RealspaceandrealtimedynamicsofCRISPRCas9visualizedby...（一）
Real-space and real-time dynamics of CRISPR-Cas9 visualized by high-speed atomic force microscopyAbstractThe CRISPR-associated endonuclease Cas9 binds to a guide RNA and cleaves double-stranded DNA with a sequence complementary to the RNA guide. The Cas9–RNA system has been harnessed for numerous applications, such as genome editing. Here we use high-speed atomic force microscopy (HS-AFM) &nbs......阅读全文
Realspace－and－realtime－dynamics－of－CRISPRCas9－visualized－by－...（一）
Real-space and real-time dynamics of CRISPR-Cas9 visualized by high-speed atomic force microscopyAbstractThe CRISPR-associated endonuclease Cas9 bind
Realspace－and－realtime－dynamics－of－CRISPRCas9－visualized－by－...（三）
Fig. 4Structural rearrangement of the HNH domain. a, b HS-AFM images of the HNH domain in the high-height (a) and low-height (b) states. The mean ce
Realspace－and－realtime－dynamics－of－CRISPRCas9－visualized－by－...（四）
Fig. 6HS-AFM observations of the non-specific transient binding of Cas9–RNA. a Sequential HS-AFM images of Cas9–RNA molecules transiently bound to
Realspace－and－realtime－dynamics－of－CRISPRCas9－visualized－by－...（五）
Correlation analysis of HS-AFM images2D correlation coefficients were calculated between the HS-AFM images of the first frame and each of the fram
Realspace－and－realtime－dynamics－of－CRISPRCas9－visualized－by－...（二）
ResultsRNA-induced structural stabilization in Cas9We first observed apo-Cas9 and pre-assembled Cas9–RNA on a mica surface treated with 3-aminopro
Exercise－12.9－－Eukaryote－Growth－Dynamics
Exercise 12.9 - Eukaryote Growth Dynamics LEVEL II Materials Suspension cultures set up from Exercise 12.8 Sterile transfer pipettes
Flow－Cell－Assays－with－Microtubules:－Motility/Dynamics－in－Fluorescence
Flow cell assays are very useful for studying microtubule motility, microtubule dynamics, kinetochore-microtubule interactions and action of severing
AKAP95－role－in－mitosis－and－chromosome－dynamics
The chromatin packaging of the genome is dynamic, changing with the cell cycle and with transcriptional regulation. During mitosis, chromatin is conde
Realtime－PCR－数据导出－——－ABI仪器篇（一）
1. Real-time PCR数据：Real-time PCR完成后，所有数据并非可以直接导出，由于每一次实验的情况都不相同，仪器的很多默认设定都会对最终数据结果造成重大偏差，所以在完成PCR过程后，需要人为对实验结果进行条件设置，才能提取到科学有效的实验结果，进而完成对实验结果的分析和判断。
Realtime－PCR
实验概要The exponential amplification via reverse transcription polymerase chain reaction provides for a highly sensitive technique in which a very low
RealTime－or－Kinetic－PCR
The DNA Facility houses the “real-time” or kinetic PCR instrument, the Applied Biosystems Model 7700 sequence detection system (the TaqMan instrument)
CRISPRCas9－原理
CRISPR/Cas技术是什么？CRISPR/Cas系统是一种原核生物的免疫系统，用来抵抗外源遗传物质的入侵，比如噬菌体病毒和外源质粒。同时，它为细菌提供了获得性免疫：这与哺乳动物的二次免疫类似，当细菌遭受病毒或者外源质粒入侵时，会产生相应的“记忆”，从而可以抵抗它们的再次入侵。CRISPR/Cas
RealTime－PCR实验流程
实验试剂Total RNA Kit ：Omega：(Cat.No．R6834)First Strand cDNA Synthesis Kit：GeneCopoeia(Cat.No．C0210A)2xAllinOneTMQ-PCRMix：GeneCopoeia（cat.No．D0101A)Primer
realtime－PCR体系的优化
实时定量PCR以其精确、快速、方便，越来越多的应用在科研、临床及检验检疫的各个领域。但是定量PCR是对精确性要求很高的实验，实验的条件对实验结果的影响非常大。在此谈谈体系优化的问题，希望对做相关试验研究的朋友有所帮助。1、基本参数的优化：1）MgCl2的浓度：在PCR反应中，MgCl2的浓度对酶的活
Realtime－PCR－基础知识
理论基础 聚合酶链式反应作为一种革命性的方法在生物学研究的历史中占据了重要的地位。以此为基础发展出包括real-time PCR在内的多项应用技术。自诞生后real-time PCR技术持续发展，从简单的增扩到整个PCR过程，real-time PCR表现出比PCR更敏感、更明确的定量分析特
realtime－PCR－数据分析
无论所使用的real-time PCR是何种型号，正确的数据分析对于获得有效的实验结果都是至关重要的。这里介绍有关real-time PCR数据分析的知识。 在讨论基本分析过程之前，先介绍如何设计一个好的实验。如果你是自己设计的引物和探针，那有助于下一步的工作。但是在有些情况下，人们使用出版文献上的
高分辨率评估人体细胞内的分子结构动态及药物作用机理
核糖体是细胞内的最丰富细胞器之一，负责将mRNA翻译为蛋白质，是很多小分子药物的作用靶点。核糖体在体外已得到广泛研究，但其在人体细胞翻译活跃过程中的分布仍不清楚。德国马克斯普朗克生物物理研究所利用高分辨率可视化的人类细胞翻译动态揭示抗癌药物作用机理。该研究成果于近日发表在《Science》杂志上
REALTIME－PCR－WITH－SYBR－GREEN－I－PROTOCOL
1、反应体系 25ulCocktail 20 ul: Primer FP 1 ul + Primer RP 1u + 2 * SYBR GREEN I MIX 12.5 + H2O 5.5 ul cDNA 5 ul2、Primer 浓度，需要摸索，从200nM到700nm等，设置不同浓度。3、每个引
realtime－PCR－常用仪器和探针
1.SYBR Green I：一种DNA结合染料，能非特异性地与双链DNA结合，结合后发出荧光，价格便宜，但因无特异性，易受到非特异性扩增和引物二聚体地的影响，是定量结果不可靠。可用融解曲线分析区分特异性和非特异性扩增，引物的设计和反应条件的优化对消除非特异性荧光有很大帮助。2.Taqman探针：
实时定量PCR（Realtime－quantitative－PCR）
mRNA表达的研究 微小残留病变的检测 肿瘤耐药基因表达的研究 病毒感染的定量监测Vs普通PCR，RT-PCR的优势 采用封闭的检测模式，因此扩增产物导致污染的可能性比普通PCR要小得多 。 扩增产物的检测在PCR扩增过程中同时进行，并且数据的采集、分析全部由 仪器 自动完成，因此整个检测所 需的时
Realtime－PCR实验注意事项
实验中的一些好习惯加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均移液枪用完之后要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性一定要记着关水浴箱，切记切记多和大家讨论，同时多关注别人讨论的经验，这几乎是最快提高的捷径了所有的试剂都自己配，出了问题才好找原因防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器
Realtime－PCR实验注意事项
Real-time PCR实验注意事项实验中的一些好习惯加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均移液枪用完之后要归到zui大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性一定要记着关水浴箱，切记切记多和大家讨论，同时多关注别人讨论的经验，这几乎是zui快提高的捷径了所有的试剂都自己配，出了问题才好
realtime－PCR－常用仪器和探针
SYBR Green I：一种DNA结合染料，能非特异性地与双链DNA结合，结合后发出荧光，价格便宜，但因无特异性，易受到非特异性扩增和引物二聚体地的影响，是定量结果不可靠。可用融解曲线分析区分特异性和非特异性扩增，引物的设计和反应条件的优化对消除非特异性荧光有很大帮助。 2.Taqman探针：
一种基于CRISPRCas9－的新型诱导谱系示踪技术
通常情况下，是癌症的转移而非原发病灶导致了癌症患者的死亡。转移不单是由遗传驱动的，这表明其他水平的失调可能也是癌症转移的推手。目前的方法无法同时捕获每个分析细胞的分子表型，这限制了人们对不同转移性克隆的研究。 前瞻性谱系示踪方法，例如慢病毒条形码，它涉及用独特的 DNA 条形码标记细胞。然而，
一种基于CRISPRCas9－的新型诱导谱系示踪技术
通常情况下，是癌症的转移而非原发病灶导致了癌症患者的死亡。转移不单是由遗传驱动的，这表明其他水平的失调可能也是癌症转移的推手。目前的方法无法同时捕获每个分析细胞的分子表型，这限制了人们对不同转移性克隆的研究。 前瞻性谱系示踪方法，例如慢病毒条形码，它涉及用独特的 DNA 条形码标记细胞。然而，
RTPCR、QPCR、Realtime－PCR、realtime－RTPCR你真的区分的开吗？
多少同学能将 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR区分开？有多少同学还在犯晕？今儿这贴，师兄就带你区分区分，拨开那扇 PCR 迷雾。什么是 RT-PCR？RT-PCR就是逆转录 PCR（reverse transcription PCR）或者称反转录PCR(reverse transcr
Dynamic－Monitoring－ofCellular－Remodeling－Induced－bythe－Transforming－Growth2
Results and discussionData acquisition demonstrated a linear increasing of the CI values in control cells during the time interval observed. However,
Dynamic－Monitoring－ofCellular－Remodeling－Induced－bythe－Transforming－Growth2
Results and discussionData acquisition demonstrated a linear increasing of the CI values in control cells during the time interval observed. However,
体积是CRISPRCas9的一半的新型基因编辑工具CasΦ
基因编辑（gene editing），又称基因组编辑（genome editing）或基因组工程（genome engineering），是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术。基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行定点“编辑”，实现对特定DNA片段的修饰。
体积是CRISPRCas9的一半的新型基因编辑工具CasΦ
基因编辑（gene editing），又称基因组编辑（genome editing）或基因组工程（genome engineering），是一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术。基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行定点“编辑”，实现对特定DNA片段的修