天津工生所在产糖醇酵母基因组重组改造研究中取得进展
糖醇是一类重要的功能性化合物，具有低热值、低胰岛素代谢响应、防龋齿等特性。2004年，美国能源部（DOE）将其中的D-阿拉伯糖醇和木糖醇列为12类高附加值生物基化学品之一，已广泛应用于食品、医药及化工领域。目前，生产糖醇的方法主要是化学加氢法，但是该方法存在设备投资大，底物要求高等问题，因此，绿色高效的生物合成功能糖醇方法备受关注。而要实现功能糖醇的生物合成，核心在于获得高产糖醇微生物，并根据生产工艺进行有效改造。 中国科学院天津工业生物技术研究所进化与代谢工程研究组在前期工作中筛选获得了一株高效产糖醇异常毕赤酵母Pichia anomala TIB-x229。P. anomala TIB-x229可以将葡萄糖转化为D-阿拉伯糖醇和核糖醇，其最高糖醇转化率可达0.57g/g。P. anomala TIB-x229也可以将木糖转化为D-阿拉伯糖醇、核糖醇和木糖醇，其最高转化率可达0.77g/g。同时，以不同比例葡萄糖和木糖混......阅读全文
酵母转化
· Yeast Transformation (Gietz Lab)LiAc/SS-DNA/PEG Transformation· Yeast Transformation (Breeden Lab)LiAc method· Large-Scale Y
酵母转化实验
实验材料酵母菌株质粒仪器、耗材YPD 平板SC-ura平板产孢子平板实验步骤展开
酵母转化实验
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材 摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤 1. 在开始实验前2天，接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中，于30℃恒温摇床，培养过夜。 2. 转化的前一天晚上，往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD
酵母转化实验_电穿孔转化
实验材料酵母试剂、试剂盒二硫苏糖醇山梨醇仪器、耗材电穿孔仪器电击池水浴锅实验步骤1. 实验前两天，将转化用酵母菌株的单菌落接种于5 ml YPD培养基中，30℃过夜培养至饱和。 2. 转化前一天晚上，在装有500 ml YPD培养基的2 L 无菌烧瓶中接种适量的过夜培养液，于30℃剧烈摇动培养过
酵母转化实验_乙酸锂转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 在开始实验前2天，接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中，于30℃恒温摇床，培养过夜。 2. 转化的前一天晚上，往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD培养基，然后
酵母的高效转化
酵母的高效转化1．接种5ml液体YPAD或10ml SC，30℃下振荡培养过夜。2．计数过夜培养物细胞密度，以最终5×106个/ml的细胞密度接种50ml YPAD培养液。3．置30℃，200r/min振荡培养至2×107个细胞/ml，通常需要3～5小时，该培养物的细胞足够供十次转化用。4．用50m
转化毕赤酵母
实验概要本实验介绍了毕赤酵母的转化方法。主要试剂1. 转化当天，配制下列试剂：存于4度5% SDS溶液RD(Regeneration Dextrose) 融化琼脂100ml2. 溶液：转化试剂40%PEG：用水配制40%(w/v)PEG3350(试剂纯)CaT：20mMTris pH7.5，20mM
酵母转化实验_原生质体转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD山梨醇CaCl2-MEPEG选择性再生琼脂仪器、耗材水浴锅离心机分光光度计培养箱实验步骤1. 在实验前2天，将转化用酵母菌株的单菌落接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养过夜（如果酵母菌株是温度敏感的应在低温下培养）。2. 转化前一天晚上，从5 ml 过夜培养
酵母表达载体的构建与酵母转化
实验概要本实验介绍了酵母表达载体的构建、酵母转化方法及酵母抗逆实验。主要试剂试剂配制：1 .1 M Tris.Cl(pH 7.5)(100 ml)：12.1g Tris碱，加80 ml ddH2O，浓HCl调pH 7.5，定容至100 ml；2. 0.5 M EDTA(pH 8.0) (100 ml
质粒的酵母直接转化
实验方法原理将待测基因与Gal4或LexA或其他合适蛋白的DNA结合域融合构建诱饵质粒；将诱饵质粒转化缺乏报告基因启动子的酵母细胞株中，选择被转化的酵母；再将文库质粒转化到酵母中实验材料单菌落试剂、试剂盒PLATE溶液载体DNA转化质粒DNA仪器、耗材离心管离心机实验步骤1、 用牙签从平板中挑取单菌
质粒的酵母直接转化
1．用牙签从平板中挑取单菌落（直径2～3mm），转移到1.5ml的无菌离心管中。2．将10μl载体DNA（100μg）与10μl转化质粒DNA混合，振荡均匀。（若转化DNA是用未经RNA酶处理的“mini－prep DNA”方法制得，则不需加载体DNA）。3．加0.5ml PLATE溶液，振荡。PL
毕赤酵母电转化
实验概要本实验介绍了毕赤酵母电转化方法。该方法无需产生去壁细胞，是产生毕赤酵母重组子的简便方法。与去壁细胞效率相似。实验步骤1. 细胞准备： 1) 在含5mlYPD 的50ml 离心管中，培养毕赤酵母，30 度过夜。 2) 取0.1-0.5ml 过夜培养物，接种含500ml 新鲜培养基的2L
毕赤酵母LiCl－转化方法
实验概要本文介绍了毕赤酵母LiCl 转化方法。该程序是电转化的替代方法。转化效率为102-103cfu/ug线性化DNA。主要试剂溶液准备：不能用醋酸锂，一定要用氯化锂1. 用无菌去离子蒸馏水配制1M LiCl，过滤除菌，用无菌水稀释2. 用无菌去离子蒸馏水配制50%PEG(3350)，过滤除菌，存
酵母转化的几种方法
Modified Yeast Transformation Inoculate cells from an overnight culture into 50 ml YEPD and incubate at 30°C with shaking. Typically, add 0.1 to 0.2 m
天津工生所建立全细胞转化合成蒜糖醇技术
蒜糖醇作为一种六碳稀少糖醇，具有低热量、不易被利用、防龋齿、降血压等有益人体健康的特殊功能，也是一种药物中间体，用来合成治疗糖尿病、癌症及病毒感染的药物。另外，作为多羟基化合物的糖醇，是植物中唯一能携带矿质养分在韧皮部中进行快速运输的物质，因此，近年来利用糖醇复合体技术将糖醇与多种微量元素进行螯
糖、醇发酵试验
培养基： 蛋白胨 l0g 肉膏 3g 氯化钠 5g Andrade指示剂 l0ml 蒸馏水 1000ml 将上述成分溶于蒸馏水，加糖或醇，校正 pH7.1～7.2，分装，高压灭菌121℃15min。冷却备用。 葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇的浓度为 1％。其他糖类和卫矛醇、
酵母菌落直接质粒转化法
酵母菌落直接质粒转化法1．用牙签从平板中挑取单菌落（直径2～3mm），转移到1.5ml的无菌离心管中。2．将10μl载体DNA（100μg）与10μl转化质粒DNA混合，振荡均匀。（若转化DNA是用未经RNA酶处理的“mini－prep DNA”方法制得，则不需加载体DNA）。3．加0.5ml PL
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验_LiAc转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒腺嘌呤亮氨酸LiAc仪器、耗材YEA 平板实验步骤1. 在 YEA 平板上培养细胞直到长成可见单菌落。2. 接种单菌落到添加有 150 mg/L 腺嘌呤、亮氨酸和/或尿嘧啶等营养缺陷互补物的 YEA 或 PM 培养基中，于允许温度以 200 r/min 振荡培养防止酵母菌沉积
天津工生所在产糖醇酵母基因组重组改造研究中取得进展
糖醇是一类重要的功能性化合物，具有低热值、低胰岛素代谢响应、防龋齿等特性。2004年，美国能源部（DOE）将其中的D-阿拉伯糖醇和木糖醇列为12类高附加值生物基化学品之一，已广泛应用于食品、医药及化工领域。目前，生产糖醇的方法主要是化学加氢法，但是该方法存在设备投资大，底物要求高等问题，因此，绿
简述转化糖的特性
蔗糖具右旋光性，而反应生成的混合物则具有左旋光性，旋光度由右旋变为左旋的水解过程称为转化，故这类糖称转化糖。 无色透明黏稠液体，有很强吸湿性，甜度为蔗糖的1.3倍。10%～15%的转化糖可防止蔗糖重结晶，常用于硬糖制造，以防止“返砂”的质量缺陷。
糖醇的应用介绍
1975年，科学家在植物的韧皮部汁液中发现糖醇物质，其，远远高于氨基酸的含量（5~40g/L）。1980年美国布兰特股份有限公司开始研制开发糖醇物质，1992年相关产品问世。但直到1996年，美国加利福尼亚大学的Patrick Brown 教授才发现糖醇可作为硼等其它营养元素载体，携带矿质养分在植物
甘露糖醇的性状
甘露糖醇，又名甘露醇，分子式为C6H14O6，相对分子质量182.17，无色至白色针状或斜方柱状晶体或结晶性粉末。无臭，具有清凉甜味。甜度约为蔗糖的57%~72%。每克产生8.37J热量，约为葡萄糖的一半。吸湿性小，后水溶液稳定。对稀酸、稀碱稳定。不被空气中氧氧化。溶于水（5.6g/100mL,20
关于糖醇的简介
糖醇是单糖经催化氢化及硼氢化钠还原为相应的多元醇。糖醇虽然不是糖但具有某些糖的属性。目前开发的有山梨糖醇、甘露糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇等,这些糖醇对酸、热有较高的稳定性,不容易发生美拉德反应,成为低热值食品甜味剂,广泛应用于低热值食品配方。国外已把糖醇作为食糖替代品,广泛应用于食
甘露糖醇的应用
甘露糖醇是六碳糖醇，可由果糖经催化氢化制得，吸湿性低，常被用作胶姆糖制造时的撒粉剂，以避免与制造设备、包装机械黏结，也用作增塑体系组分，使其保持柔和特性。还可用作糖片的稀释剂或充填物和冰淇淋及糖果的巧克力味涂层。具有愉快风味，在高温下不退色，化学性质不活泼。它的愉快风味及口感可遮掩维生素、矿物质及药
酿酒酵母的电穿孔转化法实验_电穿孔转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG3350仪器、耗材YPAD 液体培养基涡旋振荡器实验步骤1. 将菌株接种 100 ml 的 YPAD 液体培养基，30℃ 振荡培养过夜，使细胞滴度达到每毫升 1X108 到 2X108 个细胞。2. 3000 g 离心 5 分钟沉淀细胞，用 100 ml 灭菌水洗两遍，
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验_电穿孔转化法
实验材料细胞试剂、试剂盒三梨糖醇仪器、耗材PM 或 YE 培养基实验步骤1. 用 PM 或 YE 培养基培养细胞，至滴度到每毫升 1X107 个细胞。2. 用冰冷的过滤除菌的 1.2 mol/L 三梨糖醇洗细胞 3 遍，以降低细胞的导电性。3. 用冰冷的 1.2 mol/L 三梨糖醇重悬细胞，使滴度
LiCl法转化毕赤酵母菌
实验概要本实验介绍了用LiCl法将重组质粒导入毕赤酵母菌X-33的转化方法。主要试剂甘油，YPD培养基，50% PEG，1 mol/L LiCl，Sac I主要设备摇床，高速离心机，1.5 ml微量离心管，水浴锅实验材料重组质粒pPIC6αA-APC，毕赤酵母菌X-33实验步骤1. 取毕赤酵母甘油种
酿酒酵母的电穿孔转化法实验
材料的准备 电穿孔转化法 实验材料 高分子量 DNA 试剂、试剂
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验
非洲粟酒裂殖酵母的LiAc转化法非洲粟酒裂殖酵母的电穿孔转化法实验材料细胞 试剂、试剂盒腺嘌呤
非洲粟酒裂殖酵母的转化实验
非洲粟酒裂殖酵母的LiAc转化法 非洲粟酒裂殖酵母的电穿孔转化法 实验材料 细胞