层析实验冷柜使用说明手册
一、 仪器用途及特点:层析冷柜是专为生化层析实验而研制的特殊用途冷柜。本装置制冷系统设计合理、降温快、噪音低。温度控制系统的测温和控温均为数字显示,控温精度高。设有声光报警系统,保证样品安全。本设备内设施齐全。ZX-CXG型有二层可上下移动的搁板,便于内部仪器的放置。有两个固定立柱、一个消毒灯、一个照明灯和两个电源插座。ZX-CXG在不做层析实验时,可用其替换层析装置,将层析柜改作冷藏柜。ZX-CXG-800型为单开门层析冷柜,搁板间距可根据需要调节。冷柜两侧各有一个通孔,以满足实验中的特殊需要。冷柜下设脚轮,移动方便。本装置亦可用于其他需要低温环境的实验和物品储藏。二、 主要技术性能:使用温度:+1℃~+10℃测温精度:±0.5℃控温灵敏度:0.1℃内容积: ZX-CXG-250系列:250L 600*500*1200(mm) &......阅读全文
胰岛素亲和层析实验
试剂、试剂盒部分纯化的胰岛素受体NaCl胰岛素琼脂糖溶液 F溶液 G溶液 H仪器、耗材一次性小型塑料柱CentriconTM 浓缩器银染试剂盒实验步骤材料与设备部分纯化的胰岛素受体,得自 WGA-琼脂糖柱层析(见本单元实验 3)NaCl(5mol/L)胰岛素琼脂糖(~2 ml 预装胶)(SigmaC
蛋白质凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析(也叫分子筛)是利用具有多孔网状结构的颗粒的分子筛作用,根据被分离样品中各组分相对分子质量大小的差异进行分离的技术。 凝胶过滤层析(GF)法又称为排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖
亲和层析实验:常规方法(四)
2.配基吸附对于多肽、蛋白质或核酸,通常采用的共价吸附是, 通过胺反应将配基上的氨基吸附在树脂表面。溴化氰活化表面与伯胺发生反应形成亚胺碳酸盐是最常见的胺反应吸附。最典型的伯胺是赖氨酸侧链(Hermanson,1992;PorathetaU1%7)(详见第 28 章)。这种活化形式的优点在于可以使用
金属螯合亲和层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 IPTGNiSO4蛋白酶抑制剂MCAC-EDTATriton仪器、耗材 层析柱转子实验步骤 1. 接种含以pET载体表达带组氨酸尾融合蛋白的大肠扦菌BL21(DE3)pLyaS菌株于10 ml M9ZB/氨苄青霉素/氯霉素培养基。于37℃摇荡培养过夜。2. 转接1
胰岛素亲和层析实验
胰岛素亲和层析实验 试剂、试剂盒 部分纯化的胰岛素受体 NaCl 胰岛素琼脂糖
金属螯合亲和层析实验
天然MCAC纯化带组氨酸尾的可溶性融合蛋白 变性条件下用MCAC纯化带组氨酸尾的不溶性融合蛋白 实验材料 蛋白质
薄层层析(TLC)实验操作步骤
薄层色谱(TLC )是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。流动相则是一种极性待选的溶剂。在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用
亲和层析实验:常规方法(二)
二、配基的选择选择合适的配基,需要对配基和靶分子之间的天然相互作用有一定的认知及理解。靶分子与配基的相互作用必须是特异性结合,并且在不同的结合和洗脱条件下均应该稳定。此外,制订亲和纯化的方案时,需着重考虑能否购买到商品化配基,还是需要从头研制配基和介质。后者的成功在很大程度上取决于对蛋白质结构和相互
亲和层析实验:常规方法(一)
一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。亲和介质
亲和层析实验:常规方法(三)
6.仿生配基大部分的亲和层析配基是天然存在的,其优点在于具有高度选择性和强结合能力,但也存在某些缺点。这种配基稳定性低,需要进行纯化,使用过程中批间差异大,易被其他生物分子污染,对灭菌方法敏感,并且成本高。为了克服这些局限性,加速亲和层析在治疗性蛋白质纯化中的应用, 仿生型配基 (biomime
层析柜的工作原理介绍
层析柜是专为生化层析实验而研制的特殊用途低温柜,也可用于其他需要低温环境的实验,或用于物品冷藏。经过科学设计,冷柜总高度一般不超过2米,便于进出房间和电梯。 层析柜的工作原理: 生物分子间存在很多特异性的相互作用,它们之间都能够专一而可逆的结合,这种结合力就称为亲和力。
凝胶过滤(分子筛层析或凝胶层析)原理和实验方法
凝胶层析又称为分子筛层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广,商品名是sephadex型号很多,从G10到G200,它的主要应用范围是:①分级分离各种抗原与抗体;② 去掉复合物中的小分子物质。如除盐、荧光素和游离的放射
PEI转染手册
使用方法1. 接种细胞:用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。转染前 18-24 小时进行细胞的铺板,以便在转染时,贴壁细胞的密度大约在 80%左右。注:培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物1)转染前将所有试剂置于室温 10 分钟。下面,以转染 24
PCR佐剂手册
A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the yield, specificity and consistency of PCR reactions. Whilst these addit
测序污染有多危险,如何防范与去除[实验手册]
一些研究表明,目前已经公布的基因组存在多种污染,随着这个问题越来越突出,我们需要找出方法来应对 生物通报道:Supratim Mukherjee在进行数据分析的时候,发现数以百计的微生物基因组中会重复出现同一种噬菌体序列,这令他感到很惊讶。这位来自劳伦斯伯克利国家实验室的生物信息学家最开始是为
实验室常用颚式破碎机维护手册
一、设备介绍EP-2型 100×60鄂式破碎机,试用于粗碎、中碎煤块或其他坚硬物料,主要供煤炭、矿山、冶金及化工等部门实验室使用。二、边使用边保养 使用前,在注油杯,注入适量黄油,注意检查各紧固件有无松动,空运转无不正常现象后,才开始给料。 在使用时,启动电机,将直径不大小于60毫米的煤
实验室仪器平行浓缩仪的日常保养手册
一、平行浓缩仪的介绍。 平行浓缩仪又称为氮气浓缩装置,氮气吹扫仪,氮吹浓缩仪,用于液相、气相及质谱分析中的样品制备,采用国际认可技术,氮吹仪通常将氮气吹入加热样品的表面进行样品浓缩,具有省时、操作方便、容易控制等到特点。广泛应用于农残分析、商检、食品、环境、制药、生物制品等行业。 二、平行浓
实验室恒温摇床的安全操作手册
摇床是一种常用的实验室设备,是一种培养,制备生物样品的生化仪器,广泛用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养、发酵、杂交、生物化学反应以及酶和组织研究等。同时也是植物、生物、微生物、遗传病毒、医学、环保等科研、教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备。 实验室摇床安全操作须知 您
实验室恒温摇床的安全操作手册
实验室恒温摇床的安全操作手册摇床是一种常用的实验室设备,是一种培养,制备生物样品的生化仪器,广泛用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养、发酵、杂交、生物化学反应以及酶和组织研究等。同时也是植物、生物、微生物、遗传病毒、医学、环保等科研、教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备。
离子交换高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 Tris·ClNaCl磷酸钠缓冲液仪器、耗材 交换柱实验步骤 1. 在使用IEX柱前,依次以序列溶液洗柱去除柱上吸附的蛋白质:10倍柱床的已脱气水和10倍柱床的高盐缓冲液,对聚合体IEX柱,洗柱液在8 ~10,对硅胶类柱,洗柱液pH在7~8。2. 在室温平衡IE
离子交换层析法浓缩蛋白实验
实验方法原理 离子交換层析可用于浓缩蛋白质溶液。因为大多数蛋白质的等电点均低于 8, 所以它们可在 pH 值为 8 的弱离子强度溶液中被阴离子交换树脂吸附。用离子强度大的溶液可简单的将它们洗脱下来,达到浓缩的目的。
糖的硅胶G薄层层析实验
薄层层析 实验方法原理 硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的
批量层析法浓缩蛋白质实验
实验方法原理 批量层析的特点在于层析用树脂不放在柱中,而是放在烧杯或瓶子的容器中;通过搅拌或摇动而混内层析;以过滤或离心的办法分出层析液。实验材料 蛋白质溶液仪器、耗材 离子交换层析装置实验步骤 1. 在烧杯或锥形瓶中平衡树脂,不断搅拌以促进平衡;2. 倾泻掉大部分溶液,保留的溶液置要使树脂能轻松的
批量层析法浓缩蛋白质实验
实验方法原理批量层析的特点在于层析用树脂不放在柱中,而是放在烧杯或瓶子的容器中;通过搅拌或摇动而混内层析;以过滤或离心的办法分出层析液。实验材料蛋白质溶液仪器、耗材离子交换层析装置实验步骤1. 在烧杯或锥形瓶中平衡树脂,不断搅拌以促进平衡;2. 倾泻掉大部分溶液,保留的溶液置要使树脂能轻松的搅拌;3
钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验
钙调蛋白的苯基-Sepharose 层析实验 试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分 CaCl2(固体)
钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验
试剂、试剂盒含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤材料与设备含钙调蛋白的组分,从 DEAE 柱收集后合并所得(见实验 4)透析袋(标称截留分子量
分子排阻高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SE缓冲液仪器、耗材 层析柱实验步骤 1. 用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂,流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2. 注射100 μl 缓冲液进行一次空白样品的假层析,检测器
糖的硅胶G薄层层析实验
实验方法原理 硅胶 G 是一种添加了粘合剂的硅胶粉,约含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上,利用它对各种物质的吸附能力不同,再用适当的溶剂系统展层,使不同的物质得以分开,使用显色剂显色,得到不同的 Rf 值。糖在硅胶 G 薄层上的移动速度与糖的分子量和羟
离子交换层析法浓缩蛋白实验
实验方法原理离子交換层析可用于浓缩蛋白质溶液。因为大多数蛋白质的等电点均低于 8, 所以它们可在 pH 值为 8 的弱离子强度溶液中被阴离子交换树脂吸附。用离子强度大的溶液可简单的将它们洗脱下来,达到浓缩的目的。实验材料蛋白质溶液仪器、耗材离子交换树脂层析柱实验步骤1. 准备离子交换树脂,装配层析柱
叶绿体色素的分离纸层析法实验
叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。实验方法原理叶绿体色素中的各种色素化学结构