活体法检测物体内硝酸还原酶活性实验

实验步骤一、材料仪器设备及试剂1. 材料:水稻或小麦的叶片、幼穗等。2. 仪器设备:真空抽气泵;真空干燥器;小烧杯;玻璃瓶塞;其它用具同离体法。3. 试剂及配制:亚硝酸钠标准液(与离体法相同)。0.1mol·L-1KNO3(配制方法同离体法)。1%磺胺(配制方法同离体法);0.02%萘基乙烯胺(配制方法同离体法)。30%三氯乙酸溶液配制:称取30g三氯乙酸,水溶后定容至100ml。二、实验步骤1. 标准曲线制作 ( 同离体法)。2. 酶促反应(1)称取作物叶片1.0~2.0g四份,剪成1cm左右的小段,分放于四个小烧杯中,用直径略小于烧杯直径的玻璃瓶塞将材料全部压于杯底,其中一份作对照,另外三份作酶活性测定用。(2) 先向对照杯中加入1ml 30%三氯乙酸,然后各杯中都加入9ml 0.1 mol·L-1KNO3溶液,混匀后立即放入干燥器中,抽气1min再通入空气,再抽真空,反复几次,以排除组织间隙的气体,至叶片完全软化......阅读全文

IL8生物学活性检测实验

实验材料 IL-8的诱生试剂、试剂盒 右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材 洁净载玻片 打孔器离心机培养箱实验步骤 一、IL-8的诱生1.  常规分离PBMC,洗涤后,调细胞浓度为5×106/ml。2.  将细胞接种于24孔细胞培养板,每孔0

IL6生物学活性检测实验

实验材料 IL-6的诱生试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机培养箱摇床实验步骤 1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2.  IL-6的生物学活性测定:采用M

IL6生物学活性检测实验

实验材料IL-6的诱生试剂、试剂盒FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材离心机培养箱摇床实验步骤 1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2.  IL-6的生物学活性测定:采用MH60

IL2生物学活性检测实验

实验方法原理实验材料 人外周血T细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 一、人外周血T细胞分泌IL-2的诱生1.  人PBMC分离:采用常规淋巴细胞分层液浓度梯度离心法分离PBMC,用10%FCS-RPM

IL4生物学活性检测实验

实验材料IL-4诱生试剂、试剂盒生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材细胞培养板培养箱实验步骤一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的

亚硝酸还原酶的基本信息

中文名亚硝酸还原酶英文名Nitrite reductase别称布洛芬,Dolgit,Anflagen化学式C13H18O2分子量206.28082 CAS登录号37256-41-0EINECS登录号EC1.7.2.1熔点75-77摄氏度水溶性微溶于水应用制药

亚硝酸还原酶的基本分类

按照辅助因子和反应产物的不同可将亚硝酸还原酶分为四类:铜型亚硝酸还原酶(Cu-NiRs);细胞色素cd1型亚硝酸还原酶(cd1NiRs);多聚血红素c亚硝酸还原酶(cc NiRs);铁氧化还原蛋白依赖的亚硝酸还原酶。铜型亚硝酸还原酶是由三个相同亚基组成的三聚体蛋白铜型亚硝酸还原酶的三维结构。每个亚基

细胞表面抗原检测实验_免疫荧光抗体法

细胞表面有糖蛋白,这种蛋白质上有多糖,起到识别作用,当无法识别的糖蛋白进入血液就会引起身体的免疫反应引来严重后果,直接输血才会引起,如果喝就不会,因为胃都将其降解成氨基酸了,进入身体合成自身蛋白质就不会有事故。实验方法原理用人结肠癌细胞为免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原(Ag)的单克隆

免疫荧光补体法实验

实验方法原理用特异性抗体和补体的混合液与标本上的抗原反应,补体就结合在抗原-抗体复合物上,再用抗补体的荧光抗体与补体结合,从而形成抗原抗体补体复合物-抗补体荧光抗体复合物,在荧光显微镜下呈现阳性荧光的部位就是免疫复合物存在处,此法常用于肾穿刺组织活检诊断等。实验材料抗补体荧光抗体试剂、试剂盒PBS甘

免疫荧光补体法实验

实验方法原理 用特异性抗体和补体的混合液与标本上的抗原反应,补体就结合在抗原-抗体复合物上,再用抗补体的荧光抗体与补体结合,从而形成抗原抗体补体复合物-抗补体荧光抗体复合物,在荧光显微镜下呈现阳性荧光的部位就是免疫复合物存在处,此法常用于肾穿刺组织活检诊断等。实验材料 抗补体荧光抗体试剂、试剂盒 P

硝酸盐还原酶的基本信息

中文名称硝酸盐还原酶英文名称nitrate reductase定  义编号:EC 1.7.1.3。催化硝酸盐还原成亚硝酸盐的一种含钼的黄素蛋白。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

报告基因实验——植物提取物中LUC活性的检测

实验材料植物组织试剂、试剂盒裂解液萤光素酶分析缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、完整组织1. 液氮速冻植物组织(5~50 mg),研磨成粉末状。2. 100~400 ul 裂解液室温重悬,组织匀浆。3. 16000 g,4℃ 离心 15 min,弃掉破碎的细胞。4. 检测提取物中的蛋白质浓度。5.

药物对动物体内NK细胞活性的影响实验

实验方法原理 肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一, 机体免疫功能低下,与肺癌的发生发展密切相关。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 RPMI1640 培养基中止液Hank. s曲拉通X-100仪器、耗材 酶联免疫监测仪96 孔24 孔平底培养板离心沉淀机实验步骤 1.  动物分组及用药(1)

药物对动物体内NK细胞活性的影响实验

瘤细胞悬液皮下接种法实验方法原理肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一, 机体免疫功能低下,与肺癌的发生发展密切相关。实验材料小鼠试剂、试剂盒RPMI1640 培养基中止液Hank. s曲拉通X-100仪器、耗材酶联免疫监测仪96 孔24 孔平底培养板离心沉淀机实验步骤1.  动物分组及

HMGCoA还原酶的生理活性介绍

  植物中  HMGR催化依赖于NADPH的从3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A到甲羟戊酸(MVA)的合成反应,由于甲羟戊酸的生成是一个不可逆过程,因此,HMGR被认为是MVA途径中的第一个限速酶,是细胞质萜类化合物的代谢中的重要调控点。  动物与人体中  HMG-CoA还原酶:肝细胞合成胆固醇过程中的

NK细胞活性检测实验步骤

  细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp

日本开发出可检测活牛体内放射性物质装置

  据日本NHK电视台3月13日报道,受东京电力福岛第一核电站核事故影响,日本福岛县不断强化食品放射性物质检测工作,并于近日开发出一款可检测活牛体内放射性物质的装置。该装置将于13日开始投入福岛县本宫市市场进行使用。   该检测装置由福岛县农业综合中心等研发而成。使用时,将该装置的检测机安装在活牛

植物体内抗坏血酸氧化酶活性的测定实验

实验方法原理 抗坏血酸氧化酶在有氧情况下,能氧化抗坏血酸成脱氢抗坏血酸,同时促进其氢与空气中的氧结合成水。抗坏血酸氧化酶的测定是在该酶的最适pH及适宜的温度下,向反应瓶中加入一定量的底物(抗坏血酸)及酶提取液,让酶作用一段时间,然后测定底物被消耗的数量来计算酶的活性。抗坏血酸被消耗的量,可用碘液滴定

植物体内多酚氧化酶活性的测定实验

实验方法原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:.                          实验材料马铃薯块茎                        

植物体内抗坏血酸氧化酶活性的测定实验

实验方法原理抗坏血酸氧化酶在有氧情况下,能氧化抗坏血酸成脱氢抗坏血酸,同时促进其氢与空气中的氧结合成水。抗坏血酸氧化酶的测定是在该酶的最适pH及适宜的温度下,向反应瓶中加入一定量的底物(抗坏血酸)及酶提取液,让酶作用一段时间,然后测定底物被消耗的数量来计算酶的活性。抗坏血酸被消耗的量,可用碘液滴定剩

植物体内多酚氧化酶活性的测定实验

实验方法原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:.实验材料马铃薯块茎试剂、试剂盒聚乙烯吡咯烷酮磷酸缓冲液磷酸缓冲液和度硫酸铵儿茶酚三氯乙酸仪器、耗材UV-1206UV-1

植物体内多酚氧化酶活性的测定实验

实验方法原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:.实验材料 马铃薯块茎试剂、试剂盒 聚乙烯吡咯烷酮磷酸缓冲液磷酸缓冲液和度硫酸铵儿茶酚三氯乙酸仪器、耗材 UV-1206

植物体内抗坏血酸氧化酶活性的测定实验

实验方法原理抗坏血酸氧化酶在有氧情况下,能氧化抗坏血酸成脱氢抗坏血酸,同时促进其氢与空气中的氧结合成水。抗坏血酸氧化酶的测定是在该酶的最适pH及适宜的温度下,向反应瓶中加入一定量的底物(抗坏血酸)及酶提取液,让酶作用一段时间,然后测定底物被消耗的数量来计算酶的活性。抗坏血酸被消耗的量,可用碘液滴定剩

活微丝蚴浓集检测实验

实验步骤在离心管内加蒸馏水半管,加外周血10~12 滴,再加生理盐水混匀,离心(每分钟3000 rpm)沉淀3 分钟,取沉渣镜检。或取静脉血1 ml,置于盛有3.8%枸橼酸钠0.1 ml的试管中,摇匀,加水9 ml,待红细胞溶化后,再离心2 分钟,倒去上清液,加水再离心,取沉渣镜检。 根据微丝蚴活动

先进显微镜可窥探体内活细胞

  如今,将两种成像技术——其中一种被天文学家所用——结合起来的显微镜使研究人员得以捕捉生物体内活细胞的3D视频。  该方法解决了长期存在的在活体组织内对细胞成像问题。带领团队研发上述设备的美国霍华德·休斯医学研究所珍妮莉娅法姆研究学院物理学家Eric Betzig介绍说,由于光线与不同形状和物质相

先进显微镜可窥探体内活细胞

  如今,将两种成像技术——其中一种被天文学家所用——结合起来的显微镜使研究人员得以捕捉生物体内活细胞的3D视频。   该方法解决了长期存在的在活体组织内对细胞成像问题。带领团队研发上述设备的美国霍华德·休斯医学研究所珍妮莉娅法姆研究学院物理学家Eric Betzig介绍说,由于光线与不同形状和物

亚硝酸还原酶的基本信息及存在形式

亚硝酸还原酶(NiRs)是一类能催化亚硝酸盐还原的酶。亚硝酸还原酶大多数是胞内酶,其在细胞内可以有效的降解亚硝酸盐,该酶是一种氧化还原酶,催化反应过程需要电子供体和传递体的参与,且反应需要在无氧条件下进行。亚硝酸还原酶广泛存在于微生物及植物体内,是自然界氮循环过程中的关键酶,可以将亚硝酸盐降解为NO

亚硝酸还原酶在食品添加方面的应用介绍

  亚硝酸盐能使肉制品呈现出良好的色泽,且具有抑菌和抗氧化作用,是国家食品卫生法允许使用的食品添加剂,在肉制品和腌渍食品中有广泛的应用。但是过量摄入亚硝酸盐对人体的危害很大,可导致急性中毒,并具有致癌性。虽然食用添加亚硝酸盐肉制品引起中毒的事件时有发生,但至今还没有发现有一种物质能完全取代它 [5]

细胞活性检测DNA合成增殖实验

BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷(Thymine)的衍生物,可用于标记活细胞中新合成的DNA(细胞活性周期S期),BrdU可随着DNA复制进入子细胞,因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记,可通过抗BrdU单克隆抗体检测,借此检测细胞的增殖能力,但BrdU单克隆抗体检测过程

MTT法细胞活性检测实验步骤

MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途: