恒温扩增技术与PCR区别
如果是恒温的话怎么来完成变性、退火以及延伸过程呢下面是摘录的:操作技术和普通PCR没区别，反应温度上不要高温低温中文三步，只要60度就可以。原理，在常规PCR基础上增加了3对引物（普通1对）使得引物几乎涵盖了目的基因序列的三分之一以上。如果定量加荧光探针，定性就不必了。......阅读全文
PCR扩增过程
①首先是将含有待扩增DNA样品的反应混合物放置在高温（>91℃）环境下加热1分钟,使双链DNA变性,形成单链模板DNA；②降低反应温度（约50℃）,致冷1分钟,使寡核苷酸引物与两条单链模板DNA发生退火作用并结合在靶DNA区段两端的互补序列位置上;③将反应混合物的温度上升到72左右保温1-数分钟,在
噬斑扩增实验
实验方法原理痘苗病毒可以在 HeLa S3 细胞中大量繁殖，其他的细胞系可用于噬斑纯化和扩增。实验材料重悬重组噬斑贴壁生长良好的细胞HeLa S3 细胞试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.5 培养基筛选试剂（麦考酚酸 黄嘌呤／次黄嘌呤）5-溴脱氧尿苷（BrdU）干冰／乙醇仪器、耗材杯状超
基因扩增的含义和扩增方式有哪些
基因芯片(genechip)（又称DNA芯片、生物芯片）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG，与基因芯片上对应位置的
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
基因扩增的含义和扩增方式有哪些
基因芯片(genechip)（又称DNA芯片、生物芯片）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG，与基因芯片上对应位置的
PCR扩增模板和抗体可变区基因的扩增
PCR 扩增模板和抗体可变区基因的扩增 如果构建Fab抗体库,必需利用RT-PCR获取抗体基因;构建ScFv抗体库,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在构建小鼠ScFv抗体库过程中,主要采用DNA作为扩增模板。 【材料和试剂】（1）PCR仪（2）Taq酶（3）氯仿（4）琼脂糖 【
PCR扩增效率的评估扩增曲线的解读
做过PCR的小伙伴都知道，PCR前期的验证引物探针性能和确定最适反应条件是确保正式实验顺利进行的前提。PCR实验中有个相当重要的工作——即是PCR扩增效率的评估。扩增效率是PCR检测性能最重要的指标之一，也是定量分析计算结果时所需要的参数。接下来，让小编给大家细细说来吧。 什么是扩增效率 PCR是一
黏粒文库的扩增和贮存(在滤膜上扩增)
实验方法原理 应用此种扩增方法，文库不容易失真，这是由于在任何一步骤中，含有不同重组黏粒的混合菌群都不会在生长中发生竞争。但扩增过程冗长，而且有时由于主滤膜保 存后菌落不再生长而丢失。本节还提供一种备选方法，即在 TB 平板上扩增。该备选
基因扩增PCR的扩增方法的注意事项
1、使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加,避免因组分不一导致结果差异; 2、配置和分装反应液时请一定使用新的(无污染的)喷头以避免污染; 3、如扩增条带多,可适当添加酶和dNTPs; 4、当多重PCR扩增产物的长度均在1kb以内时,使用3%～4%浓度的Agarosegel进行电泳分离效果。
黏粒文库的扩增和贮存(在滤膜上扩增)
应用此种扩增方法，文库不容易失真，这是由于在任何一步骤中，含有不同重组黏粒的混合菌群都不会在生长中发生竞争。但扩增过程冗长，而且有时由于主滤膜保存后菌落不再生长而丢失。本节还提供一种备选方法，即在 TB 平板上扩增。该备选扩增方案使那些生长不良的黏粒克隆易于丢失。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」
黏粒文库的扩增和贮存(在滤膜上扩增)
实验方法原理 应用此种扩增方法，文库不容易失真，这是由于在任何一步骤中，含有不同重组黏粒的混合菌群都不会在生长中发生竞争。但扩增过程冗长，而且有时由于主滤膜保 存后菌落不再生长而丢失。本节还提供一种备选方法，即在 TB 平板上扩增。该备选扩增方案使那些生长不良的黏粒克隆易于丢失。实验材料 λ 噬
基因扩增PCR的扩增出现非特异性扩增带的原因和解决办法
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数 过多有关。其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一
癌基因扩增概述
原癌基因还可因某种原因自身扩增而过度表达。在肿瘤细胞尤其是胚胎神经组织肿瘤细胞中有时见到的双微体和染色体上的均染区就是原癌基因DNA片段扩增的表现例如，在肿瘤细胞中c-myc癌基因可扩增数百到数千倍。
梯度基因扩增仪
梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功，退火温度是关键，梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置。
昆虫细胞的扩增
实验方法原理用机械法从细胞单层分离细胞，在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒生长培养液仪器、耗材培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞（( ATCC # CRL-171
PCR扩增仪步骤
一般的PCR反应由20到35个循环组成，每个循环包括以下3个步骤：利用高温(93-98℃)使双链DNA分离(熔解)。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前，通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离，仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟。在DNA双链分离后，降低温度使得引物可以结合于单
核酸扩增—多重PCR
多重PCR是在单一PCR基础上改进和发展起来的新技术，是在同一PCR体系中加入多对特异性引物，一次扩增多个DNA片断，实现多个基因序列或多种病原体的同时检出。多重PCR降低了检测成本，减少了工作量，提高了检测效率，并且可以解决淋球菌、衣原体等混合感染者临床症状不明显，检出率低等问题。淋病患者往往
基因扩增仪用途
基因扩增仪主要用于用于科研及临床的基因扩增、定性PCR基因扩增、荧光/酶免终点定量DNA基因扩增、基因芯片等其他基因分析应用的基因扩增等。用于科研及临床的基因扩增 定性PCR基因扩增 荧光/酶免终点定量DNA基因扩增 基因芯片等其他基因分析应用的基因扩增 适合国内外各种PCR试剂盒传染病
扩增曲线异常问题
参比染料设定不正确：MasterMix 不加参比染料时，选 NONE。 模板的浓度太高或者降解。 荧光染料的降解。
PCR基因扩增实验
[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。[实验原理]多聚酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍。1．变性：加
PCR基因扩增1
一、实验原理 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一种体外核酸扩增系统，其原理类似DNA分子的天然复制过程，是将在待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两个寡聚核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增 2n 倍。该技术已成为分子生物学中
PCR扩增仪简介
PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪，是利用PCR(Polymerase chain reaction，聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备，被广泛运用于医学、生物学实验室中，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制
昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞，在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料 Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒 生长培养液仪器、耗材 培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤 常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞（( ATCC # CR
PCR扩增的步骤
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：模板DNA的变性模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；模板DNA与引 物的退火(复性)模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模
PCR基因扩增2
（4）引物的熔点温度（Tm值）要适当。Tm值与引物的碱基组成和长度有关；PCR引物的GC/AT应与要扩增的模板DNA相当或略高些。一般熔点温度以大于55℃为宜。（5）引物的3，末端必须与模板严格互补，而5，末端的要求可灵活些。（6）目前在引物选择中已广泛应用计算机软件，从EMBL或Genebank中
基因扩增的概念
基因扩增是指某一个特定基因的拷贝数选择性地增加而其它基因的拷贝数并未按比例增加的过程。
多重－PCR－扩增实验
多重PCR扩增实验可以用于：（1）在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物，或对有多个型别的目的基因进行分型，特别是用一滴血就可检测多种病原体；（2）多重PCR很适宜于成组病原体的检测，如肝炎病毒，肠道致病性细菌，性病，无芽胞厌氧菌，战伤感染细菌及细菌战剂的同时侦检；（3）多种病原体在同一反应管内
多重－PCR－扩增实验
实验方法原理 多重PCR（multiplex PCR），其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同。一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定。重PCR的特点有：①高效性在同一PCR反应管内同时
基因扩增的概念
基因扩增是指某一个特定基因的拷贝数选择性地增加而其它基因的拷贝数并未按比例增加的过程。
昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞，在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。 实验材料 Sf9细胞 二甲基亚砜