小鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物详细说明
小鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物详细说明:1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。原代细胞分离:一、细胞培养1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过......阅读全文
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——消化法
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原
正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养
一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
研究揭示抑制PFKFB3介导的糖酵解防治多种严重肺疾病
肺是呼吸系统的主要器官,其借助外呼吸功能不断为机体提供氧气、排出二氧化碳,以维持机体血气平衡和内环境稳定。许多病理性因素可导致肺部功能发生改变,从而导致肺部疾病甚至危及生命。目前肺动脉高压和败血症致死率高,治疗药物疗效差,仅能改善患者的生活质量,一些严重病人最终只能求助于肺或心脏移植手术。进一步
正常小鼠原代骨骼肌细胞培养
PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS
PNAS:研究揭示抑制PFKFB3介导的糖酵解防治多种肺部疾病
肺是呼吸系统的主要器官,其借助外呼吸功能不断为机体提供氧气、排出二氧化碳,以维持机体血气平衡和内环境稳定。许多病理性因素可导致肺部功能发生改变,从而导致肺部疾病甚至危及生命。目前肺动脉高压和败血症致死率高,治疗药物疗效差,仅能改善患者的生活质量,一些严重病人最终只能求助于肺或心脏移植手术。进一步
PNAS解析早老素与老年病
顾名思义,早老症是一种使患者过早老化的罕见疾病。早老症患者在十多岁时就会因为老年病而夭折(心力衰竭和中风)。 马里兰大学的细胞生物学和分子遗传学副教授曹侃(Kan Cao)是研究早老症的专家,日前她的研究团队取得了一项重大进展。他们发现,一种毒性蛋白摧毁了早老症患者动脉的肌肉细胞,而这种动脉受
PNAS解析早老素与老年病
顾名思义,早老症是一种使患者过早老化的罕见疾病。早老症患者在十多岁时就会因为老年病而夭折(心力衰竭和中风)。 马里兰大学的细胞生物学和分子遗传学副教授曹侃(Kan Cao)是研究早老症的专家,日前她的研究团队取得了一项重大进展。他们发现,一种毒性蛋白摧毁了早老症患者动脉的肌肉细胞,而这
Cell-Reports:模拟平滑肌细胞-有助理解老年痴呆
一项新的科学研究显示,科学家可以培养成长出与脑动脉中平滑肌肉细胞非常相似的细胞,这就将使其更容易研究血管疾病对神经退行性疾病的贡献。 平滑肌细胞是血管壁的一个重要组成部分,但出人意料的是,它们是器官特异性:例如脑动脉平滑肌细胞不同于冠状动脉的平滑肌细胞。这些细胞的详细属性在疾病过程中很重要的。
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(一)
兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法酶分离法 实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下
细胞技术专题:人脐动脉平滑肌细胞培养实验
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实
大鼠平滑肌细胞的另一种培养方法
显微器械:眼科剪一把,直弯眼科镊各一把,细结镊一把,手术刀一把,针头诺干杀老鼠器械:手术剪一把,大镊子一把,弯眼科镊一把,组织钳一把,50ml烧杯一个(锡纸包好)另外:10ml离心管两个,培养皿两个,10ml的瓶子三个,小滤器两个,硅胶板一块,培养瓶盖子诺干贰。试剂D-HANKS液250ml,双抗2
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(二)
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利,传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代,经第8
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(三)
收起 注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层,是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间,见消化液混浊、组织块呈絮状,或在倒置显微镜下见消化液中有较多单个细胞或细胞小
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不
兔膀胱平滑肌细胞培养实验——酶分离法
兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长
小儿大动脉炎的肺功能检查介绍
肺功能改变与肺动脉狭窄和肺血流受损有一定关系,通气功能下降以双侧肺血流受损为多,而弥散功能障碍则少见,由于长期肺血流受损使肺顺应性降低,或肺动脉高压引起心肺功能改变所致。
高原性心脏病的发病机制
高心病主要由慢性缺氧引起的右心功能受损。左心室是否亦受累,或受累程度如何尚不清楚。低压低氧是发生高心病的根本,而低氧性肺动脉高压和肺小动脉壁的增厚或重建(remodeling)是发病机制的中心环节或基本特征。 1、肺动脉高压 经临床和动物模型的研究,慢性高原病特别是高心病的肺动脉压有异常升高。
肺淋巴管平滑肌瘤病的概述
淋巴管平滑肌瘤病(LAM)是一种病因未明,由于平滑肌异常增殖导致支气管,淋巴管和小血管阻塞,呈进行性发展的全身性疾病。肺部最易受累,常表现为弥漫性间质性肺疾病,因此常称LAM为肺淋巴管平滑肌瘤症。本病主要发生在绝经期妇女,临床上常有呼吸困难、自发性气胸、乳糜胸等表现,典型的胸部影像学可见双肺弥漫
肺淋巴管平滑肌瘤病的治疗
迄今,本病尚无满意的治疗方法。 糖皮质激素和细胞毒制剂无效 安宫黄体酮每月400mg或每2个月400mg肌肉注射,亦可选每日10~20mg口服,但疗效并不理想。三苯氧胺和黄体酮激素释放激素等也曾用于本病治疗,但效果不能肯定。采用卵巢切除术联合孕激素的治疗方法较单一治疗有肯定的疗效。 采用肺
肺淋巴管平滑肌瘤病的概述
淋巴管平滑肌瘤病(LAM)是一种病因未明,由于平滑肌异常增殖导致支气管,淋巴管和小血管阻塞,呈进行性发展的全身性疾病。肺部最易受累,常表现为弥漫性间质性肺疾病,因此常称LAM为肺淋巴管平滑肌瘤症。本病主要发生在绝经期妇女,临床上常有呼吸困难、自发性气胸、乳糜胸等表现,典型的胸部影像学可见双肺弥漫
肺淋巴管平滑肌瘤病的诊断
对育龄妇女出现进行性呼吸困难、类似肺气肿的临床表现,并反复发生自发性气胸和/或乳糜胸应考虑本病的可能。如HRCT表现为全肺的均匀分布大小不等的薄壁囊肿。临床上基本可诊断本病的可能。肺组织病理检查可获确诊。肺活体组织病理检查,尤其是免疫组化染色显示平滑肌有特异性改变,具有确诊价值。近年来应用黑瘤杂
肺淋巴管平滑肌瘤病的诊断
对育龄妇女出现进行性呼吸困难、类似肺气肿的临床表现,并反复发生自发性气胸和/或乳糜胸应考虑本病的可能。如HRCT表现为全肺的均匀分布大小不等的薄壁囊肿。临床上基本可诊断本病的可能。肺组织病理检查可获确诊。肺活体组织病理检查,尤其是免疫组化染色显示平滑肌有特异性改变,具有确诊价值。近年来应用黑瘤杂
肺淋巴管平滑肌瘤病的病理
肺表面广泛分布的囊肿是由扩张的淋巴管在肌层和壁层胸膜上形成类似肺大泡病变所致。新生的不典型平滑肌细胞主要发生于淋巴管、支气管血管束、小静脉,还可以扩展至肺泡、肺间质内外,可引起管腔阻塞和扩张。形成弥漫性终末气腔扩张能过的囊肿,直径0.1cm至数厘米大小。非典型增殖细胞于血管平滑肌相似,但稍短且呈
肺淋巴管平滑肌瘤病的病理
肺表面广泛分布的囊肿是由扩张的淋巴管在肌层和壁层胸膜上形成类似肺大泡病变所致。新生的不典型平滑肌细胞主要发生于淋巴管、支气管血管束、小静脉,还可以扩展至肺泡、肺间质内外,可引起管腔阻塞和扩张。形成弥漫性终末气腔扩张能过的囊肿,直径0.1cm至数厘米大小。非典型增殖细胞于血管平滑肌相似,但稍短且呈
staurosporine诱导小鼠心肌细胞凋亡模型构建
原代心肌细胞的培养及实验方案取出生后0~24 h C57BL/6cr小鼠心脏,按改良的Lader方法进行细胞的分离。 获取博动的心脏迅速放置于无Ca2+、Mg2+的Hank’s平衡液中。剪碎心脏,放置在4℃条件下100 g/L的Trypsin溶液中消化16~18 h,用Trypsin抑制剂中止消化。
大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法
大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。 实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实验材料 SD
受体活性修饰蛋白1对血管平滑肌细胞之影响
中国贵州省境内遵义医学院第一附属医院的石蓓、龙仙萍、赵然尊、刘志江、王冬梅和许官学等研究学者们在2013年3 月发行的实验生物学及医学期刊中报导了利用干细胞来改善心肌梗塞的心脏功能及受损动脉的方法。他们发现了使用重组腺病毒转殖入带有人类受体活性修饰蛋白 -1基因(RAMP1)的间质干细胞
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法
胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层,然后纵行切开血
高原性心脏病的发病原因及发病机制
发病原因 高原心脏病多发生于平原移居于高原或由中度海拔到更高海拔处的居民,其发病率随海拔高度的升高而增高。本症除差异外,劳累、寒冷、呼吸道感染常为诱发因素。 发病机制 高心病主要由慢性缺氧引起的右心功能受损。左心室是否亦受累,或受累程度如何尚不清楚。低压低氧是发生高心病的根本,而低氧性肺动
肺淋巴管平滑肌瘤病的发病机制
LAM病因不明,许多事实提示本病可能与雌激素有一定关系。初潮之前不发生本病,绝经后也罕见,为数不多的发生绝经后的病例也常有补充雌激素素史。本病妊娠期加重,卵巢切除后后减轻,在表现为肺病变的结节性硬化症的病例中,女性占明显优势,活体组织也证实有雌激素和孕激素受体。但以抗雌激素治疗,如切除双侧卵巢、