降血压肽基因工程菌的构建及高效表达策略
摘要 降血压肽具有很好的降血压效果而且天然无毒副作用,是目前基因工程研究的热点之一。阐述了降血压肽基因工程菌构建的重要性,综述了国内外关于降血压肽及各种小肽表达方面的研究进展。探讨了降血压肽基因工程菌在构建过程中目的片段的选择、串联连接的方式、串联体的获得及表达载体的选择等方面采用的策略和依据,重点介绍了各种不同表达类型载体的优缺点。旨在能对今后做降血压基因工程菌的多肽表达提供参考,以方便实验设计。点击这里进入下载页面：进入下载页面......阅读全文
简述降血压肽的作用机理
正常人体内血压受很多因素调节，其中肾素一血管紧张素调节系统(RAS)和激肽释放酶一激肽系统(KKS)是其中一种重要的调节系统。血管紧张素转化酶（简称ACE)是以上2个调节系统中起关键作用的酶。降血压肽能够竞争性的与ACE结合，从而抑制其发挥作用。另外有研究表明富硒大豆低聚肽具有降低SHR血压的作
关于降血压肽的开发前景介绍
普遍采用治疗高血压的药物都属于化学合成药物，高血压患者长期服用合成药会产生各种副作用。来自食物蛋白的降血压肽对高血压患者可起到降压作用，安全性极高，长期使用无副作用，特别适用于作为口服药剂或功能性食品基料添加制成各种保健食品。我国对降血压肽的研究刚刚起步，但已经引起人们的重视，近年来逐渐成为降血
关于降血压肽的制备工艺介绍
１、降血压肽的制备— 酶解法 植物原料经酸碱处理，除去纤维素等杂质后，以及动物原料经过脱脂，去糖后，得到含量较高的蛋白质，然后加入特异性蛋白酶进行水解，分离得产物。 ２、降血压肽的制备— 提取法 多肽在高浓度盐存在时发生凝聚并析出沉淀，利用硫酸铵盐析作用有效性高，pH范围溶解度高，溶液散热
关于降血压肽的基本信息介绍
来源于食品的降血压肽是一类能够降低人体血压的小分子多肽的总称。一般具有活性的降血压肽的分子量在1000以下，通常是由蛋白酶在比较温和的情况下水解蛋白质获得。由于其降血压效果明显且对正常血压无影响、无副作用等优点，已成为研究的热点。 降血压肽主要有以下三种来源。 [1] 来自鱼贝类的肽类 C
关于降血压肽的生理功能介绍
降血压肽的作用机理是通过抑制血管紧张素转换酶(ACE)的活性来实现降血压功能的。ACE在肾一血管紧张素系统中对调节血压具有重要的生理功能。肾素作用于血管紧张素原放出非活性的血管紧张素Ⅰ，通过ACE的作用生成具有血管平滑肌活性的血管紧张素Ⅱ，从而引起血压升高。降血压肽通过抑制血管紧张素转化酶的活性
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是这种短片断双链RNA分子,能够
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明，一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达，诱使细胞表现出特定基因缺失的表型， 称为RNA干扰（RNA interference，RNAi）。siRNA（small interfering RNAs）就是这种短片断双链RNA分子，能够
合成肽疫苗的构建
合成肽疫苗能克服常规疫苗的缺点，很早就被认为是动物传染病预防用的终极疫苗。然而多年的研究结果表明，合成肽疫苗免疫动物后所起的免疫保护作用并没有象人们当初设想的那样理想，同时证明了构建的合成肽疫苗的抗原性及其免疫原性要受到其自身组成及宿主免疫系统等多种因素的影响。 在诱导机体产生免疫的过程中，单
siRNA表达载体的构建
实验方法原理 多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol
siRNA表达载体的构建
siRNA表达载体构建可应用于：（1）作为后基因组时代基因功能分析的有力工具；（2）基因组学、细胞信号传导通路分析；（3）药物靶点筛选、疾病治疗。实验方法原理多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RN
RNAi表达载体构建（一）
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是这种短片断双链RNA分
植物表达载体的构建
实验概要本实验介绍了一种构建植物表达载体的方法。实验步骤1. 植物正义表达载体的构建 1) 用SmaI和SacI双酶切pTriplEx2-GhMT3a和植物表达载体pBI121： 2) 进行琼脂糖凝胶电泳，回收GhMT3a片段和pBI121载体； 3) 连接：连接体系为：混匀后4-
siRNA表达载体的构建
实验方法原理 多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U
RNAi表达载体构建（二）
（2）、序列同源性分析: 将潜在的序列和相应的基因组数据库（人,或者小鼠,大鼠等等）进行比较,排除那些和其他编码序列/EST同源的序列.例如使用BLAST（ www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/）选出合适的目标序列进行合成.并非所有符合条件的siRNA都一样有效,其原因还不清楚
关于降血压肽的结构与活性的关系介绍
高活性的降血压肽都有类似的分子结构与氨基酸组成，根据降血压肽的结构与活性的关系，可将其对血管紧张素转化酶（ACE）的抑制作用分为3种抑制模型。 [2] １、降血压肽C-端竞争性抑制作用 1977年Cushman实验室提出降血压肽以C-端为主的作用模型：底物的C-端倒数第三个如为芳香族氨基酸，
关于抗菌肽的基因工程介绍
抗菌肽在动物体内含量极微。从动物体内提取抗菌肽产量低、费时长、工艺复杂、费用昂贵，无法实现大规模生产，这成为制约抗菌肽进入实际应用的最大障碍。因此，开展抗菌肽基因工程研究具有重要意义。 目前，已进入临床应用的基因工程药物多数是采用原核表达系统生产的，但由于抗菌肽对细菌的杀伤作用，不能用原核表达
关于合成肽疫苗的构建介绍
合成肽疫苗能克服常规疫苗的缺点，很早就被认为是动物传染病预防用的终极疫苗。然而多年的研究结果表明，合成肽疫苗免疫动物后所起的免疫保护作用并没有象人们当初设想的那样理想，同时证明了构建的合成肽疫苗的抗原性及其免疫原性要受到其自身组成及宿主免疫系统等多种因素的影响。 在诱导机体产生免疫的过程中，单
关于信号肽的分泌表达
外源蛋白在宿主菌，如大肠杆菌中的表达形式多为细胞内不溶性表达(包涵体)，少数为细胞外分泌表达。利用信号肽来引导外源蛋白定位分泌到细胞特定区间，提高可溶性，可避免因包涵体复性带来的困难。研究采用的信号肽来自表达系统自身的信号序列或外源信号序列，或两者兼而有之。研究表明，多种外源基因连接上信号肽后，
真核基因表达载体的构建
提高目的基因在哺乳动物细胞中表达的策略：1、DNA水平：增加基因拷贝数(1)高拷贝载体；（2）基因共扩增；2、转录水平：利用强启动子、增强子，可诱导启动子，如CMV、Tet；3、翻译水平：优化翻译起始序列和非编码区序列。本篇文章来源于网络，如有异议请联系我们，我们将在3个工作日内作出处理。
原核表达载体的构建介绍
1、获得目的基因 （1）通过PCR方法：以含目的基因的克隆质粒为模板，按基因序列设计一对引物（在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点），PCR循环获得所需基因片段。 （2）通过RT-PCR方法：提取总RNA，以mRNA为模板，逆转录形成cDNA第一链，以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物
基因编辑鼠－sgRNA表达载体构建
继上次发表的Guide RNA设计和筛选的相关知识之后，希望大家还没有忘记相关的操作和技巧，今天，我们就来和大家聊聊后续的实验，在基因编辑鼠的过程中，sgRNA表达载体是如何构建的呢？在靶点筛选结束之后，下一步就要进行sgRNA载体构建。在构建表达载体前，应根据实验目的选取合适的表达质粒。比如进行实
关于基因工程表达载体的技术前景介绍
科学界预言，21世纪是一个基因工程世纪。基因工程是在分子水平对生物遗传作人为干预，要认识它，我们先从生物工程谈起：生物工程又称生物技术，是一门应用现代生命科学原理和信息及化工等技术，利用活细胞或其产生的酶来对廉价原材料进行不同程度的加工，提供大量有用产品的综合性工程技术。生物工程的基础是现代生命
合成肽疫苗的构建及分子组成
发展史 早在18世纪末期,英国人Edward Jenner首先用牛痘材料接种儿童来预防天花,获得成功,这就是人类历史上第一个生物制品———牛痘疫苗的问世。从此,人们开始运用疫苗来预防或治疗许多种疾病。传统疫苗是将病原微生物通过物理的或化学的方法灭活或将其毒力减弱,以及天然的弱毒微生物而制备成的
靶向－EGFR基因－siRNA表达载体的构建
实验材料靶向EGFR基因siRNA试剂、试剂盒pSilencer2.1-U6载体EcoR IBamH IT4 DNA连接酶鼠抗人anti-EGFRFITC标记兔抗小鼠IgGCy3标记兔抗小鼠IgG甘油多聚甲醛二甲基亚砜仪器、耗材流式细胞仪荧光显微镜二氧化碳细胞培养箱酶标仪培养板盖玻片载玻片利用Lip
筛选质粒载体构建表达文库实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 氯仿 裂解缓冲液 检测抗原-抗体复合物所用试剂 SM TNT 缓冲液 洗涤缓冲液
筛选质粒载体构建表达文库实验
检测结合抗体的方法有以下 3 种：放射化学筛选，生色反应筛选及化学发光反应筛选。3 种方法的优缺点在本章导言中有所论述。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒封闭缓冲液氯仿裂解缓冲液检测抗原-抗体复合物所用试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓
筛选质粒载体构建表达文库实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液氯仿裂解缓冲液检测抗原-抗体复合物所用试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓冲液 125I 标记的蛋白质 A 或 125I 标记的免疫球蛋白放射性碘化第二抗体第一抗体LB 或 SOB 琼脂平板仪器、耗材 空气培养箱平头镊子 装有防水黑墨水（印度墨水）并带有 18 号针头的注射器硝酸纤维
酵母表达载体的构建与酵母转化
实验概要本实验介绍了酵母表达载体的构建、酵母转化方法及酵母抗逆实验。主要试剂试剂配制：1 .1 M Tris.Cl(pH 7.5)(100 ml)：12.1g Tris碱，加80 ml ddH2O，浓HCl调pH 7.5，定容至100 ml；2. 0.5 M EDTA(pH 8.0) (100 ml
外治法降血压
1.怀牛膝、川芎、罗布麻叶各50克。将上药共研极细粉末装瓶备用。取药粉15～20克用75%酒精调成糊状，置于脐部，纱布覆盖，胶布固定。每两天换药一次，10次为一疗程。 2.吴茱萸、五倍子各30克，钩藤15克，将上药水煎取汁1000毫升待温，浸泡双足，每次20～30分钟，每日两次。10天为一
构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验
实验方法原理 实验材料 E.coli MC 1061 （Bio－Rad）硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液试剂、试剂盒 DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶（CIP）限制性内切核酸酶反应缓冲液 4dNTPTris·Cl培养基仪器、耗材 QIAquick 胶回收试剂盒质粒制备试剂盒DNA 合