病毒的分离实验_标本法
实验步骤标本的采集：病毒分离常用的标本有血液，脑脊液，粪便，直肠拭子，咽喉含漱液，咽拭子，尸检组织等。所取标本的种类视疾病性质而异。如呼吸道疾病常取咽喉洗液，咽拭子；消化道疾病取粪便，直肠拭子；神经系统疾病取脑脊液，粪便等。采取标本时应避免污染，有些标本如粪便，咽喉洗液，虽本身含有大量杂菌，但为保持良好工作习惯，仍应用无菌手续操作，同时可避免标本之间相互污染及保护工作人员的安全。标本取得后应放于消毒容器内，外面贴上患者姓名及采取日期，同时用专门表格登记标本编号，患者姓名，性别，年龄，住址，临床诊断，发病日期，症状及采取标本日期等。 标本采集具体方法如下：1、 粪便标本：挑取小指头大的粪便（约2 克左右）放入无菌广口瓶或硬纸盒中。2、 直肠拭子：如果急于需要得到粪便标本作病毒分离，可采取直肠拭子，其方法为用无菌棉拭子浸入Hank‘s 液或生理盐水，塞入直肠内，略加转动，待其沾有肠内容物，取出置于盛......阅读全文
冠状病毒的几个离心分离方案
方案一 连续蔗糖梯度：离心机，转头。单管配置：1）13PET管：20%-50%（W/W）连续蔗糖梯度。用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度：用20%，25%，30%，35%，40%，45%，50%（W/W）蔗糖液各1.5ml，从离心管低部逐层向上铺设（底部高密度），铺二管，直立在试管架上室温
冠状病毒的几个离心分离方案
方案一 连续蔗糖梯度：日立CPMX或WX系列离心机，P40ST转头13PET管或13PA管。单管配置：1）13PET管：20%-50%（W/W）连续蔗糖梯度。用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度：用20%，25%，30%，35%，40%，45%，50%（W/W）蔗糖液各1.5ml，从
中间丝的分离方法实验
从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝 从组织中分离中间丝 实验材料 细胞
树突细胞的分离实验（一）
基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花结 富 集DC此种技术用于分离DC已经使用了很多年，其间只经过了微小的修改（Steinman衫aZ.， 1979)材 料（带V 项 目 见 附 录 1)胶原酶消化的脾脏细胞悬液（见辅助方案）高密度牛血清白蛋白（BSA) 溶液R P M I 16
蛋白质的分离实验
实验方法原理 凡盐析所获得的粗制蛋白质（盐析得到的IgG）中均含有硫酸铵等盐类，这类将影响以后的纯化，所以纯化前均应除去，此过程称为“脱盐”（desalthing）。脱盐常用透析法和凝胶过滤法，这两种方法各有利弊。前者的优点是透析后析品终体积较小，但所需时间较长，且盐不易除尽；凝胶过滤法则能将盐除尽
蛋白质的分离实验
凝胶层析法 IEF（等电点聚焦电泳）法 实验方法原理 凡盐析所获得的粗制蛋白质（盐析得到的IgG）中均含有硫酸铵等盐类，这类将影响以后的纯化，所以纯
中间丝的分离方法实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1
线粒体的分级分离实验
高速离心法实验材料线粒体 仪器、耗材离心机 实验步骤 1. 将装有上清
高尔基体的分离实验
实验材料 雄大鼠试剂、试剂盒 匀浆缓冲液仪器、耗材 Polytron 匀浆器实验步骤 1. 将按要求进用标准食物和饮水的雄大鼠（约 250 g) ，用断头和放血的方法处死。2. 切下肝脏（10~13 g ) 并用刀片切碎。3. 用一只 Polytron 匀浆器（20 ST 或 10 ST；Brink
线粒体的分级分离实验
实验材料 线粒体仪器、耗材 离心机实验步骤 1. 将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20
IgG的分离与提纯实验
实验方法原理 硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液
高尔基体的分离实验
从大鼠肝脏中分离高尔基复合体 从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体 从植物组织中分离高尔基体 实验材料 雄大鼠
高尔基体的分离实验
从大鼠肝脏中分离高尔基复合体从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体从植物组织中分离高尔基体实验材料雄大鼠 试剂、试剂盒匀浆缓冲液
质壁分离的实验原理
当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，根据扩散作用原理，水分子会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而原生质层伸缩性较大，从而使二者分开；反之，外界溶液浓度小于细胞液浓度，则细胞通过渗透作用吸水，分离后的质和壁又复原。
血细胞的分离实验技术
采血 （一）材料与试剂 1．抗凝剂（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其钠盐或钾盐，它能阻止凝血酶原转化为凝血酶，进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白，从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml，市售肝素多为100U~126U／mg。（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一种螯合剂。用生理
中间丝的分离方法实验
从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝从组织中分离中间丝实验材料细胞 试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂
树突细胞的分离实验（二）
1.将2 管 I m l 的 4000U /m l 胶 原 酶 D 稀 释（足够用于2 0 个脾脏）： Im l 加 入 9m l H B S S(稀 释 至 400U /m l ，步 骤 8 使用）， I m l 加 入 39m l 的 H B S S (稀 释 至 100U /ml)。置
病毒中和实验
实验方法原理 病毒的复制需要宿主细胞供应原料、能量和复制场所，因此病毒必须在活的细胞内复制增殖。病毒进入机体后，吸附于敏感细胞的表面，然后通过穿入，脱壳，侵入细胞，进行病毒复制和装配，并引起机体感染。特异性的抗病毒抗体（中和抗体）与病毒结合之后，使病毒失去吸附、穿入宿主细胞的能力，从而阻止了病毒在宿
中科院武汉病毒所成功分离出寨卡病毒
昨日从中科院武汉病毒研究所获悉，该所通过与深圳出入境检验检疫局密切合作，成功分离出1株寨卡病毒，血清样本来源于从萨摩亚入境我国深圳的患者。 寨卡病毒在巴西、哥伦比亚等多个美洲国家和地区肆虐，该病毒可能引发新生儿小头症，从而被推上风口浪尖。寨卡病毒主要通过伊蚊传播，目前尚缺乏针对该病毒的特异性疫
加标回收实验加标量如何确定
加标回收实验加标量确定样液中待测组分的质量。样品分析过程中有蒸发或消解等可使溶液体积缩小的操作技术时，尽管因加标而增大了试样体积，但样品经处理后重新定容并不会对分析结果产生影响。比如采用酚二磺酸分光光度法分析水中的硝酸盐氮(GB7480287)，样品及加标样品经水浴蒸干后，需要重新定容到50mL再行
EB病毒的实验诊断
EBV分离培养困难，一般用血清学方法辅助诊断。 在有条件实验室可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV基因组及其表达产物。
昆虫病毒的培养实验
实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法，后者比较容易成功，使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾（Prodenialitura）核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后，在细胞核内形成多角体，多角体内包含着很多病毒粒子。斜
昆虫病毒的培养实验
实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法，后者比较容易成功，使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾（Prodenialitura）核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后，在细胞核内形成多角体，多角体内包含着很多病毒粒子。
病毒－DNA－的提取实验
实验方法原理 实验材料 全血试剂、试剂盒 裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材 离心机水浴锅实验步骤 1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀， 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀，再重复离心 1次，弃上清液
病毒的培养方法实验
实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便，适用于流感病毒，痘病毒，疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种，即绒毛尿囊膜接种法，羊膜腔（羊水囊）接种法，尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1. 鸡胚的检查将9～11 日龄鸡胚置于检卵器上，照视观察
线粒体分离实验—从组织中分离线粒体
实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏，注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中，剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片，用匀浆缓冲液（1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的
利用病毒从水中分离出氢
据美国物理学家组织网4月12日(北京时间)报道，美国麻省理工学院的研究人员利用病毒将氢从水中分离出来，在将水变成氢燃料的漫漫征程中迈出了关键一步。相关研究发表在最新出版的《自然—纳米技术》(Nature Nanotechnology)杂志上。 麻省理工学院材料化学家安琪拉·贝
我国首次成功分离出裂谷热病毒
近日，国家质检总局成功从全国首例输入性裂谷热患者样本中分离出裂谷热病毒，与此同时，军事医学科学院也成功分离获得裂谷热病毒，这是我国首次分离得到裂谷热病毒。 我国从未有过裂谷热的病例报道，也没有相应毒株，无法开展传播机制和致病机理研究，亦无相应疫苗、药物和诊断试剂。裂谷热病毒的成功分离，将为病毒
实验室准则：抗体质量的金标
几乎所有实验室都会用到抗体，抗体不仅是生命科学研究的重要工具，在免疫学诊断领域也是不可或缺的。市面上的抗体种类繁多同时也良莠不齐，由于缺乏评估抗体质量的标准方法，人们过去只能依赖于生产厂家的信用。 做过免疫荧光、免疫沉淀（IP）或者Western blot实验的人都知道，抗体优劣对实验结果有
土壤样品的加标回收实验怎么做
加样回收率就是在制备供试品溶液时，加入一定量所测对照品溶液，制备成供试品溶液。之后按下列公式计算：回收率＝（测出对照品总量－取样相当对照品量）/添加此对照品量×100％加标回收率的测定可以反映测试结果的准确度用户需要注意加标物的形态应和待测物的形态一致，加标量应尽量与样品中待测物含量相近，并注意对样