重庆研究院等在调控造血干细胞扩增的分子机制研究中获进展
造血干细胞（HSCs）是各个成熟血液谱系共同的祖细胞。HSCs增殖分化异常会导致白血病、红斑狼疮及贫血等血液疾病。通过促进HSCs扩增获取足够HSCs以进行骨髓移植是治疗血液系统疾病（白血病等）的关键，因此探讨HSCs增殖的调控网络颇为重要。 中国科学院重庆绿色智能技术研究院研究员李礼与西南大学教授罗凌飞等合作，综合利用细胞系和小鼠等动物模型，揭示了TANGO6通过COPI囊泡转运调控RPB2入核驱动细胞增殖新机制，并强调了其在促进造血干细胞扩增中的作用。相关研究成果以TANGO6 regulates cell proliferation via COPIvesicle-mediated RPB2 nuclear entry为题，发表在《自然-通讯》（Nature Communications）上。 该研究报道了TANGO6通过两次跨膜结构域锚定在COPI囊泡并携带RPB2。进一步的研究发现，通过SNARE复合体......阅读全文
干细胞的扩增及分化
干细胞的扩增因为干细胞的数量很小，所以有必要在体外扩增干细胞。为了克服干细胞频率低的局限性，研究人员致力于开发自体干细胞扩增的方法。然而，在长期扩增过程中保持干细胞的未分化、多系潜能是很重要的。在临床应用中，理想的方法需要开发由已知细胞因子和生长因子支持的无血清和无基质自体系统。干细胞分化干细胞研究
脂肪干细胞培养和扩增实验
脂肪干细胞的原代培养脂肪干细胞的传代培养实验方法原理实验材料脂肪干细胞 试剂、试剂盒ASC培养基
脂肪干细胞培养和扩增实验
脂肪干细胞的原代培养 脂肪干细胞的传代培养 实验方法原理 实验材料 脂肪干细胞
造血干细胞能再分化扩增吗
临床上广泛的安全性干细胞包括间充质干细胞和造血干细胞。间充质干细胞是贴壁细胞，适合于有固定形态的组织细胞的局部注射，正是因为其贴壁的特性， 应用过程中不太适合于血管注射，因为当注射量过大时贴壁细胞容易被吸附在血管上，严重时容易引起血管阻塞， 而器官或组织血流不通畅会造成严重后果，甚至有生命危险。而造
脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的原代培养
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基仪器、耗材组织培养瓶 25cm2实验步骤(a)待细胞贴壁生长2〜4天后换液。(b)换液时通过弃去培养基，从而去除未贴壁的细胞。(c)以后每周更换培养基2次。
脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的传代培养
分离获得ASC后，可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后，传代2〜3次，ASCs呈现单层，大而扁的细胞形态，其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时，它们形态上呈纺锤体形，类似于成纤维细胞。来源：《人干细胞培养》实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基PBSA胰蛋白酶仪器、耗材组织培养瓶 25
上海生科院实现肌肉干细胞在体外扩增
5月15日，学术期刊Cell Research 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所胡苹研究组和王红艳研究组合作研究的最新论文：Combination of inflammation-related cytokines promotes long-term muscl
胎肝造血干细胞扩增功能单元“HSC－PLUS”
血液作为生命的河流，源源不断地为机体提供营养物质和免疫保护。作为血液源头的造血干细胞，具有自我更新和多向分化的能力，不仅能够维持机体的终身造血，也是恶性血液疾病移植治疗的重要细胞来源【1,2】。但是，造血干细胞来源不足却是限制其推广的瓶颈。如何扩增足够数量的功能性造血干细胞，一直是基础科学研究的
《自然》：造血干细胞体外千倍扩增
几十年来，科学家都在追求能够在体外大量扩增造血干细胞（HSC）的办法。 造血干细胞移植是血液肿瘤等血液病的终极解决方案，也与近几年火热的基因治疗相关。但造血干细胞扩增之难始终局限着临床应用。 如今这个问题有了一个意想不到的解答。美日两国科学家团队联手发现，阻碍造血干细胞扩增的是培养基中存在的
JCI：表观遗传学重编程诱导脐血干细胞扩增
患有白血病、淋巴瘤和其他血液相关疾病的成年人，可能受益于常用于儿科患者的救生治疗方法。目前，西奈山伊坎医学院的研究人员研制出一种新技术，能使脐血（cord blood，CB）干细胞大量地产生，使其在成人移植中更加有用。相关研究结果发表在《The Journal of Clinical Inves
单细胞水平揭示造血干细胞扩增的动态图谱
造血干细胞具有自我更新和分化的生物学特征，既可以维持其自身在造血组织中的恒定数量，又能向红系、粒系、巨核系和淋巴系等多种血细胞分化。造血干细胞移植广泛应用于白血病、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征等临床血液系统恶性肿瘤的治疗，然而，造血干细胞来源不足，限制其广泛应用。因此，如何模拟体内造血干细
广州生物院阐明ANGPTL7促进造血干细胞扩增机理
1月30日，国际学术期刊Haematologica 在线发表了中国科学院广州生物医药与健康研究院李鹏研究组的最新研究成果ANGPTL7 regulates the expansion and repopulation of human hematopoietic stem and progeni
上海生科院973项目解析造血干细胞扩增分子机制
国际学术期刊Cell Research在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所刘小龙研究组的研究论文Lis1 is required for the expansion of hematopoietic stem cells in the fetal liver。该成果揭
核酸扩增—链置换扩增技术(SDA)
SDA是一种基于酶促反应的DNA体外等温扩增技术，采用标记的两种不同荧光基团的探针。在SDA过程中，该探针被掺入到双链扩增产物中，由限制内切酶的酶切使淬灭基团与荧光基团分开，从而释放荧光，用荧光偏振检测法定量检测。SDA较之PCR有更高的扩增效率，耗时仅30min。其基本系统包括一种限制性核酸内
新型扩增多潜能干细胞的分离、培养和鉴定的实验方案
小鼠胚胎发育从单个受精卵到8细胞早期具有全能性，即单个卵裂球具有分化为胚胎和胚外组织各种类型细胞的潜能。8细胞后期胚胎开始第一次谱系分离，外层的细胞形成滋养外胚层（TE），以后分化为胎盘的主要细胞成分，滋养层细胞；内在的细胞形成内细胞团（ICM），在囊胚阶段，内细胞团进一步分化为上胚层（epib
核酸扩增—环介导的等温扩增法
2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）杂志上公开了一种新的适用于基因诊断的恒温核酸扩增技术，即环介导等温扩增技术，英文名称为“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世卫组织、各国学者和相关政府部门的
恒温核酸扩增技术的扩增速度
由于恒温核酸扩增只需要在一个温度下进行，相比较于PCR不同温度之间的循环，恒温扩增不需要反复的升温降温过程，有些恒温扩增的速度是快于PCR的扩增速度的。例如：环介导恒温核酸扩增（LAMP），重组聚合酶扩增法（RPA）以及切刻内切酶恒温扩增（NEAR）。目前英国公司optigene已经成功的改造了
核酸扩增—转录介导的扩增技术(TMA)
TMA是一种利用RNA聚合酶和逆转录酶在约42℃等温条件下来扩增RNA或DNA的技术，其原理是带有T7 RNA聚合酶识别的启动子序列的启动子引物与模板退火经反转录形成RNA-DNA杂交分子，被反转录酶的RNase H活性水解形成单链RNA，然后与引物2退火，通过反转录合成双链DNA，在T7 RN
基因扩增PCR的扩增与克隆方法介绍
①引物的序列应位于基因组DNA的高度保守区,且与非扩增区无同源序列。这样可以减少引物与基因组的非特异性结合,提高反应的特异性 ②引物长度:15-40bp为宜。引物过短或过长均可使反应的特异性下降。 ③引物的碱基尽可能随机发布,避免出现数个嘌呤或嘧啶的连续排列,G+C碱基的含量在40%-75%
MSCs培养物的扩增和冻存实验_冻存间充质干细胞的复苏
实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌CCMPBSA仪器、耗材塑料组织培养皿 15 cm微量移液器枪头用于Eppendorf P10P100和P1000非灭菌调至37°C的FisherScientificIsotemp水浴箱实验步骤(a)准备2个15 cm培养皿，加人25 ml预热的CCM。(b)从液氮罐
上海生科院揭示Lis1调控胚肝造血干细胞扩增的分子机制
国际学术期刊Cell Research在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所刘小龙研究组的研究论文Lis1 is required for the expansion of hematopoietic stem cells in the fetal liver。该成果揭
MSCs培养物的扩增和冻存实验_间充质干细胞（MSCs)的冻存
实验材料MSCs试剂、试剂盒α-MEMFBS组织培养级二甲亚砜（DMSO)冻存液：含30%FBS和5%DMSO的α-MEM。过滤除菌（为进一步确保安全和使冻存液澄清。高浓度血清和DMSO混合时冻存液会变混浊）仪器、耗材聚丙烯离心管15ml和50mlPBSA0.22μm滤膜的真空过滤器50ml冻存管2
PCR扩增过程
①首先是将含有待扩增DNA样品的反应混合物放置在高温（>91℃）环境下加热1分钟,使双链DNA变性,形成单链模板DNA；②降低反应温度（约50℃）,致冷1分钟,使寡核苷酸引物与两条单链模板DNA发生退火作用并结合在靶DNA区段两端的互补序列位置上;③将反应混合物的温度上升到72左右保温1-数分钟,在
PCR扩增仪
聚合酶链锁反应，Polymerase chain reaction，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于扩增特定的DNA片段，这种方法可在生物体外进行，不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。PCR这项技术，被广泛地运用在医学和生物学的实验室，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊
PCR扩增过程
①首先是将含有待扩增DNA样品的反应混合物放置在高温（>91℃）环境下加热1分钟，使双链DNA变性，形成单链模板DNA；②降低反应温度（约50℃），致冷1分钟，使寡核苷酸引物与两条单链模板DNA发生退火作用并结合在靶DNA区段两端的互补序列位置上;③将反应混合物的温度上升到72左右保温1-数分钟，在
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料 重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材
噬斑扩增实验
实验方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材杯状超
PCR基因扩增
实验概要PCR扩增目标DNA片段。实验原理多聚酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃
噬斑扩增实验
实验方法原理 痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。 实验材料 重悬重组噬斑 贴壁生长良好的
PCR扩增模板和抗体可变区基因的扩增
PCR 扩增模板和抗体可变区基因的扩增 如果构建Fab抗体库,必需利用RT-PCR获取抗体基因;构建ScFv抗体库,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在构建小鼠ScFv抗体库过程中,主要采用DNA作为扩增模板。 【材料和试剂】（1）PCR仪（2）Taq酶（3）氯仿（4）琼脂糖 【