恒温PCR技术检测转基因有哪些优点

恒温PCR一种新式恒温核酸扩增方法,其原理是采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,反应全过程恒定63℃,不到1h的时间里进行核酸的指数级扩增,其扩增效率可达到109个~ 1010个拷贝数量级。在扩增反应中产生茎-环结构,保证引物与其杂交启动新一轮核酸合成。配合恒温荧光检测设备可实时监测扩增情况。该扩增法具有简单、快速、准确、易检测、适用面广等优点。迪澳转基因快速检测箱,配置了高通量恒温荧光检测仪DEAOU-308C、转基因快速检测试剂、植物基因组核酸提取试剂及必备的实验耗材。为客户提供了精确高效、功能全面、经济实用的转基因检测手段。......阅读全文

恒温扩增技术与PCR-区别

如果是恒温的话怎么来完成变性、退火以及延伸过程呢下面是摘录的:操作技术和普通PCR没区别,反应温度上不要高温低温中文三步,只要60度就可以。原理,在常规PCR基础上增加了3对引物(普通1对)使得引物几乎涵盖了目的基因序列的三分之一以上。如果定量加荧光探针,定性就不必了。

恒温核酸扩增技术与传统PCR对比

  和传统的PCR技术相比,恒温核酸扩增不仅仅是缩短了核酸扩增的时间,更重要的是核酸扩增摆脱了对硬件的束缚。PCR技术原理是利用94℃高温使DNA双链解开,并在耐高温的DNA聚合酶的作用下扩增DNA片段。PCR反应至少需要2个不同的温度使DNA片段得到特异性的扩增。恒温核酸扩增是利用各种酶与DNA之

最简单的恒温扩增PCR——RCA/RCT

小背景滚环扩增技术,rolling circle amplification,RCA——基于DNA的扩增方法;滚环转录技术,rolling circle transcription,RCT——基于RNA的扩增方法。 滚环扩增/转录技术是基于借鉴了自然界中环状DNA/RNA复制和转录方式开发的一种恒温

恒温PCR技术检测转基因有哪些优点

恒温PCR一种新式恒温核酸扩增方法,其原理是采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,反应全过程恒定63℃,不到1h的时间里进行核酸的指数级扩增,其扩增效率可达到109个~ 1010个拷贝数量级。在扩增反应中产生茎-环结构,保证引物与其杂交启动新一轮核酸合成。配合恒

恒温PCR技术于食品中致病菌检测的应用

可以用于检测致病菌特定基因序列,从而检测是否有致病菌污染。另外也可以通过PCR技术对致病菌的类型进行检测,检测是否是新的致病菌品种

石磊:恒温PCR技术在食品安全检测领域的应用

  2014年7月31日,第二届国际检验检测技术与装备博览会在北京国家会议中心隆重召开(以下简称检博会)。本届博览会以“高端技术,服务民生”为主题,以“质检、科技、国际”为特色,秉着“搭建国际平台,服务检测市场”的宗旨,为科技服务水平提升、检验检测行业和谐发展、科技成果交流与合作、检验检测仪器拓展市

荧光定量PCR-vs.-恒温扩增,谁才是分子诊断的未来?

荧光定量PCR 和恒温扩增在分子诊断方面的应用日渐受关注,两种技术孰优孰劣,且听作者娓娓道来。基于核酸扩增的分子诊断,是通过引物介导特异性扩增目的基因,以检测内源性(遗传或变异)或外源性(病原体)目的基因的存在与否,从而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。其主要应用场景有传染病的诊断,血筛,肿瘤早

恒温水槽/恒温水箱/恒温槽/恒温摇床

HW-101A低温水槽产品详细介绍 :  1.风冷式全封闭压缩机组制冷 2.HW-101A低温水槽设有外循环泵,可建立机外第二恒温场 3.HW-101A低温水槽槽内冷液可外引,冷却机外实验容器 4.HW-101A低温水槽采用XTT-7微机智能控制系统 5.触摸软键可快速设定温度,操作方便。 6.上窗

恒温水槽/恒温水箱/恒温槽/恒温摇床

HW-101A低温水槽产品详细介绍 :  1.风冷式全封闭压缩机组制冷 2.HW-101A低温水槽设有外循环泵,可建立机外第二恒温场 3.HW-101A低温水槽槽内冷液可外引,冷却机外实验容器 4.HW-101A低温水槽采用XTT-7微机智能控制系统 5.触摸软键可快速设定温度,操作方便。 6.上窗

多重PCR(Multiplex-PCR)

一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同.    多

PCR简介/PCR仪

PCR的要素基本的PCR须具备PCR仪图册1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料(四种脱氧核苷酸)及水。 PCR仪工作原理利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制

多重PCR(Multiplex-PCR)

一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同.    多

Troubleshooting-for-PCR-and-multiplex-PCR

Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE

重叠PCR—overlap-PCR

1、简介 重叠PCR也是基本的PCR原理:变性-退火-延伸。不同的是在重叠PCR过程是两个或者几个片段重叠延伸之后,再进行指数扩增的PCR过程。  2、基本原理*步:PCR产生两个或者几个片段,这几个片段之间必须有重叠区。 第二步:以两个片段为例,见上图,*步产生的两个片段,A D链之间有互补,B

恒温摇床恒温摇床

KY-C全温摇床/振荡器又为空气全温恒温摇床是一种温度可控的培养箱和振荡器相结合的生化仪器,是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研、教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备。其主要特点:①温控,数字显示。②开设有补氧孔,恒温工作腔补氧充分。③设有机械定时,温控部分有智能定时。④弹

普通PCR梯度PCR-原位PCR-荧光定量PCR仪的区别

  普通PCR仪:   一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪,也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。如;(ABI 2720)   梯度PCR仪:   一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称

反转录PCR(RTPCR,-Reversed-Transcript-PCR)

1 原理   RT—PCR是一种将cDNA合成与PCR技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法,主要用于对表达信息进行检测或定量分析,还可以用来检测基因表达差异而不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、ol

反向PCR-(inversePCR)

利用反向PCR可对未知序列扩增后进行分析,探索邻接已知DNA片段的序列,并可将仅知部分序列的全长cDNA进行分子克隆,建立全长的DNA探针。可用于:(1)基因游走研究;(2)转位因子研究;(3)已知序列DNA旁侧病毒整合位点分析等研究。实验方法原理反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色

直接原位PCR(In-situ-PCR)

原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术,使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞(爬片、甩片或涂片)或组织(石蜡、冰冻切片)上直接对靶基因片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马林;二甲苯;PBS操

直接原位PCR(In-situ-PCR)

原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术,使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞(爬片、甩片或涂片)或组织(石蜡、冰冻切片)上直接对靶基因片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马林;二甲苯;PBS操

反向PCR-(inversePCR)

实验方法原理 反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。 1.  选择合适的限制性内切酶位点。并在T-DNA的边界(左边界、右边界均可)和酶切位点附近设计引物P1、P2;2.  回收DNA,T4连接酶连接,使酶切后的DNA片段环化;3.  回收连接后的DNA,用引物P1、P2做

反向PCR(inverse-PCR)简介

反向PCR是一种多聚合酶链式反应(PCR)应用的方法,可使已知序列的核心区边侧的未知DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR扩增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区的末端序列,但其方向可使链的延长经过环上的未知区而不是分开

菌落PCR(Colony-PCR)方法

菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。具体方法:1、PCR混合物的制备T

反向PCR-(inversePCR)

            实验方法原理 反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列,因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接

PCR技术(十四):反向PCR

描述一种大聚合酶链反应(PCR)应用的方法,使在已知序列的核心区边侧的未知 DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR扩 增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区 的末端序列,但其方向性,使链的延长经过环上的未知区而不是分开引

PCR

实验概要protocal for PCR实验步骤PCR 1) Add the following to a microfuge tube:        10 ul reaction buffer        1 ul 15 uM forward primer        1 ul 15 uM

PCR

PCRPolymerase Chain Reaction1) Add the following to a microfuge tube:10 ul reaction buffer1 ul 15 uM forward primer1 ul 15 uM reverse primer1 ul templ

恒温

  恒温恒湿实验室简单来说是生产企业对产品质量检验与控制的基础设施,也是流通领域里的商品质量检验把关的基础设施。恒温恒湿实验室的应用非常广泛,比如棉纺织厂,毛纺厂,化纤厂,纸张厂等等,这些企业都会用到这种实验室,那么,恒温恒湿实验室方案设计要点有哪些?    恒温恒湿实验室   一、设计目的

降落PCR(Touchdown-PCR)的原理?

  Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度,直至达到“Touchdown”退火温度,然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法最初出现是为了避开确定最佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度之间的任何差异将造成每个循环PCR产物量的两倍差异(每摄氏度造成

实时荧光定量PCR(realtime-PCR)

实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 RNA提取试剂盒荧光定量PCR MixTRIZOLdNTP氯仿逆转录酶MMLV异丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2琼脂糖溴化乙锭MOPS甲醛乙酸钠EDTAEB溴酚兰仪器、耗材 离心管离心机风光光度计电泳槽凝胶板Realtime PCR仪实验步骤 一、 样品