关于离子色谱法的柱后衍生作用介绍
柱后衍生作用,将从柱子流出的洗出液与对被测物有特效作用的试剂相混合,在一反应器中生成带色的络合物(见配位化合物)。对衍生试剂最重要的要求是它们与被测物能生成络合物,但不与移动相生成络合物。柱后衍生法能用于测定重金属离子,所用的衍生试剂有茜素红S等。......阅读全文
气相色谱仪柱前衍生化的常见方法
衍生化技术是通过化学反应将样品中难于分析检测的目标化合物定量的转化为另一种易于分析检测的化合物,通过后者的分析检测可以对目标化合物进行定性和定量分析。 一、柱前衍生化的条件 首先,如果要是想在色谱中使用柱前衍生化,其衍生化反应应该满足以下几个条件: 1、反应能迅速、定量的进行,反应重复性好
液相色谱柱安装后使用介绍
色谱柱(安捷伦色谱柱)在使用前,进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。
色谱柱再生——污染填料后对色谱柱的处理过程
1、故障现象 用户反映YWG C18 10μ(4.6mmX150mm)色谱柱使用20天左右后,柱压升高约1Mpa左右,分离效果变差,用蒸馏水清洗色谱柱没有明显改善。 色谱柱分离度不好,柱效不高,可能是用户分析发酵液,简单的过滤后进样分析,其中的蛋白质等可能没有去除完全,致使过多的蛋白质沉淀在色谱柱中
色谱柱再生——污染填料后对色谱柱的处理过程
1、故障现象用户反映YWG C18 10μ(4.6mmX150mm)色谱柱使用20天左右后,柱压升高约1Mpa左右,分离效果变差,用蒸馏水清洗色谱柱没有明显改善。色谱柱分离度不好,柱效不高,可能是用户分析发酵液,简单的过滤后进样分析,其中的蛋白质等可能没有去除完全,致使过多的蛋白质沉淀在色谱柱中,加
镍柱纯化蛋白后,镍柱上的咪唑用除去吗
ni柱中的氯化镍可以与有his(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太
镍柱纯化蛋白后,镍柱上的咪唑用除去吗
财大气粗到只用一次的话,就不用去除了。如果和我做学生时一样,一定要去除哦。先用纯化buffer,再用无菌水,再用20%乙醇。
镍柱纯化蛋白后,镍柱上的咪唑用除去吗
ni柱中的氯化镍可以与有his(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。步骤是:过柱子前可以选择ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太
OPA柱前衍生氨基酸的液相色谱分析
OPA柱前衍生分析氨基酸
高效液相色谱柱前衍生荧光检测法测定游离脂肪醇
高效液相色谱柱前衍生荧光检测法测定游离脂肪醇摘要:本文利用新型荧光试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙酸(BCAA)作为柱前衍生试剂建立了测定游离脂肪醇的方法,实验以1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)环己碳二亚胺(EDAC)作为缩合剂,4-二甲氨基吡啶(DMAP)为催化剂,55℃下衍生反应25
高效液相色谱柱前衍生法测定蜜饯中的甜蜜素
高效液相色谱柱前衍生法测定蜜饯中的甜蜜素摘 要:目的:建立简便、准确、灵敏的测定蜜饯中甜蜜素含量方法。方法:在酸性介质条件下,溶液中的甜蜜素同次氯酸钠溶液发生反应,其衍生产物在紫外-HPLC 法下测定。结果:方法最低检出限为0.05g/kg,其在0.02~1.00mg/ml 范围内呈线性关系,相关系
气相色谱柱被污染后,怎样清洗
气相色谱仪是一种分离测定低沸点混合组分的重要仪器。调节阀被污染,气阻堵塞,调节精度降低或失灵——清洗;气路系统被污染——要恢复仪器在高灵敏度情况下操做,要吹洗很长时间(可能一周以上),污染严重时有时再也无法恢复。
色谱柱失效后的表现及失败原因
色谱柱失效主要表现为色谱分离不好和组分保留时间显著变短。色谱柱失效的主要原因是:对气固色谱来说是固定相的活性或吸附性能降低了,对气液色谱来说,是使用过程中固定液逐渐流失所致。
什么是衍生化?衍生化实验分类?
衍生化技术就是通过化学反应将样品中难于分析检测的目标化合物定量的转化成另一易于分析检测的化合物,通过后者的分析检测可以对目标化合物进行定性和(或)定量分析。该技术在色谱分析中得到广泛应用。按衍生化反应发生在色谱分离之前还是之后进行,可将衍生化分为柱前衍生化和柱后衍生化。1. 柱前衍生化的目的柱前衍生
反相高效液相色谱柱前衍生荧光检测法测定游离多胺
反相高效液相色谱柱前衍生荧光检测法测定游离多胺摘 要 合成新型荧光试剂1, 22苯并23, 42二氢咔唑292异丙基氯甲酸酯(BCIC)作为柱前衍生化试剂,在Eclip se XDB2C8色谱柱上,通过梯度洗脱对5种多胺进行了分离和在线质谱定性。在乙腈中,以硼酸钠缓冲液(pH 9)为催化剂, 40
柱后富集法解析天然物质的结构
图1. 所用LC-SPE-NMR/MS-系统示意图。迄今为止,未知天然物质的结构解析由于都以预先纯化为前提,因而费工、费时。本文介绍了一种自动柱后固相富集的新方法,能够对天然物质进行快速而有效的结构解析。通常未知天然物质的结构解析都是首先将原料抽提物经过多级的色谱分离,然后运用质谱和核
固相萃取柱上衍生气相色谱_质谱法测定水中烷基酚
摘 要 以烷基酚(APs)主要降解产物辛基酚(42t2OP) 、壬基酚(42n2NP)为研究对象,建立了固相萃取( SPE)柱上衍生化、气相色谱2质谱(GC2MS)法测定水中APs的分析方法。以C18柱为固相萃取柱、N, O2(三甲基硅)三氟乙酰胺(BSTFA)为硅烷化试剂,设计五因素四水平正交实验
带HIS蛋白用镍柱纯化后的保存问题
1.蛋白的保存很大程度上依赖于蛋白本身的结构稳定性,其次和保存条件优化有关;2.尽量避免蛋白的反复冻融,这会对蛋白的结构和活性造成破坏;像你说到的第二天就要用,根本没必要放在-70℃低温,一般来讲,尽量安排好实验周期,在3天内用完蛋白(4℃保存)是理想条件;3.如果不得不保存,要分装,留下马上就用的
带HIS蛋白用镍柱纯化后的保存问题
蛋白的保存很大程度上依赖于蛋白本身的结构稳定性,其次和保存条件优化有关;尽量避免蛋白的反复冻融,这会对蛋白的结构和活性造成破坏;像你说到的第二天就要用,根本没必要放在-70℃低温,一般来讲,尽量安排好实验周期,在3天内用完蛋白(4℃保存)是理想条件;如果不得不保存,要分装,留下马上就用的放在4℃,其
液相色谱柱前衍生法测定乳及乳制品中羟脯氨酸
目的: 建立液相色谱柱前衍生法检测乳及乳制品中羟脯氨酸的方法。方法: 样品经酸水解后,羟脯氨酸与异硫氰酸苯酯在碱性条件下衍生化,经反相液相色谱分离,二极管阵列检测器254 nm 检出,外标法定量。结果: 加标回收率在93. 3% ~ 104. 6%之间,相对标准偏差为0. 97% ~ 4. 3%。结
核苷酸衍生物胞苷酸衍生物介绍
CDP和CTP也是一类高能化合物。与磷脂类代谢有关的胞苷酸衍生物有CDP-胆碱、CDP-乙醇胺、CDP-二甘油酯等。
核苷酸衍生物尿苷酸衍生物介绍
在糖代谢中起着重要作用,UDP是单糖的活化载体,参与糖与双糖多糖的生物合成,如UDP-半乳糖是乳糖的前体,UDP-葡萄糖是糖原的前体,UDP-N-乙酰葡糖胺与糖蛋白生物合成有关。UDP和 UTP也是一类高能磷酸化合物。
15版药典中药黄曲霉毒素检测-免疫亲和柱:光化学柱后...
15版药典中药黄曲霉毒素检测 免疫亲和柱:光化学柱后衍生法本法系用高效液相色谱法(通则0512)测定药材、饮片及制剂中的黄曲霉毒素(以黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2总量计),除另有规定外,按下列方法测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂流动相:甲
什么是-衍生试剂?
衍生试剂是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。一般来说,一个特定功能的化合物参与衍生反应,溶解度,沸点,熔点,聚集态或化学成分会产生偏离。由此产生的新的化学性质可用于量化或分离。样品的衍生化的作用主要是把难于分析的物质转化为与其化学结构相似但易于分析的物质,便于量化和分离。
硝基呋喃衍生原理
硝基呋喃类原型药在生物体内代谢迅速,无法检测。但其代谢产物因和蛋白质结合而保证长时间稳定存在。所以一般以硝基呋喃类药物代谢物为目标分析物的检测,来达到检测硝基呋喃类药物残留量的目的。检测前处理在检测前一般需要对样品进行处理,一般分为洗涤、水解和衍生化及净化等处理步骤,下面以国家标准检测方法(GB/T
硝基呋喃衍生原理
硝基呋喃类原型药在生物体内代谢迅速,无法检测。但其代谢产物因和蛋白质结合而保证长时间稳定存在。所以一般以硝基呋喃类药物代谢物为目标分析物的检测,来达到检测硝基呋喃类药物残留量的目的。检测前处理在检测前一般需要对样品进行处理,一般分为洗涤、水解和衍生化及净化等处理步骤,下面以国家标准检测方法(GB/T
硝基呋喃衍生原理
硝基呋喃类原型药在生物体内代谢迅速,无法检测。但其代谢产物因和蛋白质结合而保证长时间稳定存在。所以一般以硝基呋喃类药物代谢物为目标分析物的检测,来达到检测硝基呋喃类药物残留量的目的。检测前处理在检测前一般需要对样品进行处理,一般分为洗涤、水解和衍生化及净化等处理步骤,下面以国家标准检测方法(GB/T
硅烷化衍生化
(一)衍生化试剂 硅烷化试剂中的烷基硅烷基和反应物中羟基或氨基上的氢发生交换,形成烷基硅烷基产物。下面是常用的几种硅烷化试剂及其衍生化产物的例子。(1)N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA)和N,O-双三甲基硅基乙酰胺(BTA)能衍生化胺基和羟基。常用于体内药物及其代谢物的检测。文献报道
衍生试剂的优势
衍生试剂的优势: ● 提高色谱分辨率-增加气化-减少分子间氢键作用-分离结构相似化合物。 ● 提高质谱特性-更高的质量碎片-更高的S/N(信噪比)-更多的特征质量-增加分子离子的丰度/灵敏度。 ● 增加一些化合物的热稳定性-减少热降解-更高的温度适于快速分析。 ● 提
衍生化试剂要求
衍生化试剂要求:①衍生剂必须过量且稳定;不过量反应不完全,检测不充分。不稳定,重现性差;②衍生物、衍生产物和衍生副产物至少是好分离的。当然如果只能检测到衍生产物最好;③衍生反快速完全。反应慢,柱前衍生还可以,但柱后不行。因为流速固定,衍生池管路长度一定,留给衍生化的时间是一定的。柱前衍生可以在系统外
硅烷化衍生化
(一)衍生化试剂 硅烷化试剂中的烷基硅烷基和反应物中羟基或氨基上的氢发生交换,形成烷基硅烷基产物。下面是常用的几种硅烷化试剂及其衍生化产物的例子。(1)N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA)和N,O-双三甲基硅基乙酰胺(BTA)能衍生化胺基和羟基。常用于体内药物及其代谢物的检测。文献报道