杂交实验的实验材料仪器
1.实验材料:烟草或其它植物无菌苗的叶片。胡萝卜肉质根诱导的松软愈伤组织或悬浮培养细胞。2.试剂2.1酶液及洗涤液,同植物原生质体的分离和培养实验。2.2PEG溶液2.3高pH高钙稀释液2.4DPD培养基同植物原生质体的分离和培养实验。......阅读全文
实验室的仪器验收
仪器设备在科研过程中的重要地位不言而喻,各个科研院所每年均投入了大量资金用于仪器设备的采购。仪器设备验收是高校固定资产管理、建设工作中连接设备采购和设备使用的关键环节,随着市场经济的发展和高校各项改革的深入,高校仪器设备的采购数量和采购方式都发生了巨大的变化,仪器验收前你要做哪些准备?仪器验收过
细胞转染实验的材料器材
(1)材料293T细胞、MyoD表达质粒和EGFP表达质粒、DMEM培养基、链霉素/青霉素(双抗)、FCS(小牛血清)、PBS(磷酸盐缓冲溶液)、胰酶/EDTA消化液、转染试剂(TransFast)(2)器材20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip头酒精灯、废液缸、血球计数板、涡旋振荡器、恒温
基因分离的实验选用材料
①豌豆是严格的自花传粉植物,而且是闭花授粉,在自然条件下,可以避免外来花粉粒的干扰,所以在自然状况下都是纯合子,它保证了实验结果的可靠性。 ②豌豆各品种具有极易区分的性状,并且能够稳定的遗传给后代,使实验结果利于观察、分析; ③豌豆花花型大,易于做人工实验,而且豌豆种子颗粒也比较大,便于收集
卵黄抗体制备的实验材料
1.健康产蛋鸡(最好是SPF鸡)、免疫抗原(如鸡新城疫灭活疫苗)、弗氏佐剂。 2.灭菌生理盐水或0.01mol/L pH7.2 PBS、海藻酸钠、饱和硫酸铵等。 3.毛细滴管、注射器、碘酊棉、酒精棉、烧杯、玻璃棒、离心管、pH试纸等。 4.微量振荡器、离心机、分光光度计等。
细菌的局限性转导实验原理、材料和实验步骤
一、实验原理: 转导是由噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析的常用方法。转导可分为局限性转导和普遍性转导二大类。 本实验试图用局限性转导为例,用噬菌体(λ)专一性转导半乳糖发酵基因的现象来说明转导的基
寡核苷酸探针在溶液中的杂交实验
Jabobs等 ( 1988)介绍了在含季铵盐缓冲液中杂交的方法与原理。下述为该法的简单变通方案。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。试剂、试剂盒寡核苷酸杂交液寡核苷酸预杂交液SSC 或 SSPETEAC1 洗涤液TMAC1或 TEAClTMAC1 洗涤液核酸和寡核苷酸放射性标
寡核苷酸探针在溶液中的杂交实验
试剂、试剂盒 寡核苷酸杂交液 寡核苷酸预杂交液 SSC 或 SSPE TEAC1 洗涤液 TMAC1或 TEACl TMAC1 洗涤液
寡核苷酸探针在溶液中的杂交实验
试剂、试剂盒 寡核苷酸杂交液寡核苷酸预杂交液SSC 或 SSPETEAC1 洗涤液TMAC1或 TEAClTMAC1 洗涤液核酸和寡核苷酸放射性标记的寡核苷酸探针仪器、耗材 杂交装置振荡培养器实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。寡核苷酸杂交液6XSSC(或 6XSSPE)0.05mol/
荧光原位杂交(FISH)技术的应用与实验流程
分子诊断是诊断市场增长最快的部分。萤光原位杂交和FISH分析包括700万人口的5亿美元的市场。。FISH市场预计为11%,较去年同期成长为下一个五年。400至500万人口的市场,在美国产生。FISH测试是用来识别生物标记DNA / RNA的形式。它是用于遗传作图和基因表达分析公知的方法。这种
实验室仪器清单
1、酸度计 用于配置试剂时精确测量PH值,从而保证配置的溶液的精确性。有时也需要利用pH计测定样品溶液的酸碱度。 2、超净工作台 微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养,那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。 3、培养箱 培养箱有多种类型,
实验化验仪器保养维护
懂得仪器的保养与维护是用户应该具有的一项基本技能,因为搞好仪器的保养与维护,关系到仪器的完好率、使用率和实验教学的成功率等,所以,仪器的保养与维护可谓实验、生产中仪器使用之举足轻重的一部分仪器一旦吸附灰尘、污垢,不仅影响仪器的性能,缩短使用寿命,直接影响实验效果,而且影响美观和实验者的身心健康。所以
动物实验与动物仪器
一、动物实验的主要目的 医疗器械的动物试验的主要目的是研究医疗器械的安全性,通常医学研究中的动物试验研究的主体可能是一种新诊治方法和原理,或一种新的药物的作用机理等等,它的主要研究目的是机理、有效性和安全性,这个研究可能与器械的使用存在联系,也可能不存在联系,且研究中可能没有涉及到植入或与
进境实验材料监管亟待创新
集聚国内外生命科学领域企业、科研院所及配套服务机构400多家的张江生物医药基地(张江药谷)是上海检验检疫局聚焦的重点区域。近年来,成长性最好、发展最为活跃的生物医药产业是上海局扶持的重要产业。尤其是近日,国家针对医药工业与医疗卫生领域的“十三五”规划已经基本编制完成,生物医药与医疗信息化以及高
用检测和驱动-DNA-探针进行差异杂交实验
下面 4 个探针用于差异筛选杂交。1. 检测者特异性消减探针(正向消减探针)。2. 驱动者特异性消减探针(反向消减探针)。3. 从检测者 mRNA(或检測者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。4. 从驱动者 mRNA(或驱动者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。本实验来源于 PC
培养神经元原位杂交技术实验
原位杂交(inhybridization,ISH) 的目的是在细胞结构内显 TKmRNA 分子。在 ISH 步骤中要采用高温,这就对细胞的固定有特殊要求。如果原位杂交方法不能提供阳性的杂交信号,还可以应用其他的技术,如通过 mRNA 扩增来检测神经突起微小区域内的低丰度 mRNA 的存在(Miyas
原位杂交组织化学实验技术3
(四)杂交后处理(post hybridisation treatment) 杂交后处理包括系列不同浓度,不同温度的盐溶液的漂洗。在原位杂交组织化学的实验程序中,这也是一个重要的环节 。特别因为大多数的原位杂交实验是在低严格度条件下进行的,非特异性的探针片段粘附在组织切片上,从而增强了背景染色。R
Southern印迹及基因组DNA杂交技术实验
Southern 印迹 放射性标记的探针与固定化核酸进行杂交 实验方法原理 硝酸纤维膜或尼龙滤膜对单链DNA的吸附能力很强,当电泳后凝胶经过DNA变
杂交水稻国家重点实验室通过验收
依托湖南杂交水稻研究中心和武汉大学联合共建的“杂交水稻国家重点实验室”通过了科技部组织的专家验收。 验收专家组按照《国家重点实验室建设与管理办法》和国家重点实验室验收的总体要求,对实验室建设期间的运行情况进行了认真细致的考察评估。专家组一致认为,实验室研究方向明确,特色鲜明,圆满完成实验室
培养神经元原位杂交技术实验
实验方法原理 流程图 实验材料 溶液和缓冲液 原位杂交
双杂交和其他双成分系统实验(二)
第二阶段 筛选一个相互作用子材料缓冲液和溶液将贮存液稀释至适当的浓度二甲基亚砜(DMSO)乙醇可选择,请参见步骤 9。冻存转化体用的无菌甘油溶液65% 无菌甘油0.1mol/LMgS0425 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)TE(pH7.5)(无菌)TE(pH7.5),含 0.1mol/
双杂交和其他双成分系统实验(五)
离心机和转子Sorvall RT6000 离心机,H1000B MPC 和 H6000A MPC 转子(离心微量滴定板用)专用设备玻璃珠(直径 0.45 mm, 无菌;Sigma)微量滴定板(24 孔或 96 孔 [可选])重复用移液管可选,请参见步骤 1。附加试剂此方案的步骤 2 需要第 1 章方
并发转导与基因定位——三点杂交实验
实验方法原理本实验用噬菌体P22对鼠伤寒沙门氏菌进行并发转导(共转导),供体细菌中的两个连锁基因可被导入受体细菌中,与受体细菌中的一个可选择表型的基因进行三点杂交分析,用以确定这三个基因的排列顺序。若有三个基因,其野生型分别用A、B、C表示,相应的突变型基因分别记为a、b、c。若A、B、C三个基因的
原位杂交组织化学实验技术4
二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学中的应用 (一)光敏生物素标记cRNA探针的应用 以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针,使其最终浓度为0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦卤素灯下,距离光源20c
培养神经元原位杂交技术实验
实验方法原理 流程图实验材料 溶液和缓冲液原位杂交试剂、试剂盒 RNA 聚合酶地高辛-UTP 标记混合物实验步骤 一、制备地高辛标记的探针将 cDNAs 克隆入 pBluescript 载体中。为了能在体外转录,质粒需经线性化或 PCR 然后根据插入 cDNA 的方向应用 T3 或 T7RN
Southern印迹及基因组DNA杂交技术实验
实验材料 基因组 DNA试剂、试剂盒 限制性缓冲液仪器、耗材 琼脂糖凝胶实验步骤 1. 7~20 μg 基因组 DNA 稀释到 500 μl 合适的限制性缓冲液中。4℃ 过夜。2. 每管加 10~20 单位限制性酶。孵育 4~6 小时。10 μl 消化液在小琼脂糖凝胶上电泳检测消化的程度。如果需要,
双杂交和其他双成分系统实验(四)
21. 测定转录活化。这个实验可以利用牙签重新划线培养或利用多支管/蛙形器来进行,在分析大量阳性克隆时,多支管/蛙形器是非常有用的(有关蛙形器的详细情况请参见图 18-10)。1) 通过直接划线培养测定a. 使用一个平头牙签分别在下面的 4 个平板上复制和主板上相同的栅格。使用相同的牙签在四个平板上
双杂交和其他双成分系统实验(三)
第三阶段 阳性相互作用的再次确定材料缓冲液和溶液乙酸铵(7.5 ml/L)氯仿乙醇异丙醇裂解液酶解酶 100T 以 2~5 mg/ml 溶解于拯救缓冲液中或β-葡糖醛酸酶 100000 单位/ml(Sigma)按 1:50 稀释于拯救缓冲液中每次使用均需配置新鲜的溶液。酚(早衡至 pH8.0)拯救
双杂交和其他双成分系统实验(二)
方法诱饵-LexA 融合蛋白的构建1.将编码诱饵蛋白的靶 DNA 克隆到 LexA 融合载体(如,pMW101 或 pMW103) 的多聚接头处,以合成一种框架内的 LexA 融合基因。确定诱饵序列的羧基端存在翻译终止序列。形成的质粒作为 pBait。2. 采用下列 LexA 融合基因和报道质粒的组
用检测和驱动-DNA-探针进行差异杂交实验
试剂、试剂盒 洗涤缓冲液 SDS SSC Blocking 溶液 经过剪切的鲑鱼精 DNA探针
双杂交和其他双成分系统实验(一)
实验材料 载体和酵母菌试剂、试剂盒 缓冲液和溶液SDS 凝胶上样缓冲液SDS 聚丙烯酰胺凝胶核酸和寡核苷酸抗体培养基仪器、耗材 专用设备实验步骤 第一阶段 诱饵-LexA 融合蛋白的鉴定材料缓冲液和溶液将贮存液稀释到适当浓度。2XSDS 凝胶上样缓冲液100 mmol/L Tris-Cl(pH6.