微生物克隆系统使重组基因表达的筛选更加容易

传统的手工挑取微生物克隆是一个费时烦人且易出错的过程。微生物克隆筛选系统一小时可以完成3000 个克隆的挑取,而一个熟练的人工只能挑取约600 个克隆。自动化系统的速度相比人工提高了至少5 倍,最关键的是更加准确,有效性>98%。微生物克隆筛选系统的荧光成像模块可以显著减少下游的工作量,因为通过对荧光蛋白表达的定量,实现了有目的性筛选,确保只挑感兴趣的克隆。 多组荧光波长滤光片可以灵活选择多样的荧光克隆载体,获得所有克隆的客观和定量的荧光数据。当研究蛋白折叠或分泌、酶进化或蛋白定位的时候,可以追踪荧光蛋白获得单个克隆的独特数据。此外,还可以筛选某种转化标记或者筛选突变体。 文章链接:仪器设备网 https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-2194.html......阅读全文

微生物克隆系统使重组基因表达的筛选更加容易

  传统的手工挑取微生物克隆是一个费时烦人且易出错的过程。微生物克隆筛选系统一小时可以完成3000 个克隆的挑取,而一个熟练的人工只能挑取约600 个克隆。自动化系统的速度相比人工提高了至少5 倍,最关键的是更加准确,有效性>98%。微生物克隆筛选系统的荧光成像模块可以显著减

微生物克隆系统使重组基因表达的筛选更加容易

  传统的手工挑取微生物克隆是一个费时烦人且易出错的过程。微生物克隆筛选系统一小时可以完成3000 个克隆的挑取,而一个熟练的人工只能挑取约600 个克隆。自动化系统的速度相比人工提高了至少5 倍,最关键的是更加准确,有效性>98%。微生物克隆筛选系统的荧光成像模块可以显著减少下游的工作量,因为通

微生物克隆系统使重组基因表达的筛选更加容易

  传统的手工挑取微生物克隆是一个费时烦人且易出错的过程。微生物克隆筛选系统一小时可以完成3000 个克隆的挑取,而一个熟练的人工只能挑取约600 个克隆。自动化系统的速度相比人工提高了至少5 倍,最关键的是更加准确,有效性>98%。微生物克隆筛选系统的荧光成像模块可以显著减少下游的工作量,因为通过

重组克隆筛选(酶切鉴定)

【实验目的】1.掌握质粒提取的基本方法的原理;2.学习和掌握限制性内切酶的使用方法。【实验原理】重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。不同的克隆载体和相应的宿主系统,其重组克隆的筛选和鉴定方法不尽相同。从理论上说,重组克隆的筛选是排除自身环化的载体、未酶解完全的载体以及非目的DNA片断插入

女性医生为什么更加容易使患者康复?

  研究者们最近发现,接受女医生诊断治疗的老年男性患者,其疾病的复发率以及死亡率都要明显低于接受男性医生诊断的同龄群体。这一证据表明女性医生在对老年男性患者进行诊疗时会有不一样的效果。  根据研究者们的说法,如果所有的医生都能够做到女性医师在诊疗男性患者时达到的效果,那么每年的患者死亡人数将会减少3

阳性重组克隆的构建和筛选

实验概要构建并筛选含有目的基因的候选阳性重组克隆。有助于理解目的基因与克隆载体的连接、转化和筛选原理及流程。实验原理1. 连接反应:利用经过限制性内切酶消化的线形载体与目的基因两端暴露出的平末端或相同的粘性末端,使用T4 DNA 聚合酶将二者连接起来形成重组载体。2. 转化过程:感受态细胞通过温度敏

重组片段的转化及克隆和筛选

一、目的与原理转化是指以质粒DNA或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。转化技术在基因工程领域中占有极重要的地位。目前用得较多的转化技术为将人工构建的重组质粒到如受体细胞,使重组质粒在受体细胞中稳定地复制和表达。二、材料和方法1.材料:大肠杆菌2.仪器:离心机,恒温摇床,恒温水浴,超净工作台,冰柜

重组蛋白表达系统

选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用。在这里,我

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

使用QPix400系统自动筛选颜色克隆——蓝白克隆筛选

在分子克隆过程中,筛选含有插入基因片段的重组质粒转化子是一项必不可少的工作。一种称为“蓝白斑筛选”的颜色报告基因可以根据克隆颜色快速区分出重组和非重组的克隆。尽管蓝白筛选提供了一个直观的辨别重组克隆的方法,但是,在克隆挑取过程中,过多的人工操作过程存在主观、速度慢、易出错等问题。 Molecular

药物使沉默基因恢复表达

密歇根大学综合性癌症中心研究人员报道,利用药物将一个与癌细胞发育有关基因打开,为治疗癌症带来新的希望。研究结果刊登于在线版《Oncogene》杂志。 Herceptin和Gleevec等流行新药的靶标是引发癌症的遗传突变,但因为控制生长的基因被关闭了,癌症还会复发。即便研究人员可以利用这些关闭的基

重组蛋白真核表达系统与原核表达系统的区别

 重组蛋白真核表达采用原核表达系统进行研究,主要方法是将已克隆到目的基因DNA的片段的载体转化到细菌中,通过IPTG诱导和终纯化获得所需的目的蛋白。其优点是可以在短时间内获得基因表达产物,所需成本相对较低。   目前的表达系统各有利弊,但一般理想的表达系统满足以下几点:一是特异性,不受其他内源性因素

重组表达cDNA克隆的血清学分析技术介绍

中文名称重组表达cDNA克隆的血清学分析技术英文名称serological analysis of recombinantly expressed cDNA clone;SEREX定  义用肿瘤患者血清从肿瘤细胞cDNA表达文库中筛选和寻找肿瘤抗原基因的方法。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临

利用α互补现象筛选带有插入片段的重组克隆的原理

现在使用的许多载体都带有一个E.coli DNA的短区段,其中含有β-半乳糖苷酶的-α肽基因(lacZ’)的调控序列和头146个氨基酸的编码信息。这个编码区中插入了一个MCS,它并不破坏读框,但是可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于编码β-半乳糖苷酶C端部分序列

小鼠βactin基因的克隆表达(4)

实验步骤:(1)诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落,接入5ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养2h以上,至对数中期(A550=0.5~1.0)。向诱导管中加入IPTG使其浓

小鼠βactin基因的克隆表达(3)

(2)质粒的提取及酶切鉴定分析   质粒的提取按照质粒提取试剂盒的操作步骤进行,然后进行双酶切鉴定。   管号 ① ② 质粒DNA

小鼠βactin基因的克隆表达(2)

实验步骤:   (1)目的基因与表达载体的连接反应: ①表达载体和目的片段的酶切   管号 ① ② pGEX 4T-1

小鼠βactin基因的克隆表达(1)

动物组织RNA的提取实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA

表达基因的克隆策略与分离表达基因序列的技术方法

人类基因组计划的主要任务之一就是要从大片段基因组区域或整条染色体DNA 上鉴定出基因表达序列(gene expressed sequences)或转录单位(transcription units)。在人类基因组30亿个碱基对中,发生转录的表达序列(即基因)仅占总序列的3~5%。基因组中绝大部

原核表达之目的基因克隆

1. 了解实验课题对目的蛋白的要求包括:目的蛋白分子量有多大,表达目的(是蛋白结晶、药剂结合还是制备抗体,不同目的对蛋白要求不同);是否要其可溶;是胞内表达还是分泌表达,是组成型表达还是诱导型表达;另外,还要了解蛋白表达后需要采用什么样的方式进行纯化,纯化标签有多大,蛋白纯化后是否需要将标签去除(即

原核表达——基因克隆技术

原核表达可以用于检测(1)发生在原核生物内的基因表达。(2)通过基因克隆技术,将外源目的基因,通过构建表达载体并导入表达菌株的方法,使其在特定原核生物或细胞内表达。实验方法原理一个完整的表达系统通常包括配套的表达载体和表达菌株。如果是特殊的诱导表达还包括诱导剂,如果是融合表达还包括纯化系统或者Tag

克隆基因的表达(expression-of-cloned-gene)3

(3)原核生物的基因组基本上是单倍体,而真核基因组是二倍体。(4)如前所述,细菌多数基因按功能相关成串排列,组成操纵元的基因表达调控的单元,共同开启或关闭,转录出多顺反子(polycistron)的mRNA;真核生物则是一个结构基因转录生成一条mRNA,即mRNA是单顺反子(monocistron)

克隆基因的表达(expression-of-cloned-gene)2

在双链 DNA 分子中,只有一条链转录成 mRNA,这条链称为有意义链(sense strand),该基因的另一条链则称反意义链(antisense strand)。在含有许多基因的 DNA 双链中,每个基因的有意义链并不是在同一条 DNA 链上。也就是说,一条链上既具有某些基因的有意义链,

克隆基因的表达(expression-of-cloned-gene)1

基因表达(gene expression)是指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。典型的基因表达是基因经过转录、翻译,产生有生物活性的蛋白质的过程。基因的表达主要涉及到两个过程:转录和翻译。   第一节影响外源基因表达的因素 利用基因工程技术高水平表达

Molecular-Devices-QPix-400系统在多色荧光通道筛选各种荧光...

Molecular Devices QPix 400系统在多色荧光通道筛选各种荧光细菌的应用研究引言:细菌筛选常见于分子克隆构建重组细菌的实验中。它也被用于检测特定蛋白质的表达和活性。QPix 400系列微生物克隆筛选系统可检测一系列荧光波长,从而在细菌实验中开拓了多色荧光筛选功能。手工挑选微生

移液器使得实验操作更加容易

 移液器使得实验操作更加容易    移液器适用于标准96孔板。液头可360度旋转,以方便移液,每道管嘴连件都有独立的活塞装置,使维修保养十分容易,特别的管嘴连件设计,易于观察吸嘴的密封状况。   赛多利斯准确度和度是挑选移液器时重要的两个方面。准确指移液量与设置量相等。是指多次移液结果接近一致

重组克隆的概念

中文名称重组克隆英文名称recombinant clone定  义含有重组核酸分子或其片段的分子克隆或细胞克隆。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

DNA重组及基因工程技术对医学和生命科学发展的贡献-二

  四、基因诊断与基因治疗  基因克隆和基因分析的手段得到与人类疾病有关的基因异常变化、以及致病微生物基因结构方面的知识,就可能用检测和分析基因的方法去诊断疾病。对与疾病相关的基因及其调控了解,就有可能导入外源目的基因去纠正基因缺陷或改变基因表达调控以期达到治疗疾病的目的。这些都是分子生物学进展在医

大肠杆菌基因组基因无痕敲除的优化方法

  近几十年来, 大肠杆菌是基因工程、 代谢工程和合成生物学等领域的重要工具菌株,是生产重组蛋白、氨基酸、有机酸、能源物质和一些重要化工产品的主力微生物之一。为使大肠杆菌获得新的性状和生产能力, 基因敲除及基因敲入是构建新型大肠杆菌的重要手段。   近几十年来, 大肠杆菌是基因工程、 代谢工程和合成