质壁分离的实验方法

实验原理当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,根据扩散作用原理,水分子会由细胞液中渗出到外界溶液中,通过渗透作用失水;由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同,细胞壁伸缩性较小,而原生质层伸缩性较大,从而使二者分开;反之,外界溶液浓度小于细胞液浓度,则细胞通过渗透作用吸水,分离后的质和壁又复原。实验器材:紫色洋葱的鳞片叶、刀子、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜;质量浓度为0.3g/mL的蔗糖溶液或质量分数为30%的蔗糖溶液、清水。方法步骤一 临时装片制作:选材:(1)选用紫色特别深的洋葱外表皮;说明:Ⅰ:在实验之前,最好将洋葱放在水中浸泡一下,可以使洋葱吸水多一些,而且代谢也比较旺盛,实验效果明显。Ⅱ:将洋葱的外层剥去两层,因为处于最外的可能已经死亡。(2)取表皮:在洋葱的外表皮上,用刀片划“井”字,用镊子轻轻撕取一小块;关键:最好撕取单层细胞,如果撕的太厚,则会使细胞重叠,严重影响实验效果。制片:在载玻片中央滴上一滴清水,然后将取......阅读全文

植物细胞渗透势的测定(质壁分离法)

实验概要植物细胞的渗透势主要取决于液泡的溶质浓度,因此又称溶质势。渗透势与植物水分代谢、生长及抗逆性等有密切关系。已知在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势,增加吸水能力,而在一定程度上维持细胞膨压,保障细胞的生长和气孔的开放,这种现象叫做渗透调节作用。渗透调节能力的大

植物组织渗透势测定质壁分离法

实验概要本实验介绍了植物组织渗透势(osmotic potential)测定-质壁分离法的原理及操作步骤等。实验原理将植物组织置于对其无毒害的一系列不同浓度的溶液里处理一定时间,然后镜检发生质壁分离的细胞数,通常视野中有50%的细胞发生质壁分离时定为初始质壁分离,细胞初始质壁分离时压力势为零,因而可

质壁分离法测定植物细胞的渗透势

【原理】 将植物  组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中,经过一段时间,植物细胞与蔗糖溶液间将达到渗透平衡状态。如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态,则细胞的压力势ψ p下降为零。此时细胞液的渗透势ψ s等于外液的渗透势ψ s0,即ψ s=ψ s0,此溶液称为该组织的等渗

植物组织渗透势(osmotic-potential)测定质壁分离法

[原 理]将植物组织置于对其无毒害的一系列不同浓度的溶液里处理一定时间,然后镜检发生质壁分离的细胞数,通常视野中有50%的细胞发生质壁分离时定为初始质壁分离,细胞初始质壁分离时压力势为零,因而可把引起细胞初始质壁分离的外界溶液称之为等渗溶液,其溶液具有的渗透势即为细胞的渗透势。由于很难正好找到引起5

质壁分离法测定植物细胞渗透势的优缺点如何

a.一个是宏观(小液流)上的观察的一个是微观上的。b.一个是直接观察法(小液流),一个是间接观察法。用质壁分离法测定的植物细胞渗透势测量值略大于实际值。小液流法测定植物组织的水势测量值略小于实际值。小液流法受重力影响,使结果小于实际值,而质壁分离法测定太粗略,所以也有极大的误差

中间丝的分离方法实验

从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝 从组织中分离中间丝             实验材料 细胞

中间丝的分离方法实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液:在 PBS 中加入:1

中间丝的分离方法实验

从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝从组织中分离中间丝实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂                                                

染色体分离实验—水相法分离染色质

实验材料细胞试剂、试剂盒水相裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤1. 像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃,1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮,典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少 30

染色体分离实验——聚胺法分离染色质

实验材料细胞试剂、试剂盒秋水仙胺聚胺缓冲液实验步骤有丝分裂中细胞的同步化1. 37℃,用合适的含有 FCS,抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮培养

中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝

实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮,把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片(大约 1cmx1 cm )

细菌细胞壁的染色实验

细菌细胞壁很薄,革兰氏阳性菌的细胞壁为20~30 nm,革兰氏阴性菌的细胞壁为10~13 nm。组成细菌细胞壁的主要化学成分是肽聚糖,它与染料结合的能力差,不易着色,在细菌的染色过程中,一般情况染料都是通过细胞壁的渗透、扩散等作用而进入细胞,细胞壁本身并未染色。实验方法原理根据细菌细胞在高渗溶液中或

细菌细胞壁的染色实验

实验目的    学习掌握细菌细胞壁的染色法。    实验原理    细菌细胞壁很薄,组成细菌细胞壁的主要化学成分是肽聚糖,它与染料结合的能力差,不易着色,因此,欲通过染色来观察细胞壁,必须设法使细胞壁能着色,而细胞质则不易着色,常用的方法有单宁酸法和磷钼酸法。单宁酸和磷钼酸都是起媒染作用,它们使细胞

细菌细胞壁的染色实验

实验方法原理 根据细菌细胞在高渗溶液中或用乙醚蒸气处理后,会产生质壁分离这一现象,经染色后也可在普通光学显微镜下区分细胞壁和细胞质膜。实验材料 巨大芽孢杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒 结晶紫水溶液单宁酸(鞣酸)水溶液磷钼酸水溶液甲基绿水溶液NaCl结晶紫水溶液Bouin氏固定液硫堇水溶液乙醚仪器、耗材

染色体分离实验——用己二醇法分离中期染色质

实验材料细胞试剂、试剂盒己二醇缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟,用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20

关于骨髓间充质干细胞的分离方法介绍

  常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法,全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同,分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入,又有人

渗透分离技术分析实验方法

实验方法采用广东某地区的生活垃圾处理废水,其渗滤液在稳定塘中自然降解50d左右,水样为棕褐色,pH:7.40~8.40;COD:1400mg/L~4000mg/L;电导率:11ms/cm~22ms/cm。实验采用WUFVI实验超滤系统,试验系统由以下几个处理单元组成:(1)一级反渗透装置;(2)二级

酶的提取和分离纯化实验方法

(一)细胞破碎处理许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指利用甲醛、丙

实验室常用的提纯与分离方法

提纯是指将混合物净化除去其杂质,得到混合物中的主体物质,提纯后的杂质不必考虑其化学成分和物理状态。混合物的分离方法有许多种,但根据其分离本质可分为两大类: 1、化学分离法 2、物理分离法 下面就混合物化学分离及提纯方法归纳如下:分离与提纯的原则 1.引入的试剂一般只跟杂质反应;

什么是液质分离

关于原理分类等,你直接再网上输入LC-MS搜索就会有很多的,这里就不CTRL-C了,至于这种用法的单位,因为质谱仪还是相当昂贵的,维护起来费用也高,所以用的单位还是不多的。但是大的医药企业的分析质量控制科室有可能会用。但一般来说研究机构和高校用的比较多吧。比如药科大学的分析测试中心和药物代谢研究中心

分离核仁实验——分离核仁

实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl

中间丝的分离方法实验——从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝

实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液:在 PBS 中加入:1% Tr

液泡的分离实验

仪器、耗材 紫洋葱紫萝卜叶蔗糖溶液小镊子实验步骤 一、材料与设备紫洋葱、紫萝卜叶、0.5 M 蔗糖溶液、小镊子二、实验步骤撕取紫色洋葱或萝卜叶片表皮,置于载玻片上,稍滴加清水后盖上盖玻片,于显微镜下观察制片中的细胞,若细胞其中有一个完整无缺的、含花青素的玫瑰紫色液泡,则用滤纸条吸引液体的方法连续滴加

液泡的分离实验

撕取紫色洋葱或萝卜叶片表皮,置于载玻片上,稍滴加清水后盖上盖玻片,于显微镜下观察制片中的细胞,若细胞其中有一个完整无缺的、含花青素的玫瑰紫色液泡,则用滤纸条吸引液体的方法连续滴加0.5M蔗糖溶液仪器、耗材紫洋葱紫萝卜叶蔗糖溶液小镊子实验步骤一、材料与设备紫洋葱、紫萝卜叶、0.5 M 蔗糖溶液、小镊子

mRNA-的分离实验

oligo(dT)-纤维素亲和层析法             实验方法原理  哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以

mRNA-的分离实验

实验方法原理 哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNA。实验步骤1.  用0.1 mol/L NaOH悬浮0.5~1.0 goligo(dT)-纤维素。 2.  将悬浮液装入灭菌的一次性层

病毒的分离实验

实验步骤 标本的采集:病毒分离常用的标本有血液,脑脊液,粪便,直肠拭子,咽喉含漱液,咽拭子,尸检组织等。所取标本的种类视疾病性质而异。如呼吸道疾病常取咽喉洗液,咽拭子;消化道疾病取粪便,直肠拭子;神经系统疾病取脑脊液,粪便等。采取标本时应避免污染,有些标本如粪便,咽喉洗液,虽本身含有大量杂菌,但为保

液泡的分离实验

仪器、耗材:紫洋葱                                                                  紫萝卜叶                                                                  蔗糖溶液

组织的分离实验

试剂、试剂盒 Hanks仪器、耗材 镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤 一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1.  无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组

组织的分离实验

机械分散法 胰蛋白酶消化消化分离法 胶原酶消化分离法 离心分离法 EDTA 消化分离法             试剂、试剂盒