淀粉葡糖苷酶的测定实验

基本方案 实验方法原理 4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶,葡聚糖 1,4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1,4- 和 1,6 连接的 α-1,6-葡糖苷键释放 β-D-葡萄糖。这个实验与 α-葡糖苷酶类似,只是用糖原代替麦芽糖作为底物。一段时间以后(5 min)反应停止,葡萄糖被测出与己糖激酶/6-磷酸葡糖脱氢酶偶联。 实验材料 酶样品 试剂、试剂盒 乙酸缓冲液 糖原溶液 Tris(羟甲基)氨基甲烷 ......阅读全文

乙酸激酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:

解链温度的实验测定

寡核苷酸与靶序列杂交的解链温度可以用本章概述介绍的方法计算(见本章概述有关解链温度与杂交温度),也可通过实验测定双链 DNA 不可逆解离的温度(Ti) 来确定解链温度 Tm。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。试剂、试剂盒变性液中和缓冲液寡核苷酸预杂交液酚: 氯仿乙酸钠SSC酶

COD实验样品的测定

 COD实验样品的测定1.无氯水样的测定 1)向消解管内加入1mL相应浓度氧化剂及4mL催化剂,具塞摇匀.再取2mL水样置于清洗干净的消解管中具塞充分摇匀。2)将消解管插入消解炉孔内,盖上防护罩,待温度稳定在设定值后按“开始”键,仪器自动定时消解,消解完毕后蜂鸣器报警。3)取出消解管至试管架,冷至室

旋光度的测定实验

实验方法原理比旋光度是物质特性常数之一,测定旋光度,可以检验旋光性物质的纯度和含量。仪器、耗材葡萄糖容量瓶旋光仪实验步骤1.接通电源,5min后钠光灯发光正常,即可开始测定。2.旋光仪零点的校正:在测定样品前,需要先校正旋光仪的零点。(1)将样品管洗好,左手拿住管子把它竖立,装上蒸馏水,使液面凸出管

乙酸激酶的测定实验

实验方法原理ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.

解链温度的测定实验

试剂、试剂盒 变性液中和缓冲液寡核苷酸预杂交液酚: 氯仿乙酸钠SSC酶切双链靶 DNA 的适当的限制酶对照 DNA靶 DNA寡核苷酸探针仪器、耗材 煮沸水浴装置交联仪器、微波炉或真空炉平头镊子玻璃试管硝酸纤维素或尼龙膜穿纸打孔器闪烁杯溫度计厚吸水纸精确控温循环水浴装置实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮

叶绿素的定量测定实验

实验方法原理 根据叶绿素对可见光的吸收光谱,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,而后用公式计算出叶绿素含量,此法精确度高,且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比,即:D=kCL式中k为比例常数,当溶液浓度以重量百

核酸的定量测定实验

紫外分光光度法 地衣酚显色法 二苯胺法             实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

贴壁效率的测定实验

实验方法原理以低密度接种细胞,温育直至集落形成,染色与计数集落实验步骤 材料 无菌 生长液 400 ml 0.25% 粗制胰蛋白酶 10 ml Petri 培养皿,6 cm 20 个 试管或通用玻璃容器,稀释用 20 个 非无菌 血球计数板或电子计数仪 固定液:无水甲醇 100 m

尿钠的测定实验

比浊法             实验方法原理 用无水乙醇沉淀尿中蛋白,获得无蛋白尿滤液,再将其与焦性锑酸钾作用生成焦性锑酸钠沉淀。最后与标准管比较求得尿钠的含量,其反应式如下:NaC

呼吸强度的测定实验

  实验方法原理计算一定的植物材料在单位时间内放出CO2的数量,即能测知该植物材料的呼吸强度。呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收,再用滴定法测得之。如比较不同条件下的呼吸强度,则可得知不同条件对呼吸强度的影响。实验步骤一、材料与设备1. 植物材料:(1)干小麦种子;(2)发

根系活力的测定实验

实验方法原理 根据植物矿质吸收的理论,认为植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性,并假定这时在根系表面均匀地复盖了一层吸附物质的单分子层。因此能根据根系的某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。常用甲烯蓝作为被吸附物质,它的被吸附量可以根据溶液浓度的变化用比色法准确地测出。已知1毫克甲烯蓝成单分子层时占用1

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

异构酶的测定实验

实验方法原理 D-木糖 ⇌ D-木酮糖实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 TES NaOHD-木糖MnSO4半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」20 ul 的实验混合物和 20 ul 酶溶液(各自用 20 ul TES 缓冲液作对照)混合,并在测定

血糖测定实验

实验方法原理 血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料 葡萄糖试剂、试剂盒 邻联

血糖测定实验

酶法             实验方法原理 血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合

细胞计数及活力测定实验的实验原理

  培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。  在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用

碳酸酐酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 H2CO3→CO2+H2O此实验采用的是 pH 计,但是如果可能可用 pH 稳定计。

醛缩酶的测定实验

实验方法原理 D-果糖-1,6-二磷酸 ⇌ 二羟基丙磷酸盐+3-磷酸-D-甘油醛D-甘油醛-3-磷酸以酰肼的形式,腙在 240 nm 处有吸收光。实验材料 醛缩酶试剂、试剂盒 肼硫酸盐FDP-Na3H仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.9 ml 测定混合物0.1 ml

延胡索酸酶的测定实验

实验方法原理L-苹果酸 ⇌ 延胡索酸+H2O实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾L-苹果酸溶液磷酸钾血清白蛋白仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 0.05 mol/L L-苹果酸溶液0.02 ml 延胡索酸溶液(用 0.1% 血清白蛋白稀释)25℃ 时 240 nm

磷酸酶-a-的测定实验

实验方法原理4-α-D-葡聚糖:正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1,4-糖苷键:(葡萄糖)n+Pi →(葡萄糖)n-1+葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联:葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化:葡萄糖-6-P+NADP+ → 葡萄糖酸-6-P+

DNA核酸浓度的测定实验

DNA核酸浓度的定量实验可以用于(1)对纯化的PCR产物进行浓度测定;(2)对纯化的酶切产物进行浓度测定;(3)对提取的质粒进行浓度测定。实验方法原理寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA可以定量溶于缓冲液,构成核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键,使核苷核和核酸在紫外线光具有特征性的吸收光谱,最大吸收

己糖激酶的测定实验

实验方法原理 直接测量己糖激酶的反应:D-葡萄糖+ATP → 6-磷酸葡萄糖+ADP简单的光度测量是达不到的,葡萄糖的磷酸化最好用测量磷酸或者 ATP32 标记的办法。由于通过层析,G6P 的实验必须完全与 ATP 和 ADP 分开,因此,建议应用 HPLC 方法。酶的实验通常是酶与 G6P 脱氢酶

DNA的Tm值测定实验

紫外分光光度法             实验方法原理 当DNA 的稀盐溶液加热到80~100 ℃ 时, 双螺旋结构即发生解体, 两条链分开, 形成无规线团。一系列物化性质也发生

植物蔗糖含量的测定实验

实验方法原理 植物体内可溶性糖包括还原糖和非还原糖(主要是蔗糖)。因此测定蔗糖时,须先用盐酸将其水解为还原糖,再测定水解后的总还原糖含量,然后从总还原糖含量减去水解前还原糖含量即为蔗糖含量。实验材料 马铃薯水果试剂、试剂盒 盐酸溶液氢氧化钠溶液酚酞指示剂仪器、耗材 分光光度计电子分析天平恒温水浴锅2

光合强度的测定实验

实验方法原理改良半叶法是将植物对称叶片的一部分遮光或取下置于暗处,另一部分则留在光下进行光合作用,过一定时间后,在这两部分叶片的对应部位取同等面积,分别烘干称重,因为对称叶片的两对应部位的等面积的干重原来相等,光照后叶片重量超过暗中的叶重、超过部分即为光合作用产物的重量,并通过一定的计算可得到光合作

旋光度的测定实验原理

由旋光仪测得的旋光度,甚至旋光方向,不仅与物质的结构有关,而且与测定的条件有关。因为旋光现象是偏振光透过旋光性物质的分子时所造成的。透过的分子愈多,偏振光旋转的角度愈大。因此,由旋光仪式测得的旋光度与被测样品的浓度(如果是溶液),以及盛放样品的管子(旋光管)的长度密切相关。通常,规定旋光管的长度为1

延胡索酸酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 L-苹果酸 ⇌ 延胡索酸+H2O 实验材料 酶

碳酸酐酶的测定实验

实验方法原理 H2CO3→CO2+H2O此实验采用的是 pH 计,但是如果可能可用 pH 稳定计。实验材料 酶样品试剂、试剂盒 Tris-HCl含饱和 CO2 的水仪器、耗材 pH 计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」所有的液体都必须冷却到 0~4℃。计算规定以单位 2×(T0-T)/ T;收