细胞 M H C 匹配的抗原呈递细胞（单 元 7.1)D M E M -1 0 完全培养基， 37°C对数生长期的 T 杂交瘤细胞抗原：溶解于水的蛋白质
丝裂沙参的分布范围
产内蒙古、黑龙江、吉林、辽宁、贵州，陕西、湖北、湖南、安徽、江苏、浙江、福建、广东、广西。模式标本采自亚洲东部。在苏联、朝鲜、日本也有分布。[2]
丝裂沙参的繁殖方法
种子及分株繁殖。种子繁殖 可分秋播和春播两种。秋播：一般在11月播种，翌年春萌芽。为了播种均匀，于种子中混入适量细沙或腐殖质，采用条播。春播：应事先进行沙藏处理，即将种子采下后与 细沙1:3混合，保持一定的湿度，埋在室外，经冬季低温影响，然后取出播种，条播行距1-1.3尺，株距0.7-1尺，覆土
丝裂沙参的形态特征
龙胆草为多年生草本，高1-2尺。叶对生，下部叶2-3对很小，呈现鳞片状，中部和上部叶披针形，表面暗绿色，背面淡绿色，有三条明显叶脉，无叶柄。花生于枝梢或近梢的叶腋间，开蓝色筒状钟形花。果实长椭圆形稍扁，成熟后二瓣开裂，种子多数，很小。根茎短，簇生多数细长根，淡黄棕色或淡黄色。 头花龙胆 本品长
丝裂沙参的功效主治
清热燥湿；泻肝定惊。湿热黄疸；小便淋痛；阴肿阴痒；湿热带下；肝胆实火之头胀头痛；目赤肿痛；耳聋耳肿；胁痛口苦；热病惊风抽搐。 龙胆治疗头发全脱也有很好的疗效。现代社会由于生活节奏的加快，工作压力加重，精神负担随之加重，脱发患者越来越多见。一般脱发治疗已有难度，临床遇到头发全秃者更为棘手，甚至于
巨－噬－细－胞－一－氧－化－氮－的－检－测
实验步骤基本方案材料展开
ELISPOT方－法－检－测－分－泌－细－胞－因－子－的－细－胞
实验步骤基本方案材 料包被缓冲液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻断缓冲液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培养基（或其他适宜培养基）分泌细胞因子的细胞（小鼠或人的）丝裂原，抗原或其他促细胞因子分泌的刺激物带有标记物的
丝裂沙参的主要成分
含龙胆苦甙（Gentiopicrin）、獐牙菜苦甙（Swertiamarin）、当药甙（Sweroside）、三叶甙（Trifloroside）、苦龙甙（Amarogentin）、四乙酰龙胆苦甙（Gentiopicroside tetraacetate）、苦樟甙（Amaroswerin）；龙胆黄
丝裂沙参的生长习性
该植物是一种高山植物，性喜潮湿凉爽气候，野生于山区、坡地、林绿及灌木丛中。在植物整个生长季节，温度是相当高的。北京地区引种后，一直生长良好。地势高燥与 阳光直接照射的地方和土壤过粘、贫瘠的地区不宜栽培。龙胆喜肥，在结合深耕土地时，每亩应施入充分腐熟的厩肥8000斤左右。每年4月中旬萌发，8月开花
丝裂沙参的鉴别方法
（1）本品横切面：龙胆表皮细胞有时残存，外壁较厚。皮层窄；外皮层细胞类方形，壁稍厚，木栓化；内皮层细胞切向延长，每一细胞由纵向壁分隔成数个类方形小细胞。韧皮部宽广，有裂隙。形成层不甚明显。木质部导管3～10 个群束。髓部明显。薄壁细胞含细小草酸钙针晶。 坚龙胆内皮层以外组织多已脱落。木质部导管
丝裂沙参的药理作用
对消化道的影响 龙胆或龙胆苦甙能促进胃液和胃酸分泌，用龙胆苦甙给予造成胃瘘管的狗口服，能促进胃液分泌，并可使游离盐酸增加，食欲增进。而舌下涂抹或静脉注射则无效，故认为龙胆苦甙可直接促进胃液分泌和使游离酸增加。 利胆和保肝作用 取健康及肝脏损害小白鼠，十二指肠给予50g/kg龙胆注射液或健康犬静
免－疫－球－蛋－白－M(IgM)和－免－疫－球－蛋－白－D(IgD)－的纯化
实验步骤基 本 方 案 1 用透析和凝胶过滤层析法纯化 IgM此 法 纯 化 的 IgM 可达到较好纯度，可用于酶解、异 硫 氰 酸 盐 荧 光 素（FITC) 标记 、生物素标记或放射性标记。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)腹 水 或 单 克 隆 抗 体（MAb) 上 清（单 元 1.4)
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验2
二、用 于 鉴 定 P T M 的富 集 技 术2.1 磷酸化丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的可逆磷酸化也许是研究最为深人的 PT M 。蛋白质磷酸化信号网络介导细胞对与不同的应激因子、生长因子、细胞因子以及细胞间相互作用作出响应。憐酸化还影响多种细胞进程，如增殖、凋亡 、迁移 、转录和蛋白质翻译（W
免疫复合物方法检测酪氨酸蛋白激酶
基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液（新鲜配置并于冰上保存）含蛋白
细－胞－毒－性－T－淋－巴－细－胞－的－诱－导－及－检－测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意：反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源：未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源：未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培
流－式－细－胞－仪－检－测－全－血－的－人－淋－巴－细－胞
实验步骤基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉
免－疫－复－合－物－方－法－检－测－酪－氨－酸－蛋－白－激－酶
实验步骤基 本 方案 酪 氨酸 蛋白 激酶 的免 疫 沉淀 和自 身 磷 酸化 检 测以下步骤可以釆用淋巴或非淋巴细胞、原代细胞或培养的细胞系、活化或非活化的细胞。材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)待检测的细胞 冰预冷的 PBS含蛋白酶抑制剂的 I X 细 胞 裂 解 液（新鲜配置并于冰上保存
免－疫－球－蛋－白－M(IgM)和－免－疫－球－蛋－白－D(IgD)－的纯化实验
实验步骤备 选 方 案 1 硫 酸 铵 沉 淀 法 纯 化 IgM此法适用于多数 IgM 抗体，尤其是一些在水中不能形成沉淀的 IgM 抗体。附 加 材 料（其 他 材 料 见 基 本 方 案 1 )饱和硫酸铵（SAS)硫酸铵结晶（CAS)硼酸缓冲液，可选备 选 方 案 2 甘 露 聚 糖 结 合
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验
蛋白质翻译后修饰 (PTM) 在细胞生物调节中发挥着基本作用。PTM 是 mRNA 翻译后蛋白质的酶促共价化学修饰。蛋白质化学修饰非常重要，因为它们会潜在地改变蛋白质的物理或化学性质、组成、活性、细胞定位或稳定性。实际上，在氨基酸或蛋白质的 N 端或 C 端加入或移除化学基团会导致大部分蛋白质发生变
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验（一）
一、引言蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 (P T M ) 在 细 胞 生 物 调 节 中 发 挥 着 基 本 作 用 。 P T M 是 m R N A 翻译 后 蛋 白 质 的 酶 促 共 价 化 学 修 饰 。蛋 白 质 化 学 修 饰 非 常 重 要 ，因 为 它 们 会 潜 在 地
次氯酸钠发生器消杀Z主要的作用方式
大 家 都 知 道 ，次氯酸钠发生器 消 杀 zui 主 要 的 作 用 方 式 是 通 过 它 的 水 解 形 成 次 氯 酸 ，次 氯 酸 再 进 一 步 分 解 形 成 新 生 态 氧 [O]，新 生 态 氧 的 极 强 氧 化 性 使 菌 体 和 病 毒 上 的 蛋 白 质 等 物 质 变
丝裂沙参的化学成分
龙胆 根含裂环烯醚萜甙类苦味成份：龙胆苦甙（gentiopicroside），当药苦甙（swertiamarin），当药甙（sweroside），苦龙胆酯甙（amarogentin），痕量苦当药酯甙（amaroswerin）；苦甙总含量可高达7.33%，而龙胆苦甙含量可达6.34%。生物碱：龙
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验
翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验 实验步骤 一、引言 蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 (P T