研究建立植物高特异性抵御DNA病毒新方法

双生病毒(Geminiviruses)是存在于植物中唯一一类具有孪生颗粒形态的单链DNA病毒,也是目前已知的最大的单链DNA病毒家族。据ICTV(International Committee on Taxonomy of Viruses)报道该类病毒目前已增至九个属,其在单子叶和双子叶植物中具有广泛的宿主,对农业生产危害较大。传统抗病机理的研究主要基于对病毒基因功能的分析及宿主病毒互作机理的解析,但目前在育种中的应用还比较有限。中国科学院遗传与发育生物学研究所高彩霞研究组先前利用源于细菌中的适应性免疫系统CRISPR/Cas9特异识别切割病毒和外源DNA的特性,以甜菜严重曲顶病毒BSCTV(Beet severe curly top virus)为模式病毒,分别选取模式植物本氏烟(Nicotiana benthamiana)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)为寄主材料,在植物中建立了新型、简易、高效的双生......阅读全文

研究建立植物高特异性抵御DNA病毒新方法

  双生病毒(Geminiviruses)是存在于植物中唯一一类具有孪生颗粒形态的单链DNA病毒,也是目前已知的最大的单链DNA病毒家族。据ICTV(International Committee on Taxonomy of Viruses)报道该类病毒目前已增至九个属,其在单子叶和双子叶植物中具

植物DNA提取原理

通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。十二烷基肌酸钠(sarkosyl)、十六烷基三

植物DNA提取实验

机械法             实验方法原理 这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破

植物DNA提取实验

实验方法原理 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化出DNA。实验材料 幼嫩的植物材料试剂、试剂盒 液氮CTAB抽提缓冲液NaACTris-HCl EDTA氯仿异戊醇TE buffer仪器、耗材 瓷研钵离心管离心机实验步骤 一

HIV是DNA病毒还是RNA病毒

RNA病毒HIV:人类免疫缺陷病毒直径约120纳米,大致呈球形。病毒外膜是类脂包膜,来自宿主细胞,并嵌有病毒的蛋白gp120与gp41;gp41是跨膜蛋白,gp120位于表面,并与gp41通过非共价作用结合。向内是由蛋白p17形成的球形基质,以及蛋白p24形成的半锥形衣壳,衣壳在电镜下呈高电子密度。

dna病毒和rna病毒的区分

这两种病毒的遗传物质是不一样的,DNA病毒以DNA作为遗传物质,而RNA病毒以RNA作为遗传物质,其次这两种病毒的结构也是不一样的,DNA病毒一般是双螺旋结构的,而RNA病毒一般是单链结构的,除此之外,RNA病毒的复制过程要比DNA病毒的更复杂一些,因此在治疗上多半也是更困难一点,比如由艾滋病毒引起

病毒-DNA-的提取实验——培养细胞中病毒-DNA-的提取

实验材料细胞试剂、试剂盒裂解液TE 缓冲液仪器、耗材培养瓶EP管真空泵实验步骤1. 贴壁培养细胞倾去培养液,加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中,2000 r/min 离心 10 min, 弃上清液,用 PBS 悬浮细胞,离心洗涤 2~3次,用 PBS

植物病毒的概念

植物病毒是一种病毒。早在1576年就有关于植物病毒病的记载,举世闻名的、美丽的荷兰杂色郁金香,实际上就是现在所谓郁金香碎色花病毒造成的。

植物病毒的特点

植物细胞最外层有以纤维素为材料构成的细胞壁,足以抵抗病毒的侵入,因而植物病毒的特点之一是必须通过寄主的伤口方能侵入。实验室内常用摩擦叶面造成轻微伤口来接种某些植物病毒。农田操作、人口移植、摘心、整枝、打杈时手沾染含病毒的汁液,均可造成病毒传染。病毒也可通过嫁接或植物根在土壤砂砾中伸长时所造成的伤口而

植物病毒RNA提取

大多植物病毒RNA为单链RNA,并且其极性与mRNA极性相同,植物病毒RNA提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。   一、材料   提纯TMV病毒液(10mg/ml)。   二、设备   冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。   三、试剂   TE-饱和酚:氯仿(1:1),氯仿

植物病毒分离方案

方案一:带病毒的植物叶、茎、果实、根等粉碎后—20℃冰冻后制成匀浆→用0.5M,PH7.0柠檬酸缓冲液抽提→双层纱布过滤→滤液加入6%PEG(MW6,000)及3%Nacl,充分搅拌40分钟,置冰箱4℃过夜→高速冷冻离心机8×50ml转头,7000rpm,4℃离心20分钟,弃上清,取沉淀→沉淀是浮于

SDS法分离植物DNA

实验概要Dellaporta,Wood 和 Hicks (1983) 法分离植物总基因组DNA,通过实验掌握SDS法从植物叶片提取DNA 的原理和方法。主要试剂提取缓冲液 [ 详细信息:100mM Tris.Cl,;50mM EDTA; 500mM Nacl;40mmol/L 巯基乙醇,随用随加。]

植物病毒检测仪快速检测植物病毒性危害

    植物病毒检测仪是一款可以快速检测植物病毒性病害的植物生理检测仪器。通过这些仪器,人们可以快速发现植物病害的种类,从而开展针对性的防治工作,避免由于植物病毒性病害造成的大面积植物病害,保障作物的产量。     现在主流的植物病害有三大类,一种是由于虫害造成的病害,一种是由于土壤问题造

病毒-DNA-的提取实验——拭子标本中病毒-DNA-的提取

实验材料拭子标本试剂、试剂盒TE 缓冲液裂解液蛋白酶K仪器、耗材离心机棉签实验步骤预操作:将采有口腔、鼻腔或生殖道等处分泌物标本的棉签置于 2 ml 生理盐水中,洗下标本。若标本在 4 h 内处理,可置于室温保存,否则需 4℃保存。1. 将生理盐水中的标本以 2 000 r/min 离心 5 min

病毒-DNA-的提取实验——全血细胞中病毒-DNA-的提取

实验材料全血试剂、试剂盒裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材离心机水浴锅实验步骤1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀, 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀,再重复离心 1次,弃上清液。3. 用 117µL

痘苗病毒DNA提取实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 纯化的痘苗病毒

痘苗病毒DNA提取实验

实验方法原理 实验材料 纯化的痘苗病毒试剂、试剂盒 Tris•Cl 溶液SDS蔗糖溶液 蛋白酶 K用 50 mmol/L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚1:1苯酚氯仿1 mol/L 乙酸钠乙醇仪器、耗材 分光光度计Sorvall 离心机实验步骤 1. 在 260 nm 处确定纯化的疸苗病毒的光密

病毒-DNA-的提取实验

实验方法原理 实验材料 全血试剂、试剂盒 裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材 离心机水浴锅实验步骤 1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀, 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀,再重复离心 1次,弃上清液

痘苗病毒DNA提取实验

如果提取的痘苗病毒DNA用于转染,则应在蛋白酶 K 消化和苯酚抽提后分离。具体方法见本实验。实验材料纯化的痘苗病毒试剂、试剂盒Tris•Cl 溶液SDS蔗糖溶液蛋白酶 K用 50 mmol/L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚1:1苯酚氯仿1 mol/L 乙酸钠乙醇仪器、耗材分光光度计Sorval

植物病毒检测仪分析植物病毒的3种传播方式

    病毒是件很可怕的事项,人们听到这两个字都会感觉很恐怖,植物在生长过程中,由于种种原因,也很容易感染病毒,植物病毒是指感染高等植物、藻类等真核生物的病毒,植物一旦感染病毒,那么对植物的生长就会造成严重的伤害,因此,我们就要使用植物病毒检测仪对其进行检测并且及时预防。植物病毒主要是通过哪些方式进

病毒-DNA-的提取实验——新鲜或冷冻组织中病毒-DNA-的提取

实验材料新鲜或冷冻组织试剂、试剂盒匀浆缓冲液裂解液仪器、耗材剪刀匀浆器离心机实验步骤1. 取新鲜或刚解冻的组织去除血水和结缔组织,在冰浴上剪成小碎块。2. 将组织碎块移入预冷的匀浆器中,按 10 ml/g 加入匀浆缓冲液,混匀,制成匀浆液。3. 将匀浆液移人 Ep 管, 5000 r/min 离心1

植物细胞线粒体DNA的提取

实验方法原理 分离线粒体DNA和叶绿体DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分离完整的细胞器,然后从细胞器中提取DNA。要获得高纯度的细胞器DNA,关键是要把所要的细胞器与其他亚细胞结构分离开来,这可以通过差速离心或梯度离心来完成。完整的细胞器经裂解后,可以通过CsCl离心或酚-氯仿抽提获得DNA。

植物DNA提取实验——机械法

植物DNA提取实验用于:(1)获得较纯的真核细胞基因组DNA;(2)后续PCR分析,RFLP分析,基因文库的构建,基因探测等的研究。实验方法原理这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破裂。同时将核酸与植物

植物细胞线粒体DNA的提取

实验方法原理分离线粒体DNA和叶绿体DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分离完整的细胞器,然后从细胞器中提取DNA。要获得高纯度的细胞器DNA,关键是要把所要的细胞器与其他亚细胞结构分离开来,这可以通过差速离心或梯度离心来完成。完整的细胞器经裂解后,可以通过CsCl离心或酚-氯仿抽提获得DNA。在

CTAB法提取植物总DNA

实验概要CTAB法是一种快速简便的提取植物总DNA的方法,通过实验掌握CTAB法从植物叶片提取DNA的原理和方法。 实验原理CTAB  (hexadecyltrimethylammonium  bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特

植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量

第一种方法是测量260/280的比例,判断是否有蛋白质的污染。在260nm和280nm处测定DNA溶液的光吸收,A260与A280之比应在1.75-1.80之间。低于此值表明制备物中残留蛋白质成分较高或含有酚,高于此值表明有RNA的残留。第二种方法是凝胶电泳分析,看有无断裂降解。影响DNA提取质量的

简述植物病毒的简史

  1892年Д.И.伊万诺夫斯基与1898年M.W.拜耶林克证明,烟草花叶病为比细菌还小的病原体所引起,可通过病叶汁液传染,20世纪初,已经知道昆虫能传播植物病毒病,如叶蝉传播水稻矮缩病。1930年,Н.Н.麦金尼和汤清香发现病毒可以变异,产生致病力强弱不等的毒株,而且不同毒株之间有干扰作用。19

概述植物病毒的特点

  植物细胞最外层有以纤维素为材料构成的细胞壁,足以抵抗病毒的侵入,因而植物病毒的特点之一是必须通过寄主的伤口方能侵入。实验室内常用摩擦叶面造成轻微伤口来接种某些植物病毒。农田操作、人口移植、摘心、整枝、打杈时手沾染含病毒的汁液,均可造成病毒传染。病毒也可通过嫁接或植物根在土壤砂砾中伸长时所造成的伤

植物病毒病检测方法

植物病毒病是农业生产上一种重要病害,严重影响农作物的产量和质量, 目前还没有1种治疗效果较理想的药剂,对发病植株做到早期诊断及提前检测就显得尤为重要。植物病毒学历经近百年的发展,植物病毒的检测方法与手段也在不断发展与改进。常用的方法有侵染力测定法、血清学方法、电子显微镜计数和分子生物学法等。1.1侵

利用植物病毒实现植物根系虫害防护手段

  美国加利福尼亚大学圣地亚哥分校和凯斯西储大学研究人员发现,一种生物纳米微粒,也是一种植物病毒,能够更好地将农药分子传送到通常无法到达的地下深处。研究成果日前发表于《自然—纳米技术》。  这项科研工作可以帮助农民仅用较少的杀虫剂就能更好地管理难以对付的害虫,如寄生线虫,它们常常破坏土壤深处的植物根