qRTPCR中体系的配置
qRT-PCR要求对每个样品做三个平行体系。一般来说，每个最终的反应体系为10μl（然而试剂盒上推荐的体系为25 μl，但这样既浪费酶，用中号枪头加样还降低了重复性）。最好用10 μl小号进口枪头加入。配体系时，一般先将水、MIX及引物混成3倍体积的总体系（此时应给每管留1.5ul的损耗，另外有些仪器还要求加入适量Passive Reference Dye用于标定仪器），再用排枪分装入qRT-PCR板。模版要在最后，最后，最后用排枪加入（稀释20-30倍后，模版可加至1 μl以上，大大提高了可重复性）。......阅读全文
qRTPCR中体系的配置
qRT-PCR要求对每个样品做三个平行体系。一般来说，每个最终的反应体系为10μl（然而试剂盒上推荐的体系为25 μl，但这样既浪费酶，用中号枪头加样还降低了重复性）。最好用10 μl小号进口枪头加入。配体系时，一般先将水、MIX及引物混成3倍体积的总体系（此时应给每管留1.5ul的损耗，另外有些仪
qRTPCR中SYBRGreen酶的选择
高质量的酶是保证高质量结果的前提。现在市售的酶多为2 X MIX的形式。在市售酶的选用方面，我们首先应该选择稳定、扩增效率高的酶，其次还应注意解冻后的MIX粘性不宜过大（粘性过大的MIX会导致加样时枪头出现挂液），最后应注意同一板qRT-PCR体系不宜用两管MIX，即加完一管发现不够用，继续开一管新
如何看QRTPCR－结果中的Cq值
你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异，就可以计算标准差了。这么简单的统计分析，用不着SPSS吧， excel就可以解决了。追问 : 谢谢您，可是我还是有点不明白：如果我重复三次，每次3个复孔（即一共9个孔），您指的“把几次试验的对照组的平均
如何看QRTPCR－结果中的Cq值
这样算：你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异，就可以计算标准差了。这么简单的统计分析，用不着SPSS吧， excel就可以解决了。追问 : 谢谢您，可是我还是有点不明白：如果我重复三次，每次3个复孔（即一共9个孔），您指的“把几次试验的对照
如何看QRTPCR－结果中的Cq值
你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异，就可以计算标准差了。这么简单的统计分析，用不着SPSS吧， excel就可以解决了。追问 : 谢谢您，可是我还是有点不明白：如果我重复三次，每次3个复孔（即一共9个孔），您指的“把几次试验的对照组的平均
如何看QRTPCR－结果中的Cq值
这样算：你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异，就可以计算标准差了。这么简单的统计分析，用不着SPSS吧， excel就可以解决了。追问 : 谢谢您，可是我还是有点不明白：如果我重复三次，每次3个复孔（即一共9个孔），您指的“把几次试验的对照
如何看QRTPCR－结果中的Cq值
你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异，就可以计算标准差了。这么简单的统计分析，用不着SPSS吧， excel就可以解决了。追问 : 谢谢您，可是我还是有点不明白：如果我重复三次，每次3个复孔（即一共9个孔），您指的“把几次试验的对照组的平均
如何看QRTPCR－结果中的Cq值
这样算：你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异，就可以计算标准差了。这么简单的统计分析，用不着SPSS吧， excel就可以解决了。追问 : 谢谢您，可是我还是有点不明白：如果我重复三次，每次3个复孔（即一共9个孔），您指的“把几次试验的对照
QRTPCR
Comparison of normalisation methodsThere is an ongoing debate what is the best way to normalise qPCR data. Reference genes are the most common method,
QRTPCR
Comparison of normalisation methodsThere is an ongoing debate what is the best way to normalise qPCR data. Reference genes are the most common method,
qRTPCR
实验概要实时定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。目前，实时定量PCR所使用的荧光化学组分一般可分为两种：荧光探针和荧光染料。1）TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的
qRTPCR
实验概要实时定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。目前，实时定量PCR所使用的荧光化学组分一般可分为两种：荧光探针和荧光染料。1）TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的
qRTPCR的模版需求
通常而言，如果你想做一个突变体鉴定实验，那么模版质量要求可适当放宽，只要cRNA反转录成功即可。但如果你要做一个厉害的标记基因鉴定，并且想要达到传说中“三线合一”的境界，那么模版质量就另当别论了。首先，RNA要经过严格的定量（因为反转成cDNA后，反转时加入的dNTP会严重干扰定量结果，因此对cDN
qRTPCR技术的原理及应用？
实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结
制药工业系统中质谱仪配置的参考建议
随着科学技术的发展近十几年来各种类型的有机质谱仪得到飞速发展。有机质谱仪正被广泛地应用于新药开发、食品分析、环境科学、农残分析、司法鉴定等各种不同领域。由于质谱仪的超高灵敏度，所以它已成为这些领域中不可或缺的分析仪器之一。近年来，我国每年花费大量的资金向国外采购各种不同用途的有机质谱仪，从几万美
冻存液中的DMSO用什么配置
是纯的DMSO，通常在整个冻存液中的比例为10%通常冻存液的配置方法是20%血清，10%DMSO，70%培养液我一般用90%血清+10%DMSO，这个方法复苏后细胞的存活率非常高，推荐试一下。
qrtpcr加cDNA的量，怎么加
因为你所要检测的目的片段丰度不同，所以需要先做个预实验。怎么做呢？你先把cdna进行梯度稀释，然后进行pcr，如果你的primer所扩增的ct值在15-25之间，那么就是很不错的稀释梯度啦～以后实验久按照这个浓度加就好了
qrtpcr加cDNA的量，怎么加
因为你所要检测的目的片段丰度不同，所以需要先做个预实验。怎么做呢？你先把cdna进行梯度稀释，然后进行pcr，如果你的primer所扩增的ct值在15-25之间，那么就是很不错的稀释梯度啦～以后实验久按照这个浓度加就好了
qRTPCR的引物设计注意事项
qRT-PCR有自己的引物标准，简单而言，引物设计要用专门的软件，qpcr引物设计原则包括内参基因与目的基因在内的所有引物Tm值不应相差两度。扩增片段的长度以200-300 bp为宜。除此之外，还需要注意以下法则： 1）用于突变体的基因表达量鉴定时，引物最好设在两个外显子之间，横跨中间的内含子
edta滴定中氯化铵怎么配置
要求的是4500ml,是体积数,应该用量筒量取,不应该用天平称量,因为不同温度下蒸馏水的密度不一样,需要换算.如果需要一定质量时,则应用天平称量.
科研入门基础实验之qRTPCR
这个假期太长，长的我差点忘了自己之前是做啥课题的，直到和某个zz一起玩公众号，商量着Ta负责生信领域，我负责实验部分，各取所长，想想也未尝不可，那就姑且试试吧。 接下来我开始用力回忆当初最先学的实验是啥？对，是逆转录定量 PCR（qRT-PCR）！ 首先来了解qRT-PCR的流程：提取组织/
警惕健康饮食体系中的商业利益
肥胖、营养不良和气候变化，已经成为全球21世纪共同面临的问题，严重影响人类健康、地球环境和社会可持续发展。据估计，体重超重影响到全球20亿人，微量营养素缺乏同样影响到20亿人，而气候变化会使这些问题变得更糟。 2019年1月28日，柳叶刀肥胖委员会发布了最新报告及评论文章，呼吁各国领导者采取
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肥胖、营养不良和气候变化，已经成为全球21世纪共同面临的问题，严重影响人类健康、地球环境和社会可持续发展。据估计，体重超重影响到全球20亿人，微量营养素缺乏同样影响到20亿人，而气候变化会使这些问题变得更糟。 2019年1月28日，柳叶刀肥胖委员会发布了最新报告及评论文章，呼吁各国领导者采取强
什么是罗维朋体系中的亮度
罗维朋比色计是进行色泽检视的重要仪器，应用范围很广，可用于颜料、徐料、布、纸张、酒、烟、糖果、果酱、药品和油脂等。其中用于油脂测定的也可以称作油脂比色计。 罗维朋比色计的匹配色片盒上, 有二档中性色片。这是当试样的色泽比匹配色片的复合色亮时才用的，加在试样的前方，以增加试样色泽的模
zeta点位在胶态体系中的作用
由于分散粒子表面带有电荷而吸引周围的反号离子，这些反号离子在两相界面呈扩散状态分布而形成扩散双电层。根据Stern双电层理论可将双电层分为两部分，即Stern层和扩散层。当分散粒子在外电场的作用下，稳定层与扩散层发生相对移动时的滑动面即是剪切面，该处对远离界面的流体中的某点的电位称为Zeta电位或电
串联谐振中系统配置功能要求
串联谐振试验装置是由四个部件组成，分别为调频调压控制源、励磁变压器、电抗器和电容分压器，本文中为大家详细介绍串联谐振中系统配置功能要求。一、变频控制源过压保护、失谐保护：变频控制源有电子式过压保护、失谐保护功能，避免视频不受过流和闪络上海，且动作灵敏。过流保护：系统装有电子式过流保护装置，此装置抗干
腐植酸中总酸性基含量测定的产品配置单
1 前言 腐植酸（Humic Acid，简写 HA）又称胡敏酸，是天然植物腐解后形成的一种复杂的大分子有机弱酸，具有抗炎、止血、活血降压、促进溃疡愈合、抗肿瘤等药理作用。由于腐植酸是弱酸性物质，用一般的总酸性测定法操作都费时费力，用电位滴定法既操作方便，结果重现性好，是目前测定腐殖酸中
软化水硬度检测中掩蔽剂的配置方法
测量水的硬度可以采用络合滴定法，铬黑T作为指示剂，用EDTA进行滴定。如果先加入指示剂，铬黑T可能会和水中的铁离子和铝离子结合，且这种结合物非常稳定，之后再加入掩蔽剂并不能起到掩蔽效果。所以掩蔽剂应当在指示剂之前加入。
qRTPCR检测对样品有何要求？
取材后新鲜组织须于-80℃保存，干冰运输。动物组织＞100mg，细胞数＞106，植物组织＞0.5g、幼嫩组织为宜，预计可以检测4个指标，避免反复冻融。当检测基因数较多时样品量须随之增加。
qPCR和qRTPCR各有什么优缺点
QRT PCR一般指以RNA为模板，先逆转成cDNA，再进行qPCR。更容易突变，因此种类更多，更难研制有效疫苗，难以预防。RNA病毒的抵抗力普遍比DNA病毒弱，治愈也更容易。但也有例外，例如双链RNA病毒的抵抗力就很强，逆转录病毒的治愈就极其困难。植物病毒，除少数例外（如花椰菜花叶病毒Caulif