植物体内抗坏血酸氧化酶活性的测定实验
实验方法原理抗坏血酸氧化酶在有氧情况下,能氧化抗坏血酸成脱氢抗坏血酸,同时促进其氢与空气中的氧结合成水。抗坏血酸氧化酶的测定是在该酶的最适pH及适宜的温度下,向反应瓶中加入一定量的底物(抗坏血酸)及酶提取液,让酶作用一段时间,然后测定底物被消耗的数量来计算酶的活性。抗坏血酸被消耗的量,可用碘液滴定剩余的抗坏血酸来测定。反应式如下:上述式中I2来自以下反应:KIO3 + 5KI + 6HPO3 --→ 3I2 + 6KPO3 + 3H2O实验材料水稻黄化幼苗 ......阅读全文
TNF的生物活性测定
1. 材料和试剂1.1培养液A :DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)。1.2培养液B:DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)和终浓度为0.7--1μg/ml的放线菌素D。1.3 L929细胞株:鼠结缔组织纤维母细胞,来源于22天雄性C3H鼠皮下组织。1.4 结晶紫染色溶液:0。05%
因子Ⅶ促凝活性测定
因子Ⅶ促凝活性测定 Fedor Ⅶ coagulation activity (F Ⅶ:C ) 枸橼酸钠抗凝静脉血2ml 【正常参考值】 80.6 ~ 145.8 % 【异常结果分析】 因子Ⅶ活动度减低见于先天性因子Ⅶ缺乏症、后天获得性缺乏症,、后者见于口服抗凝剂、阻塞性黄疸、DIC
因子Ⅸ促凝活性测定
因子Ⅸ促凝活性测定 Factor Ⅸ coagulation activity (Ⅸ :C ) 静脉血4ml,其中2ml以枸橼酸钠抗凝,2ml不抗凝。 【正常参考值】 一期法 98.08 ~ 30.32 % 【异常结果分析】 增高:高凝状态或血栓栓塞性疾病,如心肌梗塞、脑血栓形成、妊
酶制剂活性测定方法
饲料中酶制剂活性的高低可通过实验室检测和动物饲养试验来确定。实验室可以通过模拟饲料加工及消化道内各种因素对酶的作用后测定酶活来检测酶制剂的活性,但测定饲料生产过程中的酶活性在实验室很难进行,首先是酶在饲料中的活性很低;第二,定量分析法因酶制剂牢固地粘附于饲料上,往往难于完全将酶提取。因此,实验室测定
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的
水活性的测定方法
水分活度是样品的固有性质,环境平衡相对湿度是与样品相平衡的大气性质,它们只是在数值上相等:同时,少量样品(不于1g)与环境之间达到平衡需要相当长的时间,而大量的样品在温度低于50°C时,则几乎不可能与环境达到平衡。样品的水分活度与水分含量之间的关系非常重要因此常常要测定某条件下食品的Aw,这可以通过
TNF的生物活性测定
1. 材料和试剂1.1培养液A :DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)。1.2培养液B:DMEM培养液添加10%的胎牛血清(FBS)和终浓度为0.7--1μg/ml的放线菌素D。1.3 L929细胞株:鼠结缔组织纤维母细胞,来源于22天雄性C3H鼠皮下组织。1.4 结晶紫染色溶液:0。
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影
纤溶活性测定汇总
纤溶活性的测定主要有:血浆鱼精蛋白副凝固试验(3P试验)、血浆D-二聚体测定、血清纤维蛋白降解产物(FDP)测定、凝血酶时间(TT)及甲苯胺兰纠正试验、血浆纤溶酶原、血浆组织纤溶酶原活化剂测定、血浆纤溶酶原活化抑制物测定、血浆α2纤溶酶抑制物测定等几种。临床上较长应用的有3P试验、FDP测定和
血清补体总活性测定
1、原理补体能使抗体致敏的羊红细胞发生溶血反应,根据溶血程度可测定补体总活性。以溶血百分率作纵坐标,相应的血清量为横坐标绘图,可知在50%溶血附近补体的量与溶血程度呈直线关系。因此以50%溶血作为终点较以100%溶血作为终点更为敏感。故称为50%溶血试验,即 CH50(50%complement
酶活性的测定方法
一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力,因为此时干扰因素较少,速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间,可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有,变化较大,而底物往往过量,其变化不易测准,所以多用产物来测定
凝血因子活性测定
凝血因子活性测定介绍: 凝血因子在血液凝固过程中,起着非常重要的作用。测定各个凝血因子的活性,有助于判断血友病的类型、血友病的轻重程度以及某些病理情况下的凝血状况。凝血因子活性测定正常值: 因子Ⅱ:C 、因子Ⅴ:C 、因子Ⅶ:C 、因子Ⅶ:C 、因子Ⅸ:C、因子Ⅹ:C、 因子Ⅺ:C、因子
酶活性测定的方式
酶促反应速度的测定可采用两种方式: 一、测定完成一定量反应所需的时间; 二、测定单位时间内的酶促反应量。前者称为终点法,后者称为动力学法。 终点法 该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。 其
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影响
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验4
测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤准备下列材料:含有未知浓度mp] ATP的细胞裂解物样品10mg/ml激酶底物肽渐夜(Calbiochem)0.5mraol/L cAMP 溶液 I、Calbiochem)cA-PrK (Calbiochem)cA-PrK分析缓冲液lmol/L DTT储存液(
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验2
用发光分析定量测定ATP实验步骤Sigma公司提供了 -种测定MP浓度的非常简单,灵敏&又方便的方法。其原理是用荧光素酶从荧光素和ATP中产生光。在荧光素/荣光素酶浓度恒定的情况下,可以绘制一条不同ATP浓度时产光量变化的标准曲线,因此可以很容易地对来自细胞裂解物的未知样品进行定量。然而,如果要测定
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验1
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP实验步骤1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心:高氣酸■
用棉花幼苗外植体法测定脱落酸的活性实验
实验方法原理脱落酸能增强果胶酶和纤维素酶的活性,引起离层产生,导致脱落。在一定浓度范围内,脱落率与脱落酸浓度成正比,脱落时间与脱落酸浓度成反比。实验材料棉花幼苗试剂、试剂盒脱落酸溶液仪器、耗材手术剪刀单面刀片烧杯镊子培养皿注射器石英砂蛭石脱脂棉琼脂实验步骤一、材料与设备棉花幼苗手术剪刀或单面刀片,烧
用棉花幼苗外植体法测定脱落酸的活性实验
实验方法原理 脱落酸能增强果胶酶和纤维素酶的活性,引起离层产生,导致脱落。在一定浓度范围内,脱落率与脱落酸浓度成正比,脱落时间与脱落酸浓度成反比。实验材料 棉花幼苗试剂、试剂盒 脱落酸溶液仪器、耗材 手术剪刀单面刀片烧杯镊子 培养皿注射器石英砂蛭石脱脂棉琼脂实验步骤 一、材料与设备棉花幼苗手术剪刀或
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验3
用高效液相层析定量测定ATP实验步骤1)准备下列材料:Whatman Partisphere SAX高效液相层析柱和保护柱线性梯度洗脱液设定在254nm的紫外线监测仪装配好的0.2;mi Whatman滤膜和滤器0.2^?过滤的Milli-Q水0.2/im S@_0,:5m〇l/LNH4H2ro4
用棉花幼苗外植体法测定脱落酸的活性实验
实验方法原理脱落酸能增强果胶酶和纤维素酶的活性,引起离层产生,导致脱落。在一定浓度范围内,脱落率与脱落酸浓度成正比,脱落时间与脱落酸浓度成反比。实验材料棉花幼苗 试剂、试剂盒脱落酸溶液
植物体内脱落酸、赤霉素的分离和测定
在研究植物生命活动过程中,常常需要准确了解某一激素的含量以及各激素间的比例。因此,植物内源激素的提取分离和测定是植物生理学 实验技术中极其重要的内容。本实验以ABA和GA为例,介绍激素的提取、分离及测定的基本原理和方法。 一、原理 利用脱落酸(abscisic acid,ABA)和赤霉素(g
植物体内硝酸还原酶活力的测定(离体法)
【原理】 硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐: 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下: 生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分
植物体内硝酸还原酶活力的测定(活体法)
【原理】硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐:产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下:生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活
植物体内蛋白质氮测定的原理和步骤
植物体内的氮化物可分为蛋白质氮和非蛋白质氮两大类。二者的含量和比例,随着植物的生理状况及环境条件的不同而发生变化。所以,测定两类氮化物含量的变化动态,对研究植物在不同情况下,氮素的吸收、运转和代谢规律,以及确定农产品的品质、营养价值等具有一定意义。一、测定原理在进行氮化物系统测定时,首先要将各类氮化
单胺氧化酶活性测定
实验材料 大鼠试剂、试剂盒 磷酸钠缓冲液蒸馏水盐酸苯乙胺甲苯5-羟色胺双草酸盐β-乙基-苯乙胺盐酸盐苯-醋酸乙酯闪烁液仪器、耗材 制冰机水浴锅试管试管架计数瓶离心机离心管移液枪漩涡振荡仪
细胞活性检测代谢增殖测定
MTT检测法活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲基亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标仪490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出活细胞数量。在一定细胞数范围内,吸
NK细胞活性测定:LDH法
实验方法原理活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上
脂肪酶的活性测定
方法:⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最
脂肪酶活性测定方法
方法:1、粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。2、实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解