RNAi的功能

1.高通量的研究基因功能在后基因组时代,需要大规模高通量的研究基因的功能,由于RNAi能高效特异的阻断基因的表达,因而RNAi成为研究基因功能的很好的工具。研究者将线虫三号染色体上2232个基因对应的dsRNA合成出来,并注射到线虫性腺内,然后观察子代细胞分裂时出现的异常表型,结果发现了133个基因与细胞分裂异常有关。其中104个基因以前没有发现有这种功能。在另外一项研究中,线虫一号染色体上的2416个基因对应的 dsRNA被构建到细菌文库中,然后将细菌喂给线虫,观察形态学的异常,异常的运动,性别比例的变化,不孕的情况,结果将于这些表型有关的基因从70个增加到178个。2.基因敲除在线虫的体内外试验中,RNAi都能达到基因敲除的结果,从而成为研究这些基因功能的良好工具。对于哺乳动物,RNAi能在体外培养的细胞达到基因敲除的效果,对于一些敲除后小鼠在胚胎时就会死亡的基因,可以在体外培养的细胞中利用RNAi技术研究它的......阅读全文

《Nature》子刊:RNAi疗法新应用

  这项研究由麻省大学医学院Anastasia Khvorova和Melissa Moore博士以及贝斯以色列女执事医学中心和哈佛医学院的Ananath Karumanchi医学博士领导,提示RNA干扰疗法可能是治疗先兆子痫的一种潜在策略。Ananath KarumanchiMelissa Moor

RNAi技术专有名词(2)

21.Homologous Chromosome:同源染色体一对染色体,分别来自父本和母本,染色体上有着相同的线性基因序列。 22.Recombinant Clone:重组克隆将不同来源的DNA片段合成在一个DNA分子中,这种技术称为重组,得到的分子为重组克隆。 23.Ribonucleic

BLOCKiT™-Fluorescent-Oligo-as-RNAi-Transfection-Control

实验概要Intended UseDynabeads®  Streptavidin are ideal for numerous applications, including  purification of proteins, nucleic acids purification, protein

RNAi实验原理与方法选择(二)

尽管有些公司推出了shRNA和siRNA试剂盒,但这些试剂盒大都突出操作简单,毕竟涉及RNA操作,用户自己难免会产生很多预料不到的困难,晶赛公司可以完全为您解决后顾之忧,您可以直接拿到有效的siRNA或shRNA序列。 3. Dicer酶法生产siRNA优点:可以跳过筛选与检测有效siRNA序列的步

RNAi实验原理与制备方法(二)

3.用RNase III 消化长片断双链RNA制备siRNA其他制备siRNA的方法的缺陷是需要设计和检验多个siRNA序列以便找到一个有效的siRNA。而用这种方法——制备一份混合有各种siRNAs “混合鸡尾酒” 就可以避免这个缺陷。选择通常是200—1000碱基的靶mRNA模版,用体外转录

Cell:不让基因沉默的RNAi途径

  “这项研究的独特之处在于――之前,我们知道RNAi能用于调控基因,或者完全关闭基因。而这项研究中,我们发现的是一种通过piRNA途径,保护基因不被沉默的RNAi机制,这种机制能作为一种保护形式,让基因得以表达。”   ――Darryl Conte Jr.博士   生物机体采用了多种战略方法来

RNAi相关的名词解释[英文]

Argonaute - A family of proteins containing multiple domains and involved in RNA interference (RNAi). Argonatue is the main component of RNAi effector

RNAi实验原理与制备方法(一)

实验原理通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证据表明;一个称

RNAi常见问题及问答(FAQs)

有关Stealth™ RNAi的问题什么是Stealth™ RNAi?Stealth™ RNAi是RNAi化学的新一代产品。Stealth™ RNAi分子是经过ZL化学修饰的、钝末端、双链25聚体(25mer)。这些化学修饰专门用来消除诱导的细胞应激反应。它也使Stealth™ RNAi比标准的si

反义技术——RNA干扰(RNA-interference,RNAi)

最近由于RNA干扰(RNA interference,RNAi)的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的(1),是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNAi领域取得的进步,已经有许多这方面的综述发表(2-4)。RNA干扰是由长的双链 RNA

RNAi及siRNA转染相关实验攻略

RNAi 是一种高效的特异性强的基因表达抑制,应用RNAi生物学机制进行基因功能研究已经成为一种创新性的新方法,人们第一次可以如此快速和方便地抑制细胞中特定基因的表达水平,从而用于分析特定基因在细胞中的功能。RNAi 技术还为新药开发、疾病治疗提供了创新性的方法和途径,有着极其广阔的应用前景。转染是

RNAi实验原理与方法选择(一)

一、RNAi的分子机制通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证

RNAi技术专有名词(1)

1.RNAi:(RNA interference)RNA干扰 一些小的双链RNA可以高效、特异的阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference,RNAi,也译作RNA干预或者干涉)。它也是体内抵御外在感染的一种重要保护机

RNAi治疗肝病Arrowhead第二代皮下RNAi疗法AROAAT突破性疗法!

  ARO-AAT用于治疗与α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)相关的罕见遗传性肝病。  肝脏  2021年07月29日讯 /生物谷BIOON/ --Arrowhead制药公司近日宣布,美国食品和药物管理局(FDA)已授予RNAi药物ARO-AAT(也称为TAK-999)突破性疗法认定(BTD),用于

诺华将大幅削减RNAi方面的投入

       根据生物医药专业分析网站Fiercebiotech 4月14日报道,诺华正在大幅削减RNAi(核糖核酸干扰)方面的研究投入。对于为什么会大幅缩减这方面对研究,诺华表示,这主要是基于现实对RNAi药物需求非常狭窄。   此前,诺华在RNAi研发方面投入7亿美元,并投入了大量的人力,

RNAi在细胞培养中的应用

The protocols listed here are for Drosophila cells in 6 well plates and our pre-aliquoted 384 well plates. RNAi experiments may be done in other size

首款RNAi药物patisiran有望近期上市

  今天美国生物技术公司Alnylam宣布其RNAi药物patisiran在一个家族性淀粉样多发性神经病变(FAP)三期临床达到一级、二级终点,这是RNAi药物首次在三期临床达到主要临床终点。这个名为Apollo的试验招募225名患者,使用18个月一级终点mNIS+7和二级终点NorfolkQoL都

RNAi在植物学中的应用

Napoli等将1个查尔酮合成酶基因(chs)置于1个强启动子后导人矮牵牛(Petunia hybrida),试图加深花朵的紫颜色。结果部分花的颜色并非期待中的深紫色,而是形成了花斑状甚至白色,而且这种性状可以遗传。因为导入的基因和其同源的内源基因同时都被抑制,他们将这种现象命名为共抑制(co-su

RNAi干扰技术及应用进展研究(一)

RNAi是Napoli CD等在试图向紫色矮牵牛花转导色素合成基因,用以增加其花色时发现的。结果出乎预料,转基因的植株不仅没有新基因的表达,反而自身的色素合成也减弱了,一些转基因的花出现了全白色或部分白色。他们把这种导入的基因未表达和植物本身合成色素基因的失活现象命名为共抑制(cosuppressi

RNAi干扰技术及应用进展研究(四)

3.5 转基因研究在动植物的转基因试验中, 经常发生基因沉默。因此, 对转基因沉默机制的探索可以为在转基因研究中避免基因沉默提供对策。在转基因植物研究中避免基因沉默可提高试验成功率,且节省时间,而在大型动物转基因研究中避免基因沉默可节约成本,提高产率。 3.6 干细胞研究在干细胞研究方面,在dsRN

通过RNAi使基因特异性沉默

RNA interference (RNAi) is a phenomenon in which the introduction of double-stranded RNA (dsRNA) into a diverse range of organisms and cell types caus

RNAi干扰技术及应用进展研究(三)

3.2 基因治疗及药物筛选探索由于RNAi是针对转录后阶段的基因沉默,相对于传统基因治疗对基因水平上的敲除,整个流程设计更简便,且作用迅速,效果明显,为基因治疗开辟了新的途径。 其总体思路是通过加强关键基因的RNAi机制,控制疾病中出现异常的蛋白合成进程或外源致病核酸的复制及表达。尤其针对引起一

RNAi干扰技术及应用进展研究(二)

1.2 RNAi的作用特点 (1)“共抑制”性。RNAi是双链RNA介导的转录后基因沉默机制,它的启动子相当活跃,外源基因可以转录,但不能正常积累mRNA;RNAi作用不仅使外源基因在转录后水平上失活,同时诱导与其同源的内源基因沉默。 (2) 高效性。试验证明双链RNA干扰mRNA 翻译的效率比

RNAi研究顶尖牛人被曝伪造数据

  来自苏黎世瑞士联邦理工学院的Olivier Voinnet教授是植物生物学RNA干扰研究方面的一位著名专家,他与其他人曾在十多年前发现了植物中存在细胞外RNA(extracellular RNA , exRNA )信号通路的证据,并且在多年的研究实验中尝试弄清楚这种exRNA在人体内是否具有相似

哺乳动物RNAi技术-Mammalian-RNA-Interference

Mammalian RNA InterferenceThomas TuschlLaboratory for RNA Molecular BiologyThe Rockefeller University, New York Excerpted from RNAi: A Guide To Gene S

RNAi技术突破:siRNA体内传递机制

小RNAs如何进入哺乳动物细胞? 一切开始于花:上个世纪90年代挪威的研究人员发现在矮牵牛(petunias)中有一种特殊的基因的额外拷贝可以抑制其活性,而不是如之前假想的增强其活性。几年之后这种基因研究发现其机制基于细胞中mRNA的降解,最终在90年代末期诺贝尔获得者Andrew Fire和C

RNAi两篇热点文章回顾

自从Andrew Fire 和Craig Mello于1998年提出了RNAi概念后,怎样将小RNA插入哺乳动物细胞成为萦绕科学家心头的一道难题。siRNA可以破坏特定基因的信号,为实现精致的以遗传为基础的治疗带来希望。面临的挑战包括寻找不涉及其他途径、绕过免疫反应,且穿过细胞膜的恰当机制。 面对

核糖核酸干扰技术(RNAi技术)介绍

转录后基因沉默(PTGS, post- transcriptional gene silencing)-最初被认为仅限于矮牵牛花和其它一些植物中的奇异现象,是目前分子生物学研究中一个最热门的话题。过去几年中,科研工作者已明确转录后基因沉默现象普遍存在于动、植物中,在机体防御病毒入侵和转座子沉默效应中

全球首款RNAi药物patisiran获批

  Alnylam制药公司是RNAi疗法开发领域的领军企业。近日,该公司宣布,欧洲药品管理局(EMA)人用医药产品委员会(CHMP)已发布积极意见,支持批准RNAi药物patisiran,用于遗传性ATTR(hATTR)淀粉样变性成人患者第1阶段或第2阶段多发性神经病的治疗。如果获批,patisir

RNA干扰(RNAi)实验原理与方法(3)

3.DEAE-葡聚糖和polybrene带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。两种试剂都已成功用于转染。DEAE-葡聚糖仅限于瞬时转染。4.机械法转染技术也包括使用机械的方法,