最新！国家药品监督管理局发布数字PCR行业标准
数字聚合酶链反应（数字PCR，dPCR）技术是一种核酸绝对定量的检测方法，通过该技术，无需使用标准曲线法即可对核酸进行精确定量，从而极大程度地提高了检测的准确度和精密度。该技术是继实时荧光定量PCR技术之后的第三代核酸定量检测技术，具备核酸绝对定量、精确性高等优势，在多个领域具有重要的应用前景，在液体活检、肿瘤伴随诊断、无创产前筛查、病原载量监测等方面具有重要临床应用价值。 2023年9月7日，国家药品监督管理局发布了《国家药监局关于发布YY 0304-2023《等离子喷涂羟基磷灰石涂层钛基牙种植体》等45项医疗器械行业标准的公告（2023年第118号）》的公告。公告中提到的45项医疗器械行业标准中，数字PCR（数字聚合酶链反应分析系统）赫然在列。 这一标准由北京市医疗器械检验研究院、中国食品药品检定研究院、北京市医疗器械审评检查中心、迈克生物全资子公司—北京达微生物科技有限公司等共同起草，并将于2024年9月15日开......阅读全文
PCR技术迈入第三代－微滴式数字PCR
你说世界变化快不快，PCR已经迈入第三代!近日，一种称为微滴式数字PCR(ddPCR™)的新技术出现在《Analytical Chemistry》杂志上，它能够确定样品中待测靶分子的绝对数目。 第一代PCR就是我们目前最常用的终点PCR技术，通过凝胶电泳获得定性的结果。风靡全球的实时定
一文知晓PCR，定量PCR与数字PCR的实验方法与选择（二）
数字 PCR数字 PCR 是通过将样本DNA随机分布至独立的反应单元中，每个反应单元中包含或者不包含1个或多个拷贝的目标分子，所有独立的反应单元进行平行扩增后，对每个反应单元的阴性或者阳性荧光信号进行检测并进行统计学分析，就可以计算出原始样本的拷贝数，无需参考标准品或内源性对照品，也不需要标准曲
一文知晓PCR，定量PCR与数字PCR的实验方法与选择（一）
从1985年至今的30多年时间里，PCR分析经历了三代技术的发展。第一代传统PCR技术，采用琼脂糖凝胶电泳的方法对PCR产物进行定性分析。第二代荧光定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控PCR进程，最后用Cq值对基因进行定量分析。第三代数字PCR技术，通过将P
分析PCR扩增的标准
什么是PCR实验的灵敏度?灵敏度指的是PCR扩增反应能够检测到目的基因的zui小值。研究结果表明，影 响PCR扩增效率的因素，如模板的复杂程度与完整性、引物的纯度及其与模板的结合效率、反应温度、DNA聚合酶的热稳定性与扩增性能、反应缓冲液的离子组 成（主要指阳离子）、反应优化剂等等，都决定了PCR
标准的PCR反应体系
参加PCR反应的物质为模板、引物、耐热DNA聚合酶、三磷酸脱氧核苷酸和镁离子，其中关键步骤是最佳引物的设计 [2] 。 1. 模板核酸 模板(靶基因或样品DNA)核酸的量与纯化程度是PCR成败与否的关键环节之一。一般临床检测标本，可采用快速简便的方法溶解细胞，裂解病原体，消化除去染色体的蛋白
标准的Touchdown－PCR程序
ANNEALING TEMP. 55度94 5min94 30s60 30s72 1min 2cycles94 30s59 30s72 1min 2cycles94 30s58 30s72 1min 2cycles........94 30s51 30s72 1min 2cycles94 30s50
标准的PCR过程介绍
1、DNA变性 （90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA 2、退火 （60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 3、延伸 （70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从
数字PCR在早期精准检验疫情的应用
2016年，全球首例数字PCR动物疫病检测试剂研发成功，包括禽流感、禽流感H7N9、蓝耳病、高致病性美州株、猪的流行性腹泻等动物疫病检测试剂盒。此项技术的推出，将有助于在食品安全的源头及早发现疫情，尽早处理避免更大面积的传染，更好地控制漏检，减少传染人的几率；也将有助于国家建立规范化、规模化的动
数字PCR在肠道菌群分析的应用
数字PCR技术直接计算目的序列的拷贝数，对样品中的微生物实现了绝对定量，可用于微生物检测，以便进一步研究肠道菌群的结构、功能以及数量。
数字PCR在食品安全检测的应用
食品安全日益成为一个重要的公共卫生问题, 受到社会及国家的高度重视。食源性疾病、食品原料造假、转基因食品等逐渐呈现出普遍增长的趋势。食源性疾病是指通过摄食而进入人体的有毒有害物质等致病因子所造成的疾病。比如常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共患传染病、寄生虫病等。食源性疾患的发病率居各类疾病总发病率的
数字PCR在基因表达差异研究的应用
数字PCR由于检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的绝对定量，因而可以提供比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究，尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况，如：mRNA、microRNA、lncRNAs等的表达分析；等位基因的不平衡表达；单细胞基因表达分析；外泌体核酸分子定量分析等。
数字PCR在基因型鉴定的应用
PCR也可以用于检测一个生物中是否存在某特定DNA序列，这被称为基因型鉴定。例如，基因型鉴定可通过发现样品中是否存在某种群特异性序列来判断样本的真实性。基因型鉴定还可用于法医分析判断在现场发现的DNA样品是否和嫌疑人的吻合，令凶手无处遁形。
数字PCR助力艾滋病疗法的开发
Bio-Rad公司于去年底推出了QX100微滴式数字PCR系统，市场反应不错。最近，Sangamo BioSciences公司的研究人员利用此系统产生了高度精确且重复的数据，离HIV功能疗法的开发又近了一步。 让我们听听Sangamo BioSciences资深科学家Gary Lee的评价。“QX
NaicaTM－crystal－微滴芯片式数字PCR系统
导语：数字PCR技术是基于PCR技术发展起来的核酸检测和定量的最新技术，在众多应用中，在精准医疗方面的应用尤为突出。法国Stilla Technologies公司专注于开发新一代核酸绝对定量技术，其旗下品牌Naica TM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统具有高灵敏度、高精
数字PCR在移植排斥监控中的应用
为了降低器官移植中移植物排斥导致的风险，数字PCR技术通过监测受体中移植器官供体的循环DNA水平来检测早期移植排斥。
数字PCR在病毒临床检测中的应用
概述2015年刚成历史，2016年已在眼前。就这样，年复一年间沧海成桑田。生命科学领域，新方法层出不穷，老方法不断升级，好不热闹。也如孔子的感叹：逝者如斯夫，不舍昼夜。就拿PCR技术来说，荧光定量PCR作为一种进行基因表达分析的技术，截至目前最大的应用市场是病原微生物的核酸体外诊断。展望未来，作为q
数字PCR助力艾滋病疗法的开发
Bio-Rad公司于去年底推出了QX100微滴式数字PCR系统，市场反应不错。最近，Sangamo BioSciences公司的研究人员利用此系统产生了高度精确且重复的数据，离HIV功能疗法的开发又近了一步。 让我们听听Sangamo BioSciences资深科学家Gary Le
crystal数字PCR如何实现的核酸绝对定量？
crystal数字PCR技术是一种核酸分子的绝对定量技术，原理是将PCR反应体系分配到大量微小的反应器中，在每个微反应器中包含或不包含 1 个或多个拷贝的目标核酸分子 (DNA 模板) ，进行"单分子模板"PCR 扩增。扩增结束后，通过阳性反应单元(通过终点荧光信号判断)的数目和统计学方法计
数字PCR技术更准确检测新冠病毒
对于新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的检测，实时定量PCR一直是金标准。不过对于某些患者，qPCR的结果似乎每天都在变化，而且有不少假阴性。近期的研究表明，ddPCR检测能够减少假阴性结果，而Bio-Rad Laboratories公司也利用其微滴式数字PCR系统开发出新型冠状病毒的检测产品
数字PCR在甲基化含量鉴定的应用
作为表观遗传学研究中重要的一个研究方向——甲基化程度分析，现阶段有不同的方法或技术来进行研究：如传统的亚硫酸氢盐处理后的克隆测序法、抗体检测法、定量PCR检测法等受限于方法学的问题，不能获得甲基化程度的精确定量，而数字PCR系统通过对样品的微液滴处理及目标分子的绝对拷贝数定量，为甲基化程度的精确定量
数字PCR技术：从液体活检走向商业临床市场
2017年12月Bio-Rad BCR-ABL基因融合ddPCR检测试剂盒获得CE-IVD 认证（产品进入欧盟境内销售的通行证），这是基于ddPCR技术第一个获批的可用于临床检测的、基于血液样本的、用于监测慢性粒细胞白血病患者疗效的诊断试剂。在上周 JP摩根健康产业大会上， Bio-Rad CE
基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测
基于EVAGREEN®方法的CRYSTAL数字PCR绝对定量检测EvaGreen®是一种无致突变性、无细胞毒性的DNA结合染料，NaicaTM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系统可兼容EvaGreen®染料进行的数字PCR实验分析。反应体系中游离的的EvaGreen®染料不发出荧光信号，但
数字PCR在无创产前筛查的应用
无创伤的产前诊断, 如21号染色体为3倍体的唐氏综合征、已知父母基因型的胎儿地中海贫血或胎儿遗传性耳聋基因检测等。目前无创检测标本来源主要为孕妇血液，而待检测的胎儿DNA受到母体DNA的干扰，影响了检测的准确性。数字PCR技术可以作为二代测序法的补充来进行无创伤产前诊断，从而提高工作效率、降低检测
Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用
华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法，可从粪便样本中检测与EE（热带肠病）关联的人mRNA，灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA，可作为反应病人消化道病
数字PCR在肿瘤的液体活检中的应用
肿瘤学研究是数字PCR的重要应用领域，该技术作为极为重要的工具，能够识别DNA突变（例如EGFR）、肿瘤患者用药监控、基因扩增检测、循环肿瘤细胞（CTC）特性研究、长链非编码RNA检测、液体活检中循环的核酸（cfDNA）和肿瘤细胞（CTC）的绝对定量等研究中。
数字PCR在肿瘤治疗的伴随诊断的应用
常用体液来源（如血液，胸腹水，唾液及尿液等）的待检标本中的DNA，有正常脱落体细胞和病变脱落细胞两种来源，前者的量远大于后者。通过微液滴处理能在每个微液滴中有效减少正常体细胞DNA的干扰，实现肿瘤标记物的有效检测，如EGFR，ALK，ROS1，KRAS、BRAF等基因的突变检测、乳腺癌/胃癌的HE
数字PCR在－药物基因组检测的应用
能够通过PCR技术实现药物基因组的检测，提高合理用药水平，具有通量较高，操作简单，仪器设备易普及等优点。 数字PCR冷知识：胎儿性别不是只有B超可以看出来，一只精通数字PCR的科研狗，也可以测出来。
数字PCR新方法来测量端粒长度
近日，新加坡国立大学利用数字PCR技术，开发出一种新颖、快速的端粒测量方法—单端粒绝对长度快速分析法(SATR)，可在临床环境中快速确定癌症和年龄相关疾病中的端粒酶异常，有助于临床医生更快地为患者进行诊断与计划治疗对策。相关研究日前已发表在《Science Advances 》期刊上。STAR分
数字PCR在糖尿病治疗中的应用
数字PCR技术目前在糖尿病中的研究热点，通过定量检测非甲基化DNA的水平，对I型糖尿病β细胞死亡进行定量，从而监控病情发展。
数字PCR和HRM在肿瘤样本中的应用
摘要：Vogelstein和Kinzler（美国国家科学院院刊，1999年）第一次描述了Digital PCR（dPCR）的概念，一种在微量细胞群中（如原发性肿瘤组织）鉴定突变的方法。通过稀释样品DNA到一个单个分子水平，它可以把PCR自然模拟指数转化为数字信号。当PCR成功的扩增出这些单个