蛋白中放射性物质掺入率测定实验
实验方法原理 实验材料 样品试剂、试剂盒 预冷三氯乙酸乙醇乙醚仪器、耗材 Whatman GF-C玻璃纤维膜多功能真空仪(Fisher)20 ml 闪烁瓶闪烁计数器实验步骤 1. 加入 20 μl 预冷的 10% TCA 停止反应,充分混匀,冰浴 10 min 以沉淀蛋白质。2. 将样品点在真空仪中的 Whatman GF-C 玻璃纤维膜上,待样品通过膜后用 500 μl 预冷的 5% TCA 洗样品管,并将洗后的液体也点在膜上。3. 用 5 ml 5% 的预冷 TCA 溶液洗膜 4 次,用 10 ml 95% 的乙醇洗一次,再用 10 ml 乙醚洗 3 次,使膜干燥。4. 将干燥后的膜放入 20 ml 闪烁瓶,在闪烁计数器中用契仑科夫(Cerenkov)射线计数。注意事项 1. 乙醚是易燃品,因此带乙醚操作时必须在通风橱中进行,并远离火源和热源。乙醚洗液应被妥善处理。......阅读全文
常在实验中作为活化剂物质有哪些?
作为活化剂使用的有:无机酸类、碱类,金属阳离子和碱土金属阳离子,硫化物类及有机化合物类等。
实验室中易制毒的物质有那些
实验室中易制毒的化学试剂一般是第二类和第三类,第二类主要有:1、苯乙酸 2、醋酸酐 3、三氯甲烷 4、乙醚 5、哌啶;第三类主要有:1、甲苯 2、丙酮 3、甲基乙基酮 4、高锰酸钾 5、盐酸 6、硫酸.
胰蛋白酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 胰蛋白酶
蛋白质含量的测定实验
实验方法原理 FOLIN 酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应, 试剂乙在碱性条件下极不稳定, 易被酚类化合物还原成蓝色(蛋白质中的酚基将磷钼酸-磷钨酸还原成蓝色复合物)。在一定条件下, 蓝色强度与蛋白质的量成正比, 范围约在25~250 μg/ ml 蛋白质浓
蛋白质紫外分光测定实验
蛋白质紫外分光测定实验 实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。
脑脊液蛋白质总量测定实验
实验方法原理饱和硫酸铵可以沉淀球Pr.正常脑脊液中球Pr含量很低.故现阳性结果,若球Pr增多,则Ross-jones试管阳性,除去球Pt后再以乙酸沸法则ALB(白Pr).实验材料脑脊液试剂、试剂盒饱和硫酸铵溶液乙酸实验步骤一、实验试剂:l、饱和硫酸铵溶液,硫酸铵85g加蒸馏水至100ml即得.2、0
蛋白质的定量测定实验
试剂、试剂盒Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材微量滴定板分光光度计或酶联仪实验步骤材料与设备牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液)Bradford 试剂(CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)分光光
蛋白质紫外分光测定实验
蛋白质紫外分光测定实验 实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处
蛋白质紫外分光测定实验
实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。 由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但
蛋白质的定量测定实验
试剂、试剂盒 Bradford 试剂 牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 Tris-缓冲盐溶液 仪器、耗材
胃蛋白酶的测定实验
实验材料胃蛋白酶试剂、试剂盒血红蛋白三氯乙酸HCl仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」1.样品和对照组的处理:5 min,37℃2. 离心 5 min3. 记录 280 nm 吸收值4. 计算展开 注意事项其他试剂:2% 血红蛋白(在 100 ml 水中溶解 2.5 g 牛血红
金属硫蛋白的测定实验
镉-血红素法 实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。 实
胰蛋白酶的测定实验
实验材料胰蛋白酶试剂、试剂盒磷酸钾N'-苯甲酰-L-精氨酰对硝基苯胺仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」25℃,在 405 nm 测定吸光值,ε405=9620 l/(mol·cm)。注意事项其他试剂:0.3 mol/L 磷酸钾,pH 8.020 mool/L N
蛋白质紫外分光测定实验
由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。 由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但核酸的最大吸收峰在
胃蛋白酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 胃蛋白酶试剂、试剂盒 血红蛋白三氯乙酸HCl仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」1.样品和对照组的处理:5 min,37℃2. 离心 5 min3. 记录 280 nm 吸收值4. 计算注意事项 其他 试剂:2% 血红蛋白(在 100 ml 水中溶解
蛋白质纯度测定实验(一)
在评价样品纯度之前,首先需要鉴定待测杂质的类型,如核酸、碳水化合物、脂质、无关蛋白质、同工酶类、失活蛋白质,进而确定在特定溶液条件中, 能够区分假定杂质和目标蛋白质的理化特性 (化学分析或物理特征)。而纯度则是指待测杂质含量低于某个特定水平。需要注意的是,上述说明中并没有要求描述杂质的性质。
金属硫蛋白的测定实验
实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。实验材料 牛血红蛋白试剂、试剂盒 氯化镉Tris-HCl蔗糖仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 一、实验步骤1. 组织按1:4(w/v)加入0.25 mol/l 蔗糖溶液,制备匀浆,18 000 g离心20 m
脑脊液蛋白质总量测定实验
实验方法原理 饱和硫酸铵可以沉淀球Pr.正常脑脊液中球Pr含量很低.故现阳性结果,若球Pr增多,则Ross-jones试管阳性,除去球Pt后再以乙酸沸法则ALB(白Pr).实验材料 脑脊液试剂、试剂盒 饱和硫酸铵溶液乙酸实验步骤 一、实验试剂:l、饱和硫酸铵溶液,硫酸铵85g加蒸馏水至100ml即得
蛋白质纯度测定实验(二)
方法制样的方法根据所选用电泳方法的性质而定。读者可参考本卷其他章节中有关非变性凝胶电泳和等电聚焦电泳的讨论。最常用的 SDS 凝胶电泳是蛋白质纯度检测的「第一线」(front-line) 方法。由于通常纯度评价是非定量的,因此不需要关心诸如极端大小分子的非线性迁移、蛋白质修饰造成的迁移异常以
蛋白质的定量测定实验
试剂、试剂盒 Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材 微量滴定板分光光度计或酶联仪实验步骤 材料与设备牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液)Bradford 试剂(CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)
蛋白质紫外分光测定实验
实验方法原理由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但核酸的最大吸收峰在260nm处
胃蛋白酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 胃蛋白酶
胰蛋白酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 胰蛋白酶试剂、试剂盒 磷酸钾N'-苯甲酰-L-精氨酰对硝基苯胺仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」25℃,在 405 nm 测定吸光值,ε405=9620 l/(mol·cm)。注意事项 其他 试剂:0.3 mol/L 磷酸钾,pH 8.02
细菌胞外蛋白含量测定实验
(一)实验原理这种蛋白质测定法是最ling敏的方法之一.过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.这两种显色
蛋白质含量的测定实验
FOLIN酚法 考马斯亮蓝法 实验方法原理 FOLIN 酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应, 试剂乙在碱性条件下极
蛋白质紫外分光测定实验
实验方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此蛋白质具有吸收紫外线的性质,吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内,蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量呈正比关系,可用作定量测定。由于核酸在280波长处也有光吸收,对蛋白质的测定有干扰作用,但核酸的最大吸收峰在260nm
粮食孔隙率测定中容重器的使用
粮食的孔隙率测定对于粮食的流通具有非常重要的意义,孔隙率的大小,通常根据散粒物料的容重、种子相对密度与孔隙率的关系计算得出,也可以根据理想气体状态方程制作的散粒物料孔隙率测定仪进行测定。因此使用计算法测定粮食孔隙率时就需要使用容重器测定粮食的容重。 在粮食的储藏过程中,粮食孔隙率的测定工作
粮食孔隙率测定中容重器的使用
粮食的孔隙率测定对于粮食的流通具有非常重要的意义,孔隙率的大小,通常根据散粒物料的容重、种子相对密度与孔隙率的关系计算得出,也可以根据理想气体状态方程制作的散粒物料孔隙率测定仪进行测定。因此使用计算法测定粮食孔隙率时就需要使用容重器测定粮食的容重。 在粮食的储藏过程中,粮食
DNA结合蛋白的磷酸化研究
磷酸化化学计量的确定及磷蛋白形成动力学的测定l 磷酸化作用化学计量的确定1.在冰上建立下列反应混合液:Tris-HCl(50mmol/L;pH8.0)/MgCl2(10mmol/L) 250μlATP(10mmol/L)
磁性金属物测定仪测定茶叶中磁性物质方法的研究
以前曾出现过内地某进出口公司一批销往德国的绿茶, 因进口国检出茶叶中的磁性物质含量较高而被退回。这也说明了我国茶叶出口除了受到农药残留和重金属元素等影响以外, 磁性物质又将成为茶叶出口受阻的一个新的因素。茶叶中的磁性物质也可以使用磁性金属物测定仪来进行测定。 而近年来,我国在国