循环肿瘤DNA片段更短小有助开发液体活检新技术
根据一项发表在国际学术期刊Plos Genetics上的最新研究，循环肿瘤DNA与正常游离DNA在长度上存在差别，据此或可利用病人血液帮助开发检测肿瘤DNA的液体活检新技术。 液体活检技术可以从血液中发现和诊断癌症，还可以帮助监测癌症复发，评估治疗效果，但是这项技术仍然存在监测灵敏度的问题，大大限制了该技术的发展。美国犹他大学和华盛顿大学的研究人员发现，相比于正常细胞的DNA片段，来源于肿瘤细胞的循环DNA长度更短。 文章作者Hunter Underhill表示：“根据不同来源的循环DNA片段长度不同，可以检测到实体瘤的存在。” 研究人员在多形性成胶质细胞瘤小鼠模型中发现了上述现象。在研究中他们将人的多形性成胶质细胞瘤干细胞样系导入小鼠脑部，随后在血液中检测到了人类ctDNA，他们对比了人类肿瘤来源ctDNA和小鼠正常游离DNA的差别，发现人类ctDNA的长度一般为134个碱基，而小鼠正常游离DNA长度一般为167个碱......阅读全文
循环肿瘤DNA片段更短小－有助开发液体活检新技术
根据一项发表在国际学术期刊Plos Genetics上的最新研究，循环肿瘤DNA与正常游离DNA在长度上存在差别，据此或可利用病人血液帮助开发检测肿瘤DNA的液体活检新技术。 液体活检技术可以从血液中发现和诊断癌症，还可以帮助监测癌症复发，评估治疗效果，但是这项技术仍然存在监测灵敏度的问题，大
循环肿瘤DNA片段更短小－有助开发液体活检新技术
根据一项发表在国际学术期刊Plos Genetics上的最新研究，循环肿瘤DNA与正常游离DNA在长度上存在差别，据此或可利用病人血液帮助开发检测肿瘤DNA的液体活检新技术。 液体活检技术可以从血液中发现和诊断癌症，还可以帮助监测癌症复发，评估治疗效果，但是这项技术仍然存在监测灵敏度的问题，大
循环肿瘤DNA比循环正常DNA矮半截
如今，人们开始利用液体活检技术来诊断癌症，以及监测治疗效果，不过灵敏度是个问题。美国犹他州大学和华盛顿大学的研究人员近日在《PLOS Genetics》上发表文章，称来源于肿瘤的DNA片段比来源于正常细胞的片段要短，这个特征可用于改善液体活检。 犹他州大学的Hunter Underhill及其
－循环肿瘤DNA实时跟踪癌症发展
据本周三在《Nature Communications》杂志发表的一项新的研究中，科学家首次发现，流进入血液中的肿瘤DNA，可用于实时跟踪肿瘤的发展以及对治疗的响应。 三年多来，剑桥大学的研究人员，从肿瘤已经扩散到身体其他部位的一名乳腺癌患者身上，采集了外科肿瘤样本（活检）和血液样本。他们仔细
肝癌复发预测：循环肿瘤细胞DNA
根据最近公布的数据显示，广岛大学的研究人员发现，循环肿瘤细胞DNA是能够准确预测肝切除术后2年内肝细胞癌复发的一个因子。 “我们发现，循环肿瘤细胞DNA水平能够准确反映肝细胞癌的肿瘤进程和治疗效果，”广岛大学Atsushi Ono博士在新闻发布会上说。“通过进一步的研究，循环肿瘤细胞DNA的基
新方法检测循环肿瘤DNA效果良好
本周的《自然—医学》报道了一种可测量循环肿瘤DNA(ctDNA)的超灵敏方法，ctDNA是用来定量病人癌症患病程度的非侵入式生物标记。该方法比现有的手段更有效，成本更便宜，灵敏度更高，并可用在携带不同肿瘤基因型的病人身上并且其复发型变异数据已知。 Maximilian Diehn等人利
循环肿瘤DNA“液体活检”或将颠覆癌症治疗
循环DNA是一种无细胞状态的胞外DNA，存在于血液、滑膜液和脑脊液等体液中，其主要是由单链或双链DNA以及单链与双链DNA的混合物组成，以DNA蛋白质复合物或游离DNA两种形式存在。早在1947年Mandel和Metais就发现了循环核酸；30年后Leon等人的研究表明肿瘤患者外周血清DNA水平
－循环肿瘤DNA“液体活检”或将颠覆癌症治疗
循环DNA是一种无细胞状态的胞外DNA，存在于血液、滑膜液和脑脊液等体液中，其主要是由单链或双链DNA以及单链与双链DNA的混合物组成，以DNA蛋白质复合物或游离DNA两种形式存在。早在1947年Mandel和Metais就发现了循环核酸；30年后Leon等人的研究表明肿瘤患者外周血清DNA水平
Science子刊公布癌症液体活检成果：评估肿瘤DNA片段大小
液体活检已经成为了癌症检测的一大热门词汇，许多液体活检都是通过循环肿瘤DNA（ctDNA）进行检测，ctDNA就是肿瘤细胞遗传物质脱落后进入血液的碎片。 来自剑桥大学的科学家们建立了一种新方法，通过分析ctDNA的大小，在血液中检测难以追踪的肿瘤DNA（又称ctDNA），这种方法可提高对罹患脑
DNA片段的连接技术
一、目的与原理DNA酶切片段的联接是两DNA片段相邻的5‘磷酸和3’羟基间可有连接酶催化形成磷酸二酯键，这个连接反应在体外一般都有大肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶催化，但是分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶，因该酶在正常条件下，即能完成连接反应。本实验拟通过T4DNA连接酶对酶切片断的连
DNA片段回收与纯化
质粒、噬菌体等经酶切，电泳；PCR产物经电泳后，常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化，用于亚克隆、探针标记等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等，也有现成的试剂盒供应。一、冻融法1. 紫外灯下仔细切下含待回收DNA的胶条，将切下的胶条（小于0.6g）捣碎，置于
DNA片段的回收实验
树脂回收法 微量柱法 液氮冻融法 常规方法 实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收，具有纯度高、操作简洁等特点，经此方法
DNA片段的回收实验
实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收，具有纯度高、操作简洁等特点，经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程，PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来，成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收
DNA片段的制备方法
常用以下方法获得DNA片段：①用限制性核酸内切酶将高分子量DNA切成一定大小的DNA片段；②用物理方法(如超声波)取得DNA随机片段；③在已知蛋白质的氨基酸顺序情况下，用人工方法合成对应的基因片段；④从mRNA反转录产生cDNA。
检测循环肿瘤DNA追踪黑色素瘤进展
最近一项新研究报道称一种血液检测方法能够发现血液中死亡癌细胞的DNA片段，利用这种方法跟踪预测转移性黑色素瘤的进展和潜在扩散能力要比目前使用的标准检测方法更好。这项研究由纽约大学的研究人员领导完成，发表在国际学术期刊Molecular Oncology上。 目前临床使用的标准检测方法需要检测血
DNA片段的亚克隆实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 CIPdNTPDNA聚合酶T4聚合酶DTTATP仪器、耗材 水浴锅电泳仪培养箱实验步骤 1. 在20 μl 反应体积内用合适的酶完全消化DNA。75℃加热15 min，灭活酶。如若无需进一步的酶促处理，接歩骤6。2. 如果5’磷酸需要去除，加入2 μl 10×CIP
微量柱法纯化DNA片段
实验概要目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术，回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。目前待回收的片断主要有酶切片断和各种PCR片断；回收的介质主要有琼脂糖和PAGE；回收的方法主要有树脂回收、微量柱回收、玻璃奶回收、液氮冻冻融回收及透析袋大量回收等，下面分别介绍树脂、微量柱及液氮冻冻融回收
冻融法回收DNA片段
实验方法原理 冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便，但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。 实验材料
PCR扩增分离目的DNA片段
一、目的了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用，掌握PCR反应基本技术。二、原理PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领域，它不仅可用于基因分离克隆和核酸序列分
冻融法回收DNA片段
冻融法回收DNA片段可用于：（1）获取纯化的DNA片段；（2）回收PCR产物。实验方法原理冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便，但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。 实验材料DNA胶条试剂、试剂盒Tris-HCl饱和酚
DNA片段探针的应用实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 杂交液洗膜液仪器、耗材 注射器超声仪水浴锅实验步骤 1. 用5~20 ml 杂交液Ⅰ依次浸泡10~20张硝酸纤维素滤膜。滤膜装入杂交袋中，加入足够的杂交液，密封后42℃预杂交1 h。 2. 往带螺盖的试管中，加入放射性探针和2 mg 超声波处理的鲱鱼精DNA，煮沸1
DNA小片段的纯化回收
DNA 电泳小于100bp的片断通常在电泳时就比较难观察分辨，需要用分辨率很高的琼脂糖或者丙烯酰胺凝胶。比如Cambrex的NuSieve 3:1或者GTG，或者是大名鼎鼎的MetaPhor琼脂糖。所以实际上对于小片断，可以分为两种情况：一个是真的要回收电泳中特别小的片断，这种情况我们前面有提到，比
DNA片段的亚克隆实验
基本方案 凝胶块中DNA连接 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
DNA片段探针的应用实验
甲酰胺法 水溶液中杂交 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
DNA的酶切与连接——DNA片段连接
实验方法原理核酸片段可以通过连接酶的作用连接起来而获得重组分子。实验材料λDNA EcoT14I：由11条DNA片段组成试剂、试剂盒T4 DNA连接酶及其配套的10×连接缓冲液 0.5×TBE电泳缓冲液 6×Loading Buffer Goldview 琼脂糖仪器、耗材电泳仪 水浴锅 移液器 微波
循环肿瘤DNA为卵巢癌提供精准治疗新思路
恶性浆液性卵巢癌（HGSOC）是卵巢癌中最常见和最具侵袭性的亚型。 HGSOC肿瘤由几个具有大量突变的异质细胞群组成。这种遗传变异性使得难以找到能够杀死所有癌细胞的药物，并且细胞在治疗期间不会对其产生抗药性。 超过一半的诊断为高级别浆液性卵巢癌的患者在诊断后五年内死亡，即每年全球超过150,0
百余根硅纳米线阵列监测循环肿瘤DNA
近日，杭州电子科技大学副教授李杜娟通过引入高效能晶体管生物传感器，在癌症早期诊断以及术后监控上取得新进展。相关研究成果发表于《生物传感器和生物电子》Biosensors and Bioelectronics。 生物传感器是一类用于检测特定分析物的分析设备，通常由生物识别元件、换能器和电子检测
循环肿瘤DNA为难治性前列腺癌提供线索
前列腺癌是西方国家老年男性常见的癌症。许多患有前列腺癌的男性死于其他原因，而不知道自己身患癌症。多数前列腺癌生长非常缓慢，不会引起症状，但有些癌症是侵袭性的，生长和扩散的速度很快。然而，医生往往无法判断哪种前列腺癌是侵袭性的。近日，加拿大英属哥伦比亚大学领导的研究团队表明，血浆中循环肿瘤DNA的“年
NEJM：循环肿瘤DNA监测转移性乳腺癌潜力巨大
转移性乳腺癌的治疗需要监测肿瘤负荷以明确治疗应答，并且还需要改善生物标志物，如癌抗原15-3(CA 15-3)和循环肿瘤细胞。这类生物标志物已得到广泛研究。然而，对于乳腺癌，携带有肿瘤特异性变异的循环游离细胞DNA(循环肿瘤DNA)尚未得到充分的研究，或尚未与其他循环生物标志物进行比较。英国
DNA片段的回收实验——常规方法
实验材料NA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. PAGE电泳，如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断，如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中，用玻棒将凝胶捣碎，用1