生物素酰化探针的制备实验——切口平移法

在标准的切口平移实验体系中,生物素-11-dNTP取代了dNTP,DNA酶I 的浓度调整到可生成长100~500个核苷酸的范围,其他生物素酰化的核苷酸也可代替生生物素-11-dNTP。实验材料DNA试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤1. 混合以下物质于100 μl 反应体积:(1)10 μl 10×大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ缓冲液(2)10 μl 0.5 mmol/l 3dNTP混合液(3)10 μl 0.5 mmol/l 生物素-11-dNTP贮存液(4)10 μl 0.5 mmol/l 2-ME(5)2 μg DNA(6)20 U 大肠杆菌聚合酶Ⅰ(7)DNA酶Ⅰ贮存液,用钱用冷水稀释1000倍(8)加水到100 μl,15℃温育2~2.5 h。2. &n......阅读全文

亲和柱的制备实验

配基固相化技术             实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是

制备DNA测序模板实验

制备单链M13噬菌体DNA 小量裂解物中制备λ噬菌体DNA 双脱氧测序的双链质粒DNA的碱变性             实验材料 大肠杆菌

MVA-病毒储液制备实验

实验材料成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的维持培养基消化 7 瓶

亲和柱的制备实验

实验方法原理 溴化氰活化的琼脂糖凝胶用于配体固相化是实验室最常用的固相化技术之一。其原理是溴化氰活化的介质与配体主要的氮基反应形成异脲键。但是这样偶联的亲和柱多次重复使用时,将会有少量配体脱落,所以反复使用的亲和柱应考虑选择其他活化的介质。异脲键的形成伴有荷电基团的增加,将会影响离子交换作用。为了克

正丁醚的制备实验

实验步骤 在50 mL两颈瓶中加入5.2 mL 正丁醇, 0.8 mL 浓硫酸,两粒沸石,摇动混合均匀,安好装置。分水器内加水至支管后放去0.5 mL水即分水器内有( V-0.5 ) mL水。开始小火加热,保持瓶内液体微沸,开始回流,温度控制在134~135 ℃,待分水器已全部被水充满时

转运反应成分的制备实验

制备藻胆色素蛋白标志物胞质液的制备细胞通透化转运反应试剂、试剂盒APC 悬浮液                                                                  HEPES                                        

中国兰琼脂平板制备实验

实验方法原理 1.  中国兰为指示剂,其水溶液煮沸灭菌后备用。蔷薇酸乙醇溶液,无需灭菌,但加入培养基时应避开火焰,以免燃烧。2.  中国兰在酸性环境中呈兰色,在碱性环绕中呈红色,蔷薇酸在酸性环境中呈黄色,在碱性环境中呈淡红色,此培养基制成后,pH 7.4,呈淡紫红色,过碱呈鲜红色,过酸呈兰色都不

酒剂、酊剂的制备实验

浸渍法             实验材料 谷类酒 试剂、试剂盒

鲑精担体DNA制备实验

利用这一方案可获得剪切好的高质量鲑精担体DNA,它可用于转化实验和其他需要高质量担体DNA的实验中。实验材料鲑精DNA试剂、试剂盒TE酚氯仿乙酸钠仪器、耗材离心机摇床超声仪实验步骤1.  将TE缓冲液加入装有干燥鲑精DNA的烧杯中,至鲑精DNA浓度为5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反复吹打后

冰冻组织制备及切片实验

实验材料冰冻组织试剂、试剂盒异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤1.  将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰冻,烧杯中加CryoKwik(或异戊烷)。2.  在滤纸条一端以铅笔注明标签,用镊子将样品放于另一端。 3.  保证C

MVA-病毒储液制备实验

实验方法原理 实验材料 成片 CEF 或 BHK-21 细胞改造的痘苗病毒试剂、试剂盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基仪器、耗材 150 cm2 组织培养瓶CO2培养箱Sorvall 离心机250 ml 无菌离心瓶实验步骤 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml

酵母蔗糖酶的制备实验

研磨法             实验方法原理 蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranosidefructohydrol

正丁醚的制备实验

实验步骤在50 mL两颈瓶中加入5.2 mL 正丁醇, 0.8 mL 浓硫酸,两粒沸石,摇动混合均匀,安好装置。分水器内加水至支管后放去0.5 mL水即分水器内有( V-0.5 ) mL水。开始小火加热,保持瓶内液体微沸,开始回流,温度控制在134~135 ℃,待分水器已全部被水充满时表示反应已基本

转运反应成分的制备实验

制备藻胆色素蛋白标志物 胞质液的制备 细胞通透化 转运反应             试剂、试剂盒 APC 悬浮液

鲑精担体DNA制备实验

实验材料 鲑精DNA试剂、试剂盒 TE酚氯仿乙酸钠仪器、耗材 离心机摇床超声仪实验步骤 1.  将TE缓冲液加入装有干燥鲑精DNA的烧杯中,至鲑精DNA浓度为5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反复吹打后,用搅拌棒于4℃搅拌过夜,最终获得一种均匀粘稠液体。 2.  将一个较大的超声波探头插入烧杯

肉汤培养基制备实验

仪器、耗材鲜牛肉末蛋白胨氯化钠蒸馏水实验步骤去脂、去筋鲜牛肉末50g,加水100ml,搅匀,放冰箱过夜,取出煮沸30分钟,用纱布过滤,补足水量为100ml,即为牛肉浸液。加入蛋白胨1g,氯化钠0.5g,加热溶解。调整PH值为7.6,煮沸10分钟,过滤,分装,高压灭菌备用。

免疫血清的制备实验

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990)  实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化

无蛋白血滤液制备实验

实验方法原理 钨酸法实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。三氯醋酸法实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除去,上清液为无蛋白血滤液.实验步骤 一、钨酸法实验试剂:1. 100g/L钨酸钠溶液:

接种环、接种针制备实验

实验方法原理接种环(针)又称白金耳(针),是细菌学检验的常用工具。它的正确使用是一项重要的基本技术。实验步骤接种环(针)由三部分组成。环(针)部分以白金丝制成为佳,因易于传热和散热并不生锈而经久耐用。但因价昂,通常多用镍丝代替。常用环直径约为2-4mm,针长50-80mm,其一端固定于金属柄上,金属

DNA-亲和介质的制备实验

DNA 亲和介质的制备实验             试剂、试剂盒 ATP [y-32P]ATP T4多核苷酸激酶

制备DNA测序模板实验

实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 LBTEM13聚乙二醇容易让顶层琼脂乙酸钠乙醇仪器、耗材 巴斯德吸管试管离心机实验步骤 1.  如果起始用M13复制型DNA或M13单链DNA,以0.5 ng 重组M13mp复制型DNA或5~10 ng 单链DNA转化40 μl  感受态大肠杆菌DH5αF'株

无蛋白血滤液制备实验

无蛋白血滤液制备实验可以用于:(1)蛋白质沉淀剂沉淀蛋白;(2)用过滤法或离心法除去沉淀的蛋白。实验方法原理钨酸法实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。三氯醋酸法实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将

质粒DNA的小量制备实验——

实验采用国产的质粒小量抽提试剂盒。它是一种新型的离子交换柱,在特定的条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的快速纯化。实验材料DNA试剂、试剂盒LB培养基卵清溶菌酶异丙醇TE仪器、耗材离心机漩涡混合器水浴锅实验步骤一、实验步骤1.  接种一

抗肽抗体的制备实验

提高免疫原性肽的抗血清,是最简单的方法,获得非隔离的蛋白质的抗体,例如,对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。 这种方法也是有用的,当隔离的抗原是困难或费时,或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。实验步骤:  将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠

质粒DNA的小量制备实验

实验方法原理 当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。实验材料 细菌克隆试剂、试剂盒 LB培养基抗生素葡

质粒DNA的大量制备实验

碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法             实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制

实验技术:组织切片的制备

【目的】组织标本必须首先被制成组织切片,再经过染色处理,然后才能在显微镜下进行临床诊断和科学研究。【原理】苏木素染色结合伊红染色是常规组织学染色技术,也称为H & E染色。苏木素是碱性染色,细胞核被染成深紫或兰色,常用作核染色;伊红是酸性染色,细胞浆染呈红色,常用作胞浆染色。【材料】1.试剂和溶液(

质粒DNA的小量制备实验

碱裂解小量制备法 煮沸法             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

质粒DNA的大量制备实验

实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制备也简单易行,但得到的DNA比较粗制。高纯度的质粒DNA可通过氯化铯/溴化乙锭平衡离心法或层析法进一步纯化粗制DNA得到。实验材料 培养基菌株试剂、试剂盒 EDTASDS乙醇乙酸钾异丙醇仪器、耗材 离心管实验

MVA-病毒储液制备实验

基本方案 免疫染色法滴度测定             实验方法原理 实验材料 成片 CEF 或 BHK-