Analyst:数字PCR数据的准确、可靠、非监督自动分类新方法
清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室在《分析学家》(Analyst)在线以封底(back cover)发表题为《一种双荧光四分类微液滴数字PCR数据的准确、可靠和自动分类方法——密度分水岭算法》(A density-watershed algorithm (DWA) method for robust, accurate and automatic classification of dual-fluorescence and four-cluster droplet digital PCR data)的研究论文,该研究将微液滴数字PCR的数据密度分布与分水岭算法(一种图像分割方法)有机结合,建立了一种微液滴数字PCR数据非监督分类的新方法。 微液滴数字PCR是一种单分子水平的核酸定量分析技术。通过将PCR反应体系分割为大量的微液滴,绝大多数微液滴内仅含有0个或1个模板分子,含有模板分子的微液滴在PCR扩增后呈现出较强的......阅读全文
介绍PCR仪的分类与反应步骤
工作原理利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。反应步骤分别是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性,
PCR仪的分类及各自的介绍
PCR,中文译为聚合酶链式反应,它是一种DNA的快速扩增技术,其扩增效率之高就象核裂变的“链式反应”一样。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。 PCR仪也叫基因扩增仪,它是利用PCR技术对特定基因做试管内的大量合成,也
PCR仪的分类及各自的介绍
PCR,中文译为聚合酶链式反应,它是一种DNA的快速扩增技术,其扩增效率之高就象核裂变的“链式反应”一样。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。 PCR仪也叫基因扩增仪,它是利用PCR技术对特定基因做试管内的大量合成,也就
实时荧光定量PCR的分类和原理
根据所使用的技术不同,实时荧光定量PCR可以分为:荧光探针和荧光染料两种方法。现将其原理简述如下: 1. TaqMan荧光探针 TaqMan探针法是高度特异的定量PCR技术,其核心是利用Taq酶的3'→5'外切核酸酶活性,切断探针,产生荧光信号。PCR扩增时在加入一对引物
DNA条形码:鉴别出植物分类的新方法
DNA条形码是利用标准基因片段对物种进行快速和准确鉴定的新技术。加拿大科学家2003年提出这一概念后,DNA条形码已成为生物学领域发展最迅速的学科前沿之一。据中国医学科学院药物研究院药用植物研究所所长陈世林研究员介绍,这种新方法已经在我国中药材鉴定中成功使用。 “就像我们在超市看到的商品条
PCR技术在分子分类学的应用
虽然用核酸序列数据进行分类研究的优点早已被承认,但序列比较数据的积累过 程都是繁琐的。PCR通用引物技术所提供的快速测序法促使分子分类学的范围扩展 到更多的类群。由序列中得出的均一数据为各种类群的生物提供了一个共同的系统发 育框图。序列数据同样也提供了过去的方法所不能提供的分辨率。线粒体DNA的扩增
PCR仪的基本原理与分类
简单的说,PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定
详细介绍PCR仪的4大分类
普通的PCR仪:把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。 梯度PCR仪:把一次性pcr扩增可以设置一系列不同的
详述PCR仪(基因扩增仪)的分类介绍
PCR仪(基因扩增仪)的类型:PCR仪(基因扩增仪)的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则,结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备,下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。1. 水浴式PCR基因扩增仪 水浴式PC
上海应物所发展出基于酸碱调控的室温PCR新方法
近日,中国科学院上海应用物理研究所与清华大学合作,发展了一种新型的离子介导聚合酶链式反应(Ion-Mediated Polymerase Chain Reaction, IM-PCR),通过精确调控溶液pH值(即质子和氢氧根离子),可以在室温下完成PCR扩增,相关结果发表于《德国应用化学》(An
PCR检测遇到外源片段序列未知怎么办?新方法来了!
基因组编辑技术为动植物遗传改良提供了革命性的遗传操作工具。但在基因组编辑过程中,通常需要将外源载体导入生物体细胞内,在基因组编辑完成后,再筛选出不含外源成分的个体。目前,美国、日本、加拿大、澳大利亚、巴西、阿根廷等多个国家已先后出台基因组编辑产品安全管理政策,其中确保没有外源成分是各国基因组编辑
浅析PCR仪的分类、应用及当前市场品牌格局
随着生命科学研究不断的突破性发展,聚合酶链式反应(PCR)技术也得到了大力发展,重要性日渐凸显。这也使得PCR仪成为生命科学研究实验室中不可缺少的一部分。PCR,中文称为聚合酶链式反应,其实是一种DNA的快速扩增技术,PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内
详述PCR基因扩增仪的三种分类简介
PCR基因扩增仪的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则,结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备,下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。PCR基因扩增仪的类型:1. 水浴式PCR基因扩增仪 水浴式PCR基因扩增
PCR根据DNA扩增的目的和检测标准分类
根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。 1. 普通PCR仪 一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是用于简单的、对目的基因退
PCR基因扩增仪四大分类和应用
PCR仪即基因扩增仪,主要是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。PCR仪的原理为利用升温使DNA变性,用限制性内切酶使DNA双链解链,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将
知识分享:PCR仪的原理、分类、常见问题汇总!
一、PCR的基本原理 聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)PCR反应过程与细胞内的DNA复制相似,但PCR的反应体系要简单的多,主要包括DNA靶序列、引物、4种单核苷酸dNTP、耐热DNA聚合酶以及合适的缓冲液体系。 PCR反应过程有以下3个步骤:1、变性
PCR基因扩增仪的原理+分类+操作+常见故障
一、原理 PCR技术的本质是体外核酸扩增,加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复 “变性→退火→引物延伸”过程至25~40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。 二、分类 1
PCR原理分类应用及国内外主要品牌汇总
PCR概念PCR,中文名是聚合酶链反应(基因扩增)基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR是模拟体内DNA复制过程,在体外特异性扩增DNA片段的一种技术。PCR的应用领域:1、遗传病和某些疑难病的诊断2、病原体的检测。某些恶性疾病一般用微生物学、生化
数字PCR技术的胎儿染色体非整倍体无创产前检测新方法
胎儿染色体非整倍体异常是严重的出生缺陷,最常见的包括21-三体综合征(即唐氏综合征,其未干预的综合发病率高达1/750,且随着孕妇年龄增加风险急剧增大)、18-三体综合征和13-三体综合征等。这类疾病将导致新生儿出现智力低下、生长发育迟缓、多发畸形乃至死亡,且尚无有效治疗手段,而产前筛查和诊断可
Talanta:高灵敏和防污染的“准共聚焦”微液滴数字PCR阅读仪
清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室在《分析学家》(Analyst)在线以封底(back cover)发表题为《一种双荧光四分类微液滴数字PCR数据的准确、可靠和自动分类方法——密度分水岭算法》(A density-watershed algorithm (DWA) method for ro
PCR仪根据DNA扩增时升温介质的不同分类
根据DNA扩增时升温介质的不同可以将PCR仪分为:变温铝块式PCR仪、水浴式PCR仪和变温式流式PCR仪。 1. 变温铝块式PCR仪 热源用电阻丝、导电热膜、热泵式珀尔帖半导体元件制作,让带有凹孔的铝块升温,用自来水、制冷压缩机或半导体降温。优点:温度传导快,各管的扩增一致性好;反应管规格一
聚合酶链式反应(PCR)扩增仪的分类
普通的PCR仪一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,又叫传统的PCR仪。用途:主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。(1)梯度PCR仪一次PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常为12种温度梯度的普通PCR仪。用途:研究未知DNA退火温度的扩增。(2)
基于数字PCR的甲状腺乳头状癌BRAF-V600E突变检测新方法
近日,华山医院关明教授团队在《Clinica Chimica Acta》杂志发表题为”Detection of BRAF V600E mutation in fine-needle aspiration fluid of papillary thyroid carcinoma by drop
Troubleshooting-for-PCR-and-multiplex-PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
PCR简介/PCR仪
PCR的要素基本的PCR须具备PCR仪图册1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。 PCR仪工作原理利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制
多重PCR(Multiplex-PCR)
一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
重叠PCR—overlap-PCR
1、简介 重叠PCR也是基本的PCR原理:变性-退火-延伸。不同的是在重叠PCR过程是两个或者几个片段重叠延伸之后,再进行指数扩增的PCR过程。 2、基本原理*步:PCR产生两个或者几个片段,这几个片段之间必须有重叠区。 第二步:以两个片段为例,见上图,*步产生的两个片段,A D链之间有互补,B
多重PCR(Multiplex-PCR)
一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
普通PCR梯度PCR-原位PCR-荧光定量PCR仪的区别
普通PCR仪: 一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪,也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。如;(ABI 2720) 梯度PCR仪: 一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称
检测谷胱甘肽新方法
谷胱甘肽(glutathiose,r-glutamyl cysteingl +glycine,GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成。存在于几乎身体的每一个细胞。谷胱甘肽能帮助保持正常的免疫系统的功能,并具有抗氧化作用和整合解毒作用,半胱氨酸上的巯基为其活性基团(