从骨骼肌分离和培养单肌纤维
实验方法原理研磨用胶原蛋白处理的整块骨骼肌，以分散为单肌纤维。在 Matrigel 上培养单肌纤维，然后收集迁出的细胞。实验材料MatrigelDMEML-谷氨酰胺Ⅰ型胶原蛋白试剂、试剂盒青霉素和链霉素混合液鸡胚提取液马血清胎牛血清接种培养液增殖培养液仪器、耗材Petri培养皿改良Pasteur吸管24孔培养板钻石笔透照立体解剖显微镜实验步骤1. 处死动物后立即切除肌肉。注意夹持肌腱，以减少对肌纤维的损伤。2. 将肌肉放入 0.2 % Ⅰ型胶原蛋白酶液（W / V，用 DMEM 配制），在 35°C 条件下用摇动水浴箱孵育 60~90 min。较大肌肉需要较长消化时间，一般情况下取自 6~8 周大鼠的趾长伸肌需消化 60 min 。3. 准备盛肌纤维的 Petri 培养皿，即用马血清浸洗培养皿，以免肌纤维黏附于培养皿底壁上。然后，加入 20 ml DMEM。4. 消化后将肌肉移入盛有 DMEM 的 Petri 培养皿。5. 在透......阅读全文
从细胞培养液中怎么分离蛋白质
蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤：（一）材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有：1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用，使细胞破碎。常用设备有
接种、分离纯化和培养技术（二）
二、分离纯化 含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物（Mixed culture）。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为纯培养（Pure culture）。在进行菌种鉴定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化，方法有许多种。１、倾注平板法
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗，然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口，用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下，用一把镊子夹住身体，另一把镊子拉开皮肤。4) 将
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗，然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)
微生物分离培养和鉴定
1.培养基的选择用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶，如需氧+厌氧，需氧+高渗等。2.分离和鉴定 当观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时，应及时作如下检验：（1）涂片染色镜检，结果及时与临床联系；（2）转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定；（3）同时做药敏试验
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗，然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口，用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮
接种、分离纯化和培养技术（一）
一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。１、接种工具和方法 在实验室或工厂实践中，用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同，接种针的针尖部常做成不同的形状，有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面
小鼠角质细胞的分离和培养
实验概要本实验是根据Hennings等（1980）的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS： NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS： NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠，流
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS： NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤将1~2天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠，流水彻底
正常小鼠原代骨骼肌细胞培养
PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液： 1 × PBS
从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体
实验材料细胞试剂、试剂盒粗匀浆液仪器、耗材塑料离心管实验步骤1. 向 6 ml 的粗匀浆液中（细胞收获后以大约 5X105 /ml 悬于 0.25 mol/L 蔗糖，10 mmol/L pH 7.4 的 Tris-HCl 中），加入 6 ml 含有 10 mmol/L pH 7.4 Tris-HC
从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离
实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
结肠隐窝的分离和培养实验
实验方法原理 用胶原蛋 A 酶 和 dispase 消化切碎的组织块，然后用山梨糖醇分离隐窝。试剂、试剂盒 HBSS PSG消化混合液生长培养液S-DMEM仪器、耗材 90 mm Petri 培养皿 普通容器24 孔培养板保鲜膜培养瓶 Moveue 吸管实验步骤 材料无菌1. HBSS/PSG: 添
平滑肌细胞的分离和培养
实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液 试剂、试剂盒平滑肌培养液 仪
平滑肌细胞的分离和培养
实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液试剂、试剂盒平滑肌培养液仪器、耗材Petri培养皿手术刀和10号手术刀片解剖剪组织镊实验步骤1. 从小牛取胸主动脉。2. 将胸主动脉浸入 Hanks 液。3. 分离细胞之前将动脉放在冰上。4. 将动脉放入 150 mm × 25 mm Petri 培养皿。5
原代细胞分离和培养基本步骤
1、器官和组织的选择 尽可能的去除不必要的组织和血迹。 2、原代细胞的分离 （1）应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。 （2）根据组织来源不同，可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。 3、原代细胞的培养： （1）PriCells原代
微生物的接种、分离和培养
一、目的要求1、掌握各种分离、接种方法。2、掌握无菌操作基本环节。二、实验说明微生物在自然界中呈混杂状态存在，要获得所需菌种，必需从中把它们分离出来。在保存菌种时不慎受到到污染也需予以分纯。微生物分离和纯化的方法很多，但基本原理却是相似的，即将待分离的样品进行一定的稀释，并使微生物的细胞（或孢子）尽
细菌接种、分离纯化和培养技术（2）
２、涂布平板法首先把微生物悬液通过适当的稀释，取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上，然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上，经恒温培养便可以得到单个菌落。（图３－５，b）３、平板划线法最简单的分离微生物的方法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的
细菌接种、分离纯化和培养技术（1）
一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。１、接种工具和方法在实验室或工厂实践中，用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同，接种针的针尖部常做成不同的形状，有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面要将菌液
结肠隐窝的分离和培养实验
实验方法原理用胶原蛋 A 酶 和 dispase 消化切碎的组织块，然后用山梨糖醇分离隐窝。试剂、试剂盒HBSS PSG消化混合液生长培养液S-DMEM仪器、耗材90 mm Petri 培养皿普通容器24 孔培养板保鲜膜培养瓶Moveue 吸管实验步骤材料无菌1. HBSS/PSG: 添加 lOOU
血细胞分离培养方法和步骤2
收集浑浊带分离获得的淋巴细胞，用无钙、镁离子的PBS洗3次后，再用培养基洗1次后计数，分瓶培养。此法分离获得淋巴细胞纯度高。分离液的制备：9% Ficoll（20℃下相对密度约1.020）24份与33.4%泛影葡胺（用泛影钠或Conray400也可，在20℃下相对密度约1.200）10份混合后，
原代细胞分离和培养基本步骤
原代细胞分离和培养基本步骤 1、器官和组织的选择尽可能的去除不必要的组织和血迹。 2、原代细胞的分离（1）应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。（2）根据组织来源不同，可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。 3、原代细胞的培养：（1）PriCells原代细胞特制培养基（2
微生物的接种、分离和培养
实验方法原理微生物的接种分离和培养是做细胞代谢分析和体外实验的基本步骤之一，接种分离的好坏直接影响微生物的培养以及后续的实验操作和结果（1）用于细胞分离（2）细胞纯化（3）细胞增殖培养。实验材料大肠杆菌枯草杆菌金黄色葡萄球菌酵母菌试剂、试剂盒来苏尔石炭酸溶液福尔马林牛肉膏蛋白胨仪器、耗材恒温培养箱接
血细胞分离培养方法和步骤1
以前认为红细胞、粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等血细胞都属终末分化细胞，很难在体外培养生长或仅能短期培养而不能传代，近年来由于细胞培养技术的发展，已有血细胞培养成功的报道，正常血细胞在体外培养生长时间短，只有白血病细胞，血友病细胞、淋巴瘤细胞可培养成功并建立细胞系，但多半为EB病毒等致瘤病毒引起的转化细
怎样从总rna中进行mrna的分离和纯化
真核生物的mRNA分子是单顺反子，是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物，因此，高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA，理论上认为每克细胞可分离出5～10mg RNA。其中
从自然环境中分离和纯化噬菌体实验
实验方法原理因为噬菌体是专性寄生物，所以自然界中凡有细菌分布的地方，均可发现其特异的噬菌体的存在，亦即噬菌体一般是伴随着宿主细菌的分布而分布的，例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌，故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体；乳牛场有较多的乳酸杆菌，也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。虽然近年的研究表明，自由噬菌
怎样从总rna中进行mrna的分离和纯化
真核生物的mRNA分子是单顺反子，是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物，因此，高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA，理论上认为每克细胞可分离出5～10mg RNA。其中
怎样从总rna中进行mrna的分离和纯化
真核生物的mRNA分子是单顺反子，是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物，因此，高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA，理论上认为每克细胞可分离出5～10mg RNA。其中
怎样从总rna中进行mrna的分离和纯化
真核生物的mRNA分子是单顺反子，是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物，因此，高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA，理论上认为每克细胞可分离出5～10mg RNA。其中