NatureMedicine:纤维化病变的治疗策略
在组织受到损伤(比如外伤)的情况下,间质细胞(Mesenchymal)通过分泌胞外基质(extracellular matrix)促进组织修复。这一过程受到TGF-b调节。正常情况下,TGF-b的信号会随着组织的慢慢修复而逐渐下调,最终使间质细胞分泌基质的能力下调到正常水平。而在组织病变的情况下,局部TGF-b的表达量如果始终维持较高的水平,就会不断诱导间质细胞分泌大量的胞外基质,最终造成组织器官的纤维化。临床上纤维化也是组织器官病变的主要形式之一,比如常见的肝硬化,肺纤维化等等。在最新的一项研究中,来自德国Erlangen-Nuremberg大学的Jörg H W Distler研究组发现了一种孤儿核受体 -NR4A1在负向调节TGF-B信号传递过程中的作用,相关研究成果发表在最近一期的《Nature Medicine》杂志上。 TGF-b上调NR4A1的表达。首先,作者比较了健康人与患有系统性纤维化(systemic ......阅读全文
小鼠βactin基因的克隆表达(3)
(2)质粒的提取及酶切鉴定分析 质粒的提取按照质粒提取试剂盒的操作步骤进行,然后进行双酶切鉴定。 管号 ① ② 质粒DNA
小鼠βactin基因的克隆表达(4)
实验步骤:(1)诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落,接入5ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养2h以上,至对数中期(A550=0.5~1.0)。向诱导管中加入IPTG使其浓
小鼠βactin基因的克隆表达(2)
实验步骤: (1)目的基因与表达载体的连接反应: ①表达载体和目的片段的酶切 管号 ① ② pGEX 4T-1
小鼠βactin基因的克隆表达(1)
动物组织RNA的提取实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA
小鼠纤维肉瘤细胞-WEHI-164细胞
小鼠纤维肉瘤细胞 WEHI 164细胞 在艾滋病(AIDS)面前,啮齿动物似乎比人类更为强大。大鼠和小鼠对人体免疫缺损病毒(HIV)具有天生的抵抗能力——这一情况也导致研究人员寻找一种AIDS小型动物模型的夙愿一直无法实现。然而科学家zui近发现,一种经过基因改造的小鼠很容易感染HIV,这就为AI
PNAS:小鼠模型需慎用,基因表达差异大
PNAS:小鼠模型需慎用,基因表达差异大 小鼠被广泛用于模拟人类代谢、疾病和药物应答,是医学研究中的一个基本工具。然而斯坦福大学的研究团队指出,人类和小鼠的基因表达存在着惊人的差异,不论是蛋白编码基因还是非编码基因。这项研究发表在十一月十七日的美国国家科学院院刊PNAS杂志上。 Mic
食物纤维为什么能改善小鼠心脏健康?
一条线索来自肠道里的各种微生物,这些小东西帮助我们加工食物,特别是纤维。也许,某些有益的微生物在某种程度上使不可消化的植物纤维变成了有益“身”“心”健康的物质,但这种联系是不确定的。 威斯康星大学麦迪逊分校的研究人员已经在高纤维饮食小鼠模型中鉴定了一种特殊脂肪酸的保护机制,这种脂肪酸名叫丁酸盐
小鼠心脏成纤维细胞胶原酶浓度
1mg/ml。小鼠心肌成纤维细胞的组织来源于实验动物的正常心脏组织,分离时采用二型胶原酶分离,浓度为1mg/ml(用无钙台氏液配制),同时酶液里加入牛磺酸,BSA。胶原酶能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养
实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 孕鼠试剂、试剂盒 PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM仪器、耗材 眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离
小鼠胚胎成纤维细胞传代培养
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞传代培养主要试剂0.05%Trypsin、细胞基础培养液、DPBS主要设备100 mm培养皿、15 mL离心管、倒置显微镜实验步骤(1)预先37℃温热细胞基础培养液及0.05%Trypsin。(2)用枪头吸弃培养皿中的培养液,并用DPBS冲洗一遍,然后加入2 mL 0.05
基因疗法治愈小鼠肺纤维化!
特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis)是一种潜在致命疾病,在概念上,激活端粒酶可治疗肺纤维化。西班牙国家癌症研究中心的端粒和端粒酶组(CNIO)首次在活体动物身上证明,通过基因疗法延长端粒确实是肺纤维化的有效治疗方法。 文章一作Maria A. Blasc
小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养主要试剂75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、细胞基础培养液 主要设备35 mm培养皿、60 mm培养皿、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、冻存管、眼科剪、眼科弯镊、离心机实验材料怀孕13.5天【将成年雌、雄小鼠放在同笼中饲养
提高SIRT6基因表达,能够延长小鼠模型30%寿命
生老病死是自然规律,人总会不可避免地衰老,并伴随着健康状况下降、能量稳态下降、脆弱性增加。众所周知,人类整个生命过程中,染色体末端的端粒会随着细胞分裂而不断缩短,就像是生命的一个时钟,当端粒缩短到一定程度,生命也就随之停止。 就在几天前,Nature Communications 期刊发表了一
真菌纤维素酶基因的克隆与表达
近年来,随着现代生物技术的迅猛发展,越来越多的真菌纤维素酶基因得到克隆和表达。经过对比发现,不同真菌菌株的同一类型的纤维素酶基因有较高的同源性,但同一菌种不同类型的纤维素酶基因间的同源性相对较低[8]。已知里氏木霉有8个纤维素酶基因得到克隆,包括编码纤维二糖水解酶的cbh1、cbh2和编码内切葡聚糖
真菌纤维素酶基因的克隆与表达
随着现代生物技术的迅猛发展,越来越多的真菌纤维素酶基因得到克隆和表达。经过对比发现,不同真菌菌株的同一类型的纤维素酶基因有较高的同源性,但同一菌种不同类型的纤维素酶基因间的同源性相对较低[8]。已知里氏木霉有8个纤维素酶基因得到克隆,包括编码纤维二糖水解酶的cbh1、cbh2和编码内切葡聚糖酶的eg
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
原代MEF的分离和冻存 MEF滋养板的制备 实验材料 母鼠 试剂
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
胰酶消化法1 胰酶消化法2 实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
原代MEF的分离和冻存 MEF滋养板的制备 实验材料 母鼠 试剂
小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化
实验材料 母鼠试剂、试剂盒 PBS胰蛋白酶溶液DNase 溶液仪器、耗材 无菌解剖器械不锈钢滤网烧瓶培养箱实验步骤 1. 准备下列试剂和材料:确定怀孕期的母鼠(孕期14至6天)无菌解剖器械(镊子、剪刀、手术刀片)Cellector 带收集装置的不锈钢滤网,1 mm 直径筛网内有搅拌棒的 125 ml
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗相关研究。实验方法胰酶消化法1胰酶消化法2实验方法原理将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
胰酶消化法1 胰酶消化法2 实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF
小鼠胚胎成纤维细胞MEF培养相关知识总结
小鼠胚胎成纤维细胞的富集1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎
小鼠纤维蛋白原(Fibrinogen)ELISA试剂盒
小鼠纤维蛋白原(Fibrinogen)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 Fibrinogen 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Fibrinogen与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠Fibrinogen,形成
小鼠胚胎成纤维细胞MEF培养相关知识总结2
网友观点是:1、关于如何确底胚胎期12.5d~13d的小鼠?希望大家能够介绍一下自己所采用的方法,集思广益。我所采用的方法是选择同一天出生的三对小鼠,到成熟(8~10 w)后,分三周合笼,(每周合笼一对),然后待最早合笼的小鼠产崽后,再取另两个雌鼠的胚胎。不知道这样行不行,也没注意别人是怎样做的。另
Cell:膳食纤维引发肝癌?小鼠试验揭示与肠道菌有关
膳食纤维被营养学界认定为“第7大类营养元素”,与我们的健康有很大的关联。然而,一项发表在《Cell》期刊的最新研究却提醒我们:食用精细化膳食纤维需谨慎!科学家们以小鼠为模型发现,精制可溶性纤维的摄入,竟然会引发肝癌!而这背后竟是肠道细菌在“作祟”。 通常,水果、蔬菜等天然食物中含有膳食纤维,对
揭示新小鼠巨细胞病毒转录激活因子病毒晚期蛋白表达
2020年1月2日,病毒学期刊Journal of Virology 在线发表了中国科学院上海巴斯德研究所钱志康课题组的最新研究“Murine Cytomegalovirus Protein pM49 Interacts with pM95 and Is Critical for Vira
Sema3aCreERT2小鼠用于特异靶向心脏Purkinje纤维
上个月,中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组又有新科研成果发表在 Scientific Reports 上啦,题为“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2 ”,提供了一种新的遗传学工具——Sema3a-CreERT2
Sema3aCreERT2小鼠用于特异靶向心脏Purkinje纤维
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全球最快小鼠“全身成像”-清晰可见单根神经纤维
在生物体内,有一张由亿万外周神经纤维编织成的精密“生命物联网”,承载着大脑与全身器官的双向通信,调控运动、感觉以及内脏的功能。然而,看清这张网络的“真容”却极其困难。因为神经纤维直径仅为发丝的几十分之一,蜿蜒交织遍布全身。长期以来,如何同时“看得清”单根神经纤维,又能“看得全”全身神经网络的整体构架
Sema3aCreERT2小鼠用于特异靶向心脏Purkinje纤维
上个月,中国科学院生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组又有新科研成果发表在 Scientific Reports 上啦,题为“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2 ”,提供了一种新的遗传学工具——Sema3a-CreERT2工具