DNA双链断裂检测——变压场凝胶电泳(GFGE)
DNA双链断裂与细胞死亡的关系更为密切。变压场凝胶电泳是采用将细胞包埋在低熔点琼脂糖凝胶中,通过蛋白酶、去污剂等渗入凝胶中融解细胞、去蛋白,纯化细胞DNA,再通过梯增电压进行琼脂糖凝胶电泳,结合DNA解旋荧光测定(FADU)法和检测DNA双链断裂。 1、主要试剂及配制方法: (1)蛋白酶K,SDS,低熔点琼脂糖。 (2)配制方法: 细胞缓冲液(A液)。0.25mol/L NaCl + 10mmol Na2HPO4 + 1mmol/L MgCl2,pH7.2. 细胞裂解液(B液)。9mol/L脲 + 10mmol/L NaOH + 2.5mmol/L环烷二胺四乙酸 + 0.1%SDS。 碱性变性液I(C液)。B液 + 0.2mol/NaOH,体积比为45:55. 碱性变性液I(D液)。B液 + 0.2mol/NaOH,体积比为40:60. 抗变性液(F液)。1ug/L溴化乙锭 + 13.3mmol/......阅读全文
细胞周期信号通路MRE11A基因的临床解释
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
MRE11A基因的结构及作用
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
浙江大学Cell子刊解析DNA损伤修复
维持基因组DNA的稳定对于细胞存活和肿瘤抑制至关重要。浙江大学生命科学研究院的科学家们对DNA修复机制中的一个重要复合物进行了研究,阐述了该复合体组装和发挥作用的结构基础。文章于三月十三日发表在Cell旗下的Cell Reports杂志上。 细胞基因组的完整性,持续受到多种内外因素的挑
DNA损伤修复信号通路MRE11基因的临床解释
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
MRE11基因的结构特点及生理功能
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
PPP4R2基因的结构特点和主要作用
该基因编码的蛋白质是丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶4复合物的调节亚单位。这种复合物除了能有效修复DNA双链断裂外,还参与中心体微管的组织和剪接体snrnp的加工已经发现了一些编码不同亚型的转录变体。
PPP4R2基因的结构特点和主要作用
该基因编码的蛋白质是丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶4复合物的调节亚单位。这种复合物除了能有效修复DNA双链断裂外,还参与中心体微管的组织和剪接体snrnp的加工已经发现了一些编码不同亚型的转录变体。
PPP4R2基因的结构特点和主要作用
该基因编码的蛋白质是丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶4复合物的调节亚单位。这种复合物除了能有效修复DNA双链断裂外,还参与中心体微管的组织和剪接体snrnp的加工已经发现了一些编码不同亚型的转录变体。
PPP4R2基因编码的功能和结构描述
该基因编码的蛋白质是丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶4复合物的调节亚单位。这种复合物除了能有效修复DNA双链断裂外,还参与中心体微管的组织和剪接体snrnp的加工已经发现了一些编码不同亚型的转录变体。The protein encoded by this gene is a regulatory subun
“基因魔剪”准确性低于预期
英国《自然·生物技术》杂志16日在线发表了一项重要研究:有“基因魔剪”之称的CRISPR-Cas9基因组编辑技术,在靶点附近引起的DNA删除或重排,比科学家此前预期得要严重。该发现意味着,研究人员必须密切观察基于CRISPR-Cas9疗法对编辑后细胞造成的序列变化。 目前,CRISPR-Cas
没有放疗仪器如何做放疗研究?
肿瘤治疗的三大手段,手术、化疗、放疗。手术,每个肿瘤外科医生天天都在手术台上进行研究。化疗,在三大手段中目前是临床基础科研领域研究最多的地方。放疗,临床基础研究总在不温不火中进行。原因是啥呢。听放疗科医生介绍,其实从临床角度来说,不少肿瘤治疗,采用放疗比手术和化疗效果好。季博在这里不展开讨论他们的临
这一病症为何最终引发心脏病?同济团队有新发现
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/11/512477.shtm儿童早衰症患者为何表现出严重的心脏疾病?又是何种原因导致心脏病变发生?昨天(北京时间11月16日),同济大学生命科学与技术学院、附属第一妇婴保健院毛志勇团队和同济大学生命科学与技术学
美科学家揭示DNA独特修复机制
据《实验室管理人》杂志在线版近日消息,美国科学家报告称已揭示了细胞是如何修复双链断裂这样严重的DNA损伤。这种独特的修复机制,或将对基因突变等遗传学研究提供更多的解释。研究论文发表在近期英国《自然》杂志上。 一直以来,科学家们发现,当由于氧化、电离辐射、复制错误和某些代谢产物导致染色体的双
SETMAR基因的结构特点和主要功能
该基因编码一个融合蛋白,该蛋白包含一个N-末端组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶结构域和一个C-末端水手转座酶结构域编码蛋白与DNA结合,参与DNA的非同源末端连接和双链断裂修复该蛋白的集合结构域部分特异性地甲基化组蛋白H3赖氨酸4和36这种基因在灵长类动物中只作为一个融合基因存在,其他生物缺乏水手的领域。
MSH4基因的结构特点和生理作用
这个基因编码一个dna错配修复muts家族的成员。该成员是一种减数分裂特异性蛋白质,不参与DNA错配纠正,但在减数分裂I时需要互惠重组和同源染色体的适当分离。该蛋白和msh5形成一个异二聚体,该异二聚体与Holliday连接点及其发育前体特异结合,从而激发adp-atp交换,稳定了减数分裂双链断裂修
基因编辑到底是什么
嗨~来看点更专业的回答吧 ♪(・ω・)ノCRISPR/Cas基因编辑系统 CRISPR/Cas(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas)系统是目前被广泛运用的基因编辑系统,其原理是由CRISPR转录产生的
对革命性抗癌药物PARP抑制剂产生耐药性-竟然因为“它”!
一项由剑桥大学的研究人员完成的最新研究发现一种新的蛋白复合物也许可以解释为什么有些病人对于新的革命性抗癌药物(如PARP抑制剂)产生耐药性。图片来源:CC0 Public Domain BRCA1缺陷会引起乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和其他癌症,同时也使这些肿瘤对于PARP抑制剂高度敏感。为了研究
北京基因组所等揭示REV1在DNA损伤应答中的功能
REV1是真核生物一种特殊的DNA聚合酶,其可以作为一个有效靶标用于肿瘤治疗,降低REV1水平不仅能增强肿瘤细胞对化疗的敏感性,还能有效降低肿瘤细胞耐药性的产生。前期研究显示REV1能参与跨损伤DNA合成并引发基因组突变。最近一些研究发现,在出芽酵母、鸡DT40细胞、黑腹果蝇细胞及人类细胞中RE
以双链-DNA-为模板的体外诱变:用-DpnⅠ选择
实验材料 带 hsdR17 基因型的感受态大肠杆菌菌株 试剂、试剂盒 ATP 含有四种 dNTF 的混合溶液
用-PCR-来制备编码随机肽的双链-DNA-文库实验
试剂、试剂盒 限制性内切酶和缓冲液 灭菌双蒸水 Tris-HCl 生物素标记的 PCR 引物 仪器、耗材
用-PCR-来制备编码随机肽的双链-DNA-文库实验
试剂、试剂盒 限制性内切酶和缓冲液灭菌双蒸水Tris-HCl生物素标记的 PCR 引物仪器、耗材 链霉抗生物素蛋白磁性珠琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂灭菌双蒸水(ddH20)10 mmol/LTris-HCl,pH8.02. 酶和酶缓冲液限制性内切酶和缓冲液
用-PCR-来制备编码随机肽的双链-DNA-文库实验
使用合成的寡核苷酸构建文库时,PCR 有两个重要的作用。第一,用与特定侧翼序列退火的引物来扩增文库,仅用少量的不同模板,就可以得到大量的 PCR 产物。第二,若要产生文库 DNA 的复杂互补链,PCR 合成法是有效的方法。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒限制
四种抗双链DNA抗体的检测方法的比较
目前,抗双链DNA抗体的检测方法无非包括下列几种,IFA、ELISA、LIA和RIA。IFA=间接免疫荧光法,该方法检测抗双链DNA抗体的特异性比较高,但敏感度差。当然试剂成本相对比较便宜。但用来检测抗体滴度从而监测病情恐怕不是很合适,原因是该方法在结果判读方面主观性太强,没有标准可以参考。LIA=
利用改进的CRISPR/Cas9系统高效和特异性地实现单碱基突变
在一项新的研究中,利用一种引入DNA单个核苷酸变化的脱氨酶,来自日本神户大学的研究人员构建出一种改进的CRISPR/Cas9工具,从而避免产生有害的双链断裂,使得利用CRISPR/Cas9技术引入的附带突变最小化,而且也不需要加入DNA模板。相关研究结果于2016年8月4日在线发表在Scienc
SIRT6基因高效的DNA修复功能可以延长人们的寿命?
几个世纪以来,探险家们一直梦想着能有不老泉,它的泉水具有治疗作用,能使老年人恢复活力,并无限期地延长寿命。 然而,在一项新的研究中,来自美国罗切斯特大学的研究人员发现了更多的证据表明长寿的关键在于一个称为SIRT6的基因。他们发现基因SIRT6在具有更长寿命的物种中负责更高效的DNA修复。这一
PPP4R2基因突变因子与药物介绍
该基因编码的蛋白质是丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶4复合物的调节亚单位。这种复合物除了能有效修复DNA双链断裂外,还参与中心体微管的组织和剪接体snrnp的加工已经发现了一些编码不同亚型的转录变体。[由RefSeq提供,2015年12月]The protein encoded by this gene i
研究团队在干细胞基因组稳定性调控机制研究中取得进展
干细胞是机体发育和组织稳态维持的基础,基因组稳定是干细胞干性维持和再生医学应用的前提。研究干细胞如何维持基因组稳定,有助于推动干细胞的安全应用和理解相关发育疾病的致病机理。中国科学院昆明动物研究所研究员郑萍团队长期关注干细胞维持基因组稳定性的独特机制。前期工作中,该研究团队鉴定胚胎干细胞基因组稳
TLK2基因的结构特点和作用
这个基因编码一个核丝氨酸/苏氨酸激酶,最初在拟南芥中被鉴定出来。编码蛋白被认为通过调节组蛋白H3/H4伴侣蛋白的水平来调节细胞周期S期染色质的装配。这种蛋白与辐射引起的DNA损伤的双链断裂修复有关。该基因的假基因存在于染色体10和17上。交替剪接导致多个转录变体。
乳腺癌相关的-TLK2基因突变类型及临床解释
这个基因编码一个核丝氨酸/苏氨酸激酶,最初在拟南芥中被鉴定出来。编码蛋白被认为通过调节组蛋白H3/H4伴侣蛋白的水平来调节细胞周期S期染色质的装配。这种蛋白与辐射引起的DNA损伤的双链断裂修复有关。该基因的假基因存在于染色体10和17上。交替剪接导致多个转录变体。
Nature惊人发现:RNA,修复损伤的模板
能够准确地修复自发的错误、氧化或诱变剂导致的DNA损伤对于细胞生存至关重要。这种修复通常是利用完全相同或同源的完整DNA序列来实现。但科学家们现在证实,在一种常见芽殖酵母细胞内RNA可充当模板用来修复破坏性最大的DNA损伤——DNA双链断裂。 尽管较早的研究表明了将RNA寡核苷酸导入到细胞中可