DNA降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡
细胞DNA提取 实验方法原理 凋亡的DNA降解选择性发生在核小体间DNA,提取细胞总DNA或者选择性提取小分子量DNA后电泳可检查独特的核小体间片段DNA。 实验材料 肿瘤细胞 试剂、试剂盒 PBS 裂解缓冲液 苯酚 氯仿 异戊醇 乙醇 氯化钠 TE缓冲液 TAE TBE ......阅读全文
DNA降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡
实验方法原理 凋亡的DNA降解选择性发生在核小体间DNA,提取细胞总DNA或者选择性提取小分子量DNA后电泳可检查独特的核小体间片段DNA。 实验材料 肿
DNA降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡
细胞DNA提取 实验方法原理 凋亡的DNA降解选择性发生在核小体间DNA,提取细胞总DNA或者选择性提取小分子量DNA后电泳可检查独特的核小体间片段DNA。
NA降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡——细胞DNA提取
DNA降解断裂法检测肿瘤细胞凋亡可以用于:(1)检测肿瘤细胞的凋亡;(2)检测药物治疗肿瘤的效果。实验方法原理凋亡的DNA降解选择性发生在核小体间DNA,提取细胞总DNA或者选择性提取小分子量DNA后电泳可检查独特的核小体间片段DNA。实验材料肿瘤细胞试剂、试剂盒PBS裂解缓冲液苯酚氯仿异戊醇乙醇氯
DNA断裂修复增加基因突变风险
据美国物理学家组织网近日报道,美国印第安纳大学与普渡大学印第安纳波利斯联合分校(IUPUI)和瑞典优密欧大学(Umea University)最近的一项联合研究显示,有一种细胞用于修复自身DNA断裂的方法(称为断裂诱导复制),比正常合成DNA产生的基因变异要高出2800倍。
Structure:损伤DNA末端降解过程机制
2022年7月15日,浙江大学生命科学学院赵烨教授、华跃进教授联合浙江大学医学院郭江涛教授团队在CellPress旗下的Structure杂志发表了题为“Mechanisms of helicase activated DNA end resection in bacteria”的研究成果。该论文使
RNA-和-DNA-提取的降解问题
降解问题是RNA制备中常常到的问题。因为在 RNA 提取过程中,样品储存不当或裂解效率低等情况都会导致降解。对于 DNA 提取,降解不是一个大问题,因为对于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有较多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。
Nature:缺乏Dna2会导致基因跳跃到DNA断裂处
细胞具有许多保护基因组完整性的机制,包括修复在DNA复制过程中可能发生的错误的过程。酶Dna2参与DNA修复,但是人们对它的缺失对染色体不稳定性的影响知之甚少。在一项新的研究中,来自美国贝勒医学院等多家研究机构的研究人员揭示出当Dna2缺失时,较小的DNA片段从整个基因组跳跃到染色体断裂处。这种
Cell:DNA断裂与大脑学习及老化相关
来自MIT的研究者们发现,神经元活性可以快速大量激活一些早期反应基因,从而促进大脑的学习和记忆。DNA双链断裂的形成,是一种生理活动,可以快速解除拓扑蛋白对早期反应基因的抑制,从而在神经元中表达这些早期反应基因。这项研究结果,有助于研究人员们研发出新的方法,防治认知下降疾病,例如老年痴呆症。此项
新研究揭示DNA损伤后的组蛋白降解促进DNA修复
几年来,Gasser及其研究团队一直在研究染色质结构如何在应对DNA损伤的过程中发生变化,以便了解这些变化是否以及如何提高修复速度。在早期的一项研究中,Gasser实验室的前博士生Michael Hauer发现,染色质对急性DNA损伤既有局部的反应,也有全基因组范围内的反应,大约30%的组蛋白在全基
德研究发现与DNA双链断裂修复相关基因
德国研究人员在寻找参与修复脱氧核糖核酸(DNA)双链断裂的基因方面获得进展。研究小组在人类细胞中找到61个位点,并发现了此前未知的与DNA双链断裂修复有关的基因。该研究结果将显著加速DNA修复基因的继续搜寻,并带来新的医疗应用可能。相关研究成果发表在6月29日的《公共科学图书馆·生物学》杂志上。
DNA双链断裂检测——变压场凝胶电泳(GFGE)
DNA双链断裂与细胞死亡的关系更为密切。变压场凝胶电泳是采用将细胞包埋在低熔点琼脂糖凝胶中,通过蛋白酶、去污剂等渗入凝胶中融解细胞、去蛋白,纯化细胞DNA,再通过梯增电压进行琼脂糖凝胶电泳,结合DNA解旋荧光测定(FADU)法和检测DNA双链断裂。 1、主要试剂及配制方法: (1)蛋白酶K,
DNA指纹法
DNA Fingerprinting (David F. Betsch)the theory, procedures and applications · DNA Fingerprinting (Polyarylamide Gel) (Caltech)BAC DNA sample
与DNA双链断裂修复相关新基因被发现
德国研究人员在寻找参与修复脱氧核糖核酸(DNA)双链断裂的基因方面获得进展。研究小组在人类细胞中找到61个位点,并发现了此前未知的与DNA双链断裂修复有关的基因。该研究结果将显著加速DNA修复基因的继续搜寻,并带来新的医疗应用可能。相关研究成果发表在6月29日的《公共科学图书馆·生
天差地别!CRISPR导致的DNA断裂后修复与理论差距巨大
尽管世人对CRISPR-Cas9基因编辑抱有很高期望,科学家们仍对其人体临床应用持怀疑态度。为什么呢? “基因编辑非常强大,但是到目前为止还有许多问题和错误需要探索。它们的工作方式就像一个黑匣子,有许多猜想和假设,”加州大学伯克利分校分子生物学教授Jacob Corn说。“现在,我们终于有能力
我国团队在体外成功重构DNA双链断裂的形成
北京时间2月19日24点,国际学术期刊Nature 在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(原生物化学与细胞生物学研究所)童明汉课题组联合上海交通大学医学院附属新华医院黄旲团队的研究成果,题为“In vitro reconstitution of meiotic DNA double-st
DNA足迹法介绍
DNA足迹法,中文名称:DNA足迹法英文名称:DNA footprinting定义:检测DNA序列中DNA结合蛋白识别部位的一种方法。
DNA双链断裂是脑活动一部分
长期以来,科学家认为一种特殊的DNA损伤——DNA双链断裂(DSB)对脑细胞特别有害,是老年病如老年痴呆背后的主要推手。据物理学家组织网3月24日报道,最近,美国加利福尼亚大学旧金山分校格拉斯通研究所科学家发现,DSB实际上是一种常规的、非伤害性脑活动过程的一部分。这一发现有助于理解老年痴呆症背
精确编辑基因!利用机器预测细胞修复CRISPR诱发的DNA断裂
当双螺旋DNA因损伤(比如X射线暴露)发生断裂时,细胞中的分子机器会开展基因“自动校正(auto-correction)”,从而将基因组重新连接在一起,但是这种修复通常是不完美的。细胞中的天然DNA修复过程能够以一种看似随机且不可预测的方式在断裂位点处添加或移除DNA片段。利用CRISPR-Ca
提取的基因组DNA有降解如何解决
选取的材料不新鲜或反复冻融,采集材料后未及时处理或未低温保存:陈旧血液或不新鲜的材料中,细胞凋亡导致DNA降解,或者低温保存的样品经反复冻融导致细胞破碎,内源性核酸酶降解DNA,因此应该选用新鲜的材料样品,不能及时处理则低温保存,运输过程中应该使用干冰: 1 ) 未能有效的抑制内源性核酸酶的作用
DNA单链断裂检测技术:单细胞凝胶电泳(SCGE)检测原理..
DNA单链断裂检测技术:单细胞凝胶电泳(SCGE)检测原理和操作步放回玻片托盘中待琼脂糖凝固。 (3)裂解: 移开盖玻片,将载玻片缓慢浸入新配制的冰凉的细胞裂解液中,置于4℃冷藏至少1h。细胞可在裂解液中至少保存4周,但时间太长可能会引起缓冲液沉淀。 碱性细胞裂解液配制(每1000ml)
拟南芥叶绿体基因组DNA双链断裂修复的全新分子机制
2021年6月16日,清华大学生命学院/清华-北大生命科学联合中心孙前文实验室在Nucleic Acids Research杂志在线发表题为“RNase H1C与单链DNA结合蛋白WHY1/3和重组酶RecA1在拟南芥叶绿体中协作完成DNA损伤修复 (RNaseH1C collaborates
细胞凋亡检测操作流程2——BrdU检测凋亡细胞DNA断裂片段
凋亡检测操作流程二、 BrdU检测凋亡细胞DNA断裂片段相关试剂及组分:一步法: APO-DIRECT试剂盒(货号:556381): PartA(4°C保存)PartB(-20°C保存)PI/RNase A SolutionFITC-dUTPReaction BufferTdT EnzymeRins
穿晶断裂与沿晶断裂说明什么
锰锌铁氧体的断裂貌似是沿晶断裂,根据我的短口SEM照片来看,有一些气孔,且这些气孔集中于晶界处。一般脆性较大的话应该是沿晶断裂吧。看到文献指出通过添加一些添加剂的方法增厚锰锌铁氧体的晶界以达到提高电阻率的效果,至于这个增厚程度如何是否能够明显强化结合力没看到过类似的文献报道。
如何区分穿晶断裂和沿晶断裂
沿晶断裂:裂纹沿晶界扩展,可以清楚地看到一个个晶粒,晶粒面比较光滑; 穿晶断裂:也可以看清晶界,但是晶粒面相比沿晶断裂不是那么的光滑,也分为韧性和脆性穿晶断裂;
DNA印迹法的定义
Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或
SDS法提取小麦DNA
在提取DNA的过程中SDS的主要作用裂解细胞以及是蛋白质与核酸分离。在提取核酸的过程中,经常会用到高温(一般65-70摄氏度)加SDS一起裂解细胞,这样会让核酸释放的更快,更彻底;高温也是裂解细胞的一种方法。但加热本身对SDS没有任何辅助作用。但在低温条件下SDS的溶解度没有那么高,所以会有一定的沉
随机引物法标记-DNA
实验方法原理 利用寡核苷酸作引物,DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成(Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一,它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸(5' 端的核苷酸除外)的互补物将以同样
快速制备酵母DNA法
实验概要本实验制备了酵母转化质粒,快速从转化酵母菌中分离了用于Southern分析的基因组DNA。主要试剂2% Triton X-100,1%SDS,100mmol/L NaCl,10mmol/L Tris-HCl(pH8),1mmol/L Na2EDTA,苯酚:氯仿:已戊醇(25:24:1),YP
随机引物法标记-DNA
实验方法原理 利用寡核苷酸作引物,DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成(Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一,它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸(5' 端的核苷酸除外)的互补物将以同样的频率掺入产物。实验材料 大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ Kl
DNA-印迹法的概念
中文名称DNA 印迹法英文名称Southern blotting定 义DNA经酶切和凝胶电泳分离后转移至尼龙膜或硝酸纤维素薄膜上,用探针进行杂交后分析目的DNA片段的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)